抗癌药物溴泰君的药代动力学和毒代动力学研究

论文摘要

本文进行了创新的抗癌药物5-溴粉防己碱（溴泰君）的药代动力学、毒代动力学以及探索性地应用代谢组学方法研究其毒性标志物。本研究是国家973计划“基于功能基因组学的创新药物研究”课题（2004BC518902）和天津市科技发展计划重点项目“代谢组学用于中药安全性和作用机理研究”课题（05YFJZJC01100）的基础研究内容之一。从以下四方面获得了具有科学意义和应用价值的研究结果:1.建立了大鼠血浆中粉防己碱测定的液相色谱/质谱联用法,该方法快速、灵敏、专署性强,并应用此方法进行粉防己碱单剂量口服给药后在大鼠体内的药代动力学研究,结果显示粉防己碱口服给药的体内代谢过程符合一室模型;2.建立了大鼠血浆中溴泰君的液相色谱/质谱联用测定方法,并将该方法应用于溴泰君单剂量口服给药后在大鼠体内的药代动力学研究,结果显示溴泰君口服给药后在雌雄大鼠体内代谢存在差异,体内代谢过程均符合一室模型;3.分别进行了粉防己碱和溴泰君两种药物多剂量单次给药、单剂量多次口服给药在大鼠体内的毒代动力学研究,以及毒理学研究。单剂量毒代动力学研究结果显示粉防己碱和溴泰君在致毒剂量下,在大鼠体内的代谢动力学参数均发生变化;多剂量毒代动力学研究记录了两种药物在体内产生毒性的血药浓度经时变化规律,结果显示,高剂量连续给药后,由于毒性作用,粉防己碱和溴泰君在大鼠体内的代谢动力学行为均发生改变。毒理学研究通过血液生化指标的测定和组织病理切片的观察表明,粉防己碱在毒性剂量下,主要表现为肝脏、肺和脾的损伤,停药6天后,病变并未减轻;溴泰君在毒性剂量下,同样主要表现为肝脏、肺和脾的损伤,其中肝脏毒性作用程度轻于粉防己碱,停药后,病变有所减轻但无统计学意义;4.分别进行粉防己碱和溴泰君两种药物的初步探索性代谢组学研究,利用液相色谱/质谱联用法的测定方法,使用XCMS统计软件进行数据的处理分析,考察机体分别对粉防己碱和溴泰君的毒性作用产生应激反应所造成的血浆、尿液中内源性代谢产物的经时变化规律;寻找两种药物毒性作用的可能的生物标志物离子,分别在血浆、尿液中找到粉防己碱毒性的生物标志物离子10和18个,溴泰君的生物标志物离子16和17个。结合毒代动力学与毒理学研究结果,验证两种药物的毒性靶器官为肝脏,并为今后进一步毒性机制研究提供信息。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 前言
• 第一章 生物样品中粉防己碱LC/ESI/MS 测定方法的建立与验证
• 1.1 前言
• 1.2 仪器与材料
• 1.2.1 实验仪器
• 1.2.2 药品与试剂
• 1.2.3 实验动物
• 1.3 实验方法与内容
• 1.3.1 色谱条件
• 1.3.2 质谱条件
• 1.3.3 标准储备液、标准曲线样品及质控样品的配制
• 1.3.4 提取溶剂及供试药液的配制
• 1.3.5 样品处理
• 1.3.6 方法学确证
• 1.3.7 药代动力学实验
• 1.3.8 数据统计分析
• 1.4 结果
• 1.4.1 方法学确证
• 1.4.2 粉防己碱在大鼠体内单次口服给药的药代动力学研究
• 1.5 讨论
• 1.5.1 LC/ESI/MS 方法
• 1.5.2 药代动力学研究
• 第二章 生物样品中溴泰君LC/ESI/MS 测定方法的建立与验证
• 2.1 前言
• 2.2 仪器与材料
• 2.2.1 实验仪器
• 2.2.2 药品与试剂
• 2.2.3 实验动物
• 2.3 实验内容与方法
• 2.3.1 色谱条件
• 2.3.2 质谱条件
• 2.3.3 标准储备液、标准曲线样品及质控样品的配制
• 2.3.4 提取溶剂及供试药液的配制
• 2.3.5 样品处理
• 2.3.6 方法学确证
