本文主要研究内容
作者徐丽,林汉卿,温贵兰,李昌红,张升波,田浪,杨佰启,陈彦希,文明,龚新勇（2019）在《ALV-A p27基因的原核表达及其鼠源多克隆抗体的制备》一文中研究指出：试验拟通过构建A亚群禽白血病病毒(ALV-A) p27基因原核表达载体,从而制备抗p27蛋白鼠源多克隆抗体。将感染ALV-A毒株的DF-1细胞反复冻融后提取RNA并反转录为cDNA,利用PCR扩增获得ALV-A p27基因,将目的基因克隆至pColdⅠ载体,并转化入大肠杆菌BL21(DE3)菌中进行诱导表达,经镍柱纯化后免疫28～32日龄的雌性小鼠,采用间接ELISA法测定抗体效价,Western blot检测抗体特异性。试验经PCR扩增出750 bp左右的特异性条带,并成功构建pColdⅠ-ALV-A-p27原核表达载体,加入终浓度为1 mmol/L的IPTG于18℃诱导表达18～24 h成功得到重组蛋白,该蛋白主要以包涵体形式存在。间接ELISA检测显示,制备的鼠源多克隆抗体血清抗体效价为1∶3 200;Western blot检测结果表明,制备的多克隆抗体能特异性识别原核表达的p27蛋白。试验结果在ALV的抗原分析、血清学诊断等方面有着重要的应用价值。
Abstract
shi yan ni tong guo gou jian Aya qun qin bai xie bing bing du (ALV-A) p27ji yin yuan he biao da zai ti ,cong er zhi bei kang p27dan bai shu yuan duo ke long kang ti 。jiang gan ran ALV-Adu zhu de DF-1xi bao fan fu dong rong hou di qu RNAbing fan zhuai lu wei cDNA,li yong PCRkuo zeng huo de ALV-A p27ji yin ,jiang mu de ji yin ke long zhi pColdⅠzai ti ,bing zhuai hua ru da chang gan jun BL21(DE3)jun zhong jin hang you dao biao da ,jing nie zhu chun hua hou mian yi 28～32ri ling de ci xing xiao shu ,cai yong jian jie ELISAfa ce ding kang ti xiao jia ,Western blotjian ce kang ti te yi xing 。shi yan jing PCRkuo zeng chu 750 bpzuo you de te yi xing tiao dai ,bing cheng gong gou jian pColdⅠ-ALV-A-p27yuan he biao da zai ti ,jia ru zhong nong du wei 1 mmol/Lde IPTGyu 18℃you dao biao da 18～24 hcheng gong de dao chong zu dan bai ,gai dan bai zhu yao yi bao han ti xing shi cun zai 。jian jie ELISAjian ce xian shi ,zhi bei de shu yuan duo ke long kang ti xie qing kang ti xiao jia wei 1∶3 200;Western blotjian ce jie guo biao ming ,zhi bei de duo ke long kang ti neng te yi xing shi bie yuan he biao da de p27dan bai 。shi yan jie guo zai ALVde kang yuan fen xi 、xie qing xue zhen duan deng fang mian you zhao chong yao de ying yong jia zhi 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自中国家禽的徐丽,林汉卿,温贵兰,李昌红,张升波,田浪,杨佰启,陈彦希,文明,龚新勇，发表于刊物中国家禽2019年02期论文，是一篇关于原核表达论文,鼠源多克隆抗体论文,中国家禽2019年02期论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自中国家禽2019年02期论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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