p-CREB在抑郁症发病中的作用及丙戊酸钠的抗抑郁机制

论文摘要

目的:抑郁症（depression）是一种严重的情感障碍性精神病,最新调查结果显示,抑郁症的终身患病率已上升到3%-7%。抑郁症已成为一种严重影响人类健康的疾病。在抑郁症的众多病因中,应激因素现已倍受重视。海马是应激激素作用的主要靶区,也是介导应激反应的主要中枢。临床研究发现重度抑郁症患者的海马体积较正常人显著缩小,并伴有海马神经元的萎缩及突触数目的减少。动物实验也同样证实,长期的应激可以导致海马神经元的萎缩、变性、甚至凋亡,但在经过长期抗抑郁剂治疗之后受损的海马神经元又可以得到修复,神经元突触可塑性能够得到提高。在抑郁症导致海马神经元萎缩的机制的研究中,环磷酸腺苷反应原件结合蛋白（CREB）的作用现已受到广泛关注。环磷酸腺苷反应原件结合蛋白（CREB）是一种转录因子,在被激酶磷酸化后成为有活性的转录因子（p-CREB）,p-CREB可调节多种细胞因子的转录水平,其中包括在神经元突触的可塑性调解中发挥着重要作用的脑源性神经营养因子（brain derived neurotrophic factor,BDNF）。由于p-CREB水平的变化可直接影响BDNF的水平,因此p-CREB亦可以起到突触可塑性的调节作用。现已发现慢性应激可以导致抑郁模型大鼠的海马内的CREB活性降低,经过抗抑郁剂治疗后的抑郁症大鼠海马内的CREB的活性增加。文拉法辛是一种常用的抗抑郁剂,其疗效已得到了临床上的广泛的认可。动物实验证实:文拉法辛能够明显改善抑郁症模型大鼠的行为学改变并提高海马中的BDNF水平。丙戊酸钠作为一种经典的抗癫痫药物,它在控制躁狂发作方面也有较好的疗效。最近的研究发现:丙戊酸钠还具有神经保护作用及营养神经的疗效。经动物实验证实,长期应用丙戊酸钠可以提高大鼠海马内的CREB活性水平。那么丙戊酸钠是否能够改善抑郁症状,如果可以,其抗抑郁的作用机制是否与改变CREB活性水平有关,目前此方面的研究较少。本研究旨在观察大鼠海马内p-CREB水平的改变在应激所致抑郁症的发病过程中的作用,并探讨丙戊酸钠抗抑郁的作用机制。方法:实验一:通过旷场试验及Morris Water Maze（MWM）水迷宫实验筛选出在两实验中成绩相近的雄性SD大鼠（体重200 g±20 g）28只,随机将其分成应激组和对照组,每组14只大鼠。应激组每天上午9:00接受包括:冷水游泳（10°C,6 min）、禁水（24 h）、夹尾（1 min）、电击足底（35 V,每隔55 s刺激1次,每次持续5 s,共30 min）、禁食（24 h）、水平摇晃（1次/s,45 min）、束缚（2 h）共7种不同的应激处理,每天选用一种刺激,共持续21 d。对照组不做处理。在21 d应激结束后,每组挑选出8只大鼠进行体重测量及行为学测试（包括旷场试验及水迷宫测试）,每组中剩余的6只大鼠用多聚甲醛灌注取脑,做免疫组化染色,检测两组大鼠海马内p-CREB水平。实验二:同样的方法挑选雄性SD大鼠70只,将其随机分成五组,分别为①生理盐水组②20 mg/kg文拉法辛组③50 mg/kg丙戊酸钠组④100 mg/kg丙戊酸钠组⑤200 mg/kg丙戊酸钠组,每组14只大鼠。各组大鼠每天上午8:30腹腔内注射相应的药物或生理盐水（剂量1ml/kg）,在注药30 min后接受与实验一相同的应激处理。在应激21 d后,每组中随机挑选8只大鼠测量体重并做行为学测试,其余6只大鼠进行免疫组化染色。结果:与对照组相比,应激组大鼠体重明显降低（p<0.01）;行为学实验表明应激组大鼠的水平运动及垂直运动较对照组明显减少（p<0.05）。应激组大鼠的平台潜伏期延长（p<0.01）,原平台所在象限内的空间探索空间时间显著缩短（p<0.05）,大鼠的空间记忆明显受损。免疫组化检测结果提示,应激组大鼠的海马DG区p-CREB水平显著下降（p<0.01）。在药物试验中:同时应用文拉法辛的应激组大鼠,其体重、自主运动及空间记忆较生理盐水组都有明显改善;同时大鼠海马内DG区的p-CREB水平得到了显著提高（p<0.01）。应用丙戊酸钠的应激组中,注射200 mg/kg丙戊酸钠的大鼠,其体重及行为学结果较生理盐水组大鼠均有明显的改善,海马DG区的p-CREB水平亦显著提高。200 mg/kg丙戊酸钠组与20 mg/kg文拉法辛组的各检测指标相比均无显著性差异。100 mg/kg丙戊酸钠对抑郁症大鼠的行为学有部分改善作用,对大鼠海马DG区p-CREB水平有所提高,但低于文拉法辛的作用。50 mg/kg丙戊酸钠组的各检测结果与生理盐水组相比均无差异性。结论:1.慢性不可预见性应激可以引发抑郁症,海马DG区的p-CREB水平降低是抑郁症发病机制之一。2.抗抑郁剂文拉法新可以通过提高海马DG区内p-CREB的水平发挥抗抑郁效果。3.丙戊酸钠的抗抑郁效果有剂量依赖性,200 mg/kg丙戊酸钠可以预防慢性应激诱发的大鼠的抑郁症,其抗抑郁的作用机制与提高海马DG区内p-CREB水平有关。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 材料和方法
• 结果
• 附图
• 附表
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述 应激影响记忆的神经递质制
• 致谢
• 个人简历