• 2.3.7 药代动力学实验
• 2.3.8 数据统计分析
• 2.4 结果
• 2.4.1 方法学确证
• 2.4.2 溴泰君在大鼠体内单次口服给药的药代动力学研究
• 2.5 讨论
• 2.5.1 LC/ESI/MS 方法
• 2.5.2 药代动力学研究
• 第三章 粉防己碱在大鼠体内的毒代动力学研究
• 3.1 前言
• 3.2 仪器与材料
• 3.2.1 实验仪器
• 3.2.2 药品与试剂
• 3.2.3 实验动物
• 3.3 实验内容与方法
• 3.3.1 实验剂量的设置与实验分组
• 3.3.2 供试药液的配制及给药方案
• 3.3.3 粉防己碱在大鼠体内单剂量与多剂量给药的毒代动力学研究
• 3.3.4 数据统计分析
• 3.4 结果
• 3.4.1 粉防己碱单剂量灌胃给药在大鼠体内的毒代动力学研究
• 3.4.2 粉防己碱多剂量灌胃给药在大鼠体内的毒代动力学研究
• 3.4.3 一般临床观察
• 3.4.4 血液生化研究
• 3.4.5 组织病理学研究
• 3.5 讨论
• 3.5.1 单剂量与多剂量毒代动力学研究
• 3.5.2 血液生化指标与组织病理切片
• 3.6 结论
• 第四章 溴泰君在大鼠体内的毒代动力学研究
• 4.1 前言
• 4.2 仪器与材料
• 4.2.1 实验仪器
• 4.2.2 药品与试剂
• 4.2.3 实验动物
• 4.3 实验内容与方法
• 4.3.1 实验剂量的设置与实验分组
• 4.3.2 供试药液的配制及给药方案
• 4.3.3 溴泰君在大鼠体内单剂量与多剂量给药的毒代动力学研究
• 4.3.4 数据统计分析
• 4.4 结果
• 4.4.1 溴泰君单剂量灌胃给药在大鼠体内的毒代动力学研究
• 4.4.2 溴泰君多剂量灌胃给药在大鼠体内的毒代动力学研究
• 4.4.3 一般临床观察
• 4.4.4 血液生化研究
• 4.4.5 组织病理学研究
• 4.5 讨论
• 4.5.1 单剂量与多剂量毒代动力学研究
• 4.5.2 血液生化指标与组织病理切片
• 4.6 结论
• 第五章 基于代谢组学的粉防己碱在大鼠体内的毒性标示物研究
• 5.1 前言
• 5.2 仪器与材料
• 5.2.1 实验仪器
• 5.2.2 药品与试剂
• 5.2.3 实验动物
• 5.3 实验内容与方法
• 5.3.1 实验方案与动物分组
• 5.3.2 尿液的收集与样品的处理
• 5.3.3 血液的采集与样品的处理
• 5.3.4 色谱条件
• 5.3.5 质谱条件
• 5.3.6 数据分析处理
• 5.4 结果
• 5.4.1 尿液样品的测定及数据分析结果
• 5.4.2 血浆样品的测定及数据分析结果
• 5.5 讨论
• 5.5.1 分析方法的选择
• 5.5.2 数据处理方法的选择
• 5.5.3 代谢组学实验设计
• 5.5.4 代谢组学研究结果
• 5.6 结论
• 第六章 基于代谢组学的溴泰君在大鼠体内的毒性标示物研究
• 6.1 前言
• 6.2 仪器与材料
• 6.2.1 实验仪器
• 6.2.2 药品与试剂
• 6.2.3 实验动物
• 6.3 实验内容与方法
• 6.3.1 实验方案与动物分组
• 6.3.2 尿液的收集与样品的处理
• 6.3.3 血液的采集与样品的处理
• 6.3.4 色谱条件
• 6.3.5 质谱条件
• 6.3.6 数据分析处理
• 6.4 结果
• 6.4.1 尿液样品的测定及数据分析结果
• 6.4.2 血液样品的测定及数据分析结果
• 6.5 讨论
• 6.5.1 实验方法的选择
• 6.5.2 代谢组学研究结果
• 6.6 结论
• 第七章 总结
• 7.1 药代动力学研究
• 7.2 毒代动力学研究
• 7.3 代谢组学研究
• 参考文献
• 发表论文
• 致谢