论文摘要
在利用异源(尖鳍鲤)精子刺激彭泽鲫雌核发育的育种实践中，我们发现其子代具有表型分化现象，一些个体整体形态类似母本，但同时具有部分父本特征，其吻长、体侧鳞片和背部隆起与父本尖鳍鲤相似而与彭泽鲫不同，生长速度也明显快于正常的异育彭泽鲫。我们将这些具有父本性状的个体称为复合鲫(multiple pengze crucian carp)。利用流式细胞仪对复合鲫DNA含量的检测结果表明在复合鲫中存在两种类型：一种的DNA含量符合四倍体的标准，属于典型的复合四倍体彭泽鲫；另一种的DNA含量与四倍体的标准相差较远，界于三倍体与四倍体之间，属于非整倍体。为了将复合四倍体彭泽鲫快速有效的鉴别出来，以满足生产中培育良种的需求，本文根据DNA含量分析的结果，分别选取复合四倍体和非整倍体的个体各5条，对其进行随机扩增多态性DNA(Random Amplified Polymorphic DNA，简称RAPD)扩增。经过对RAPD反应体系及反应条件的优化，在56条随机引物中筛选出8条引物在四倍体中同时出现相同的特异扩增条带而在非整倍体中却未出现相应的特异扩增条带。但因RAPD本身的可重复性差的局限性，使得所得到的RAPD随机引物标记不利于实际应用。为了寻求一种方便、快速、高效、稳定的可以将复合四倍体彭泽鲫鉴别出来的分子标记，我们对上述所得特异性RAPD产物进行回收、克隆和测序，根据测序结果分别在两端设计一对24个碱基的引物，对复合四倍体中具有的特异性DNA序列进行特异扩增，即将RAPD标记转化为稳定的可重复性强的SCAR(Sequenced Characterized Amplified Regions)标记。本文通过实验，成功建立4个可以将非整倍体复合鲫与整倍体复合鲫区分开来的SCAR标记。对不同外源精子刺激复合鲫卵子所得子代与用尖鳍鲤精子刺激彭泽鲫卵子所得子代的生长作跟踪测量，通过比较不同时期的体重平均值以及特定生长率，证实了复合鲫比异育彭泽鲫更具有生长优势。通过设计不同的“杂交”组合发现用尖鳍鲤的精子作为外源精子刺激复合鲫产生的后代具有更高的生长优势，而且复合鲫优良的生长特性可以稳定遗传下去。