自贡市农业农村局四川自贡643000
摘要：在蔬菜水果农药残留检测方面，采用常规气相色谱法和固相萃取法进行残留物提取和分析，检测精度有限。基于这种认识，本文采用超声提取法对农药残留检测前处理方法进行了优化，并对气相色谱柱条件进行了优化调整，从而提高农药残留检测精度和效率。从方法优化结果来看，农药添加回收率在70.95%～127.9%范围内，检出限和农药检测相对偏差均能满足农药残留检测要求。
关键词：蔬菜水果；农药残留；检测优化
引言：残留在蔬菜水果中的农药将造成食物被污染，进入人体后会得到长时间累积，给人的肝脏、肾、神经系统等器官带来伤害。所以在蔬菜水果检测方面，需要加强农药残留检测，保证食品安全。为提高蔬菜水果检测力度，需要对检测方法进行优化，从而使农药残留检测准确度得到提升。
1蔬菜水果农药残留检测问题
在蔬菜水果农药残留检测方面，目前主要采用气相色谱法。应用该方法，可以将气体当成是流动相实现色层分离分析，检测试样可以被流动相带入色谱柱中，在柱中固定相和试样不同分子作用力的影响下得到组分分离。对流出的不同组分进行记录分析，根据组分浓度和流出时间完成各组分色谱图的制作，能够实现组分有效鉴别。具体来讲，就是根据组分出峰时间和顺序实现化合物定性分析，并根据综合峰高度和面积完成定量分析。采用气相色谱法进行蔬菜水果农药残留检测，能够实现残留农药的高灵敏性检测，所以得到了广泛应用。而在实践工作中，应用该方法需要完成样品前处理，从而实现试样的提取和净化，使得该方法用时过长，成本稍高。为缩短方法用时，现阶段主要采用固相萃取技术进行农药残留检测前处理，但气相色谱法使用依然存在一定局限性，因此需要采取有效手段实现方法优化，从而对蔬菜水果农药残留进行高效、低成本和高精度的检测[1]。
2蔬菜水果农药残留检测方法的优化分析
2.1试验材料
试验采用从农贸市场购买的白菜、苹果、西红柿等蔬菜水果，洗干净后对可食用部分进行提取，经过组织粉碎处理后制备成待测样品，向其中添加甲胺磷、氧化乐果、对硫磷、甲氰菊酯、氯氰菊酯、联苯菊酯等常用农药标准溶液用于试验。试验采用的试剂包含丙酮、冰乙酸、氯化钠、无水硫酸镁、正己烷和乙腈，除乙腈是色谱纯以外，其它均为分析纯。采用的农药标准品来自于农业部环境保护科研监测所，共7种有机磷类农药和9种有机氯类农药。
2.2试验方法
在试验过程中，需要采用美国进口Agilent6890气相色谱仪，配有ECD检测器和FPD检测器，采用的固相萃取柱同样为Agilent公司生产，规格为200mg，3mL。此外，需要配备旋涡混合器、超声波清洗器、离心机、旋蒸机和氮吹仪等设备。在试验过程中，首先按照常规方法进行农药残留检测，使用50mL乙腈、10ml洗液和5mL丙酮进行单个样品处理，采用的固相萃取柱为6mL，1000mg，经过提取、净化后实现样品前处理，然后在约220~240℃条件下进行试样检测。在此基础上，可以采用优化方法进行试验，然后将优化前后试验结果进行比对。针对优化得到的方法，需要进行准确度和平行性检测，确定方法的准确度和可重复性。开展准确度检测，可以采用白菜、西红柿、苹果等不同蔬菜水果添加种类相同农药，添加量为0.1mg/kg，然后对每个样品进行5次平行添加回收，确定方法在不同类蔬菜水沟检测中的准确度。开展平行性检测，主要是考虑添加回收检出农药残留与样品本身检出结果之间存在差异，因为添加回收的农药主要在样品表面吸附，而样品自身包含的农药部分在蔬菜水果的细胞壁中残留。因此需要开展重复性试验，对多个样品进行3次平行试验，确定方法的适用性[2]。
2.3优化步骤
在对蔬菜水果农药残留方法进行检测优化时，需要分别进行样品前处理优化和样品检测优化。在前处理优化阶段，需要对10g样品和3g氯化钠进行称取，然后添加至50mL离心管中。采用20mL乙腈和冰乙酸混合提取液（乙腈：冰乙酸=100：1），可以对试样进行提取，添加至离心管后需要摇匀，然后采用超声波进行处理，30min后进行离心，以3000r/min转速离心5min后可以添加2g无水硫酸镁，注意需要从上向下分散添加。对2mL上清液进行吸取后，可以装入5mL比色管中，利用氮吹仪吹干，烘干温度控制为80℃，共提取2份上清液。在净化阶段，一份需要采用2mL丙酮定容至1mL，经过0.22μm滤膜过滤处理后，可以利用FDP检测器进行有机磷类农药检测。另一份添加1mL正己烷，摇匀后利用3mL洗液（正己烷：丙酮=9：1）进行净化。采用正己烷，能够使固相萃取柱得到火花处理，在液面达到填料顶部后才可以进行净化样品添加。每次洗液，都需要等待液面达到顶部，然后利用2mL洗液对比色管内壁进行清洗，使试样随之进入萃取柱。反复林洗后，可以利用5mL比色管进行液体收集，利用氮吹仪吹干，水浴温度控制为50℃。采用正己烷定容至1mL后，可以采用ECDE检测器对有机氯类农药进行检测。
实际进行气相色谱分析，需要对色谱条件进行优化，以便实现农药残留的高精度检测。针对色谱进样口，需要将温度调整为225℃、230℃、235℃和240℃，然后分别开展试验。针对色谱柱温箱条件，还要分别针对有机磷类农药检测和有机氯类农药检测进行优化。在有机磷类农药检测上，考虑到容易出现拖尾峰，需要对柱温箱初始温度进行降低，使农药先吸附在色谱柱上，直至待测物进入后进行程序升温。在试验过程中，需要将原本150℃的起始温度分别调整为140℃、130℃、120℃和110℃。在实际操作中，分流流量起初为60mL/min，2min后变为20mL/min，检测器温度为320℃，A柱载气为1.0mL/min氮气，B柱载气为1.7mL/min氮气。在有机氯类农药检测上，可以对升温速率进行调整，将原本的6℃/min分别调整为7℃/min、8℃/min、9℃/min、10℃/min。检测过程中，色谱柱进样口不分流，A柱载气和B柱载气均为10mL/min氮气，另外需要输入75mL/min氢气和100mL/min空气。
2.4优化效果
从试验结果来看，针对不同农药种类，采用不同气相色谱柱进样口温度可以获得不同的加标回收率。针对三唑磷、氰戊菊酯等农药，在220℃和225℃条件下会出现气化不充分问题，导致出峰较晚，造成加标回收率较低。针对甲胺磷等农药，在235℃以上会因受热分解，导致农药加标回收率降低。从总体来看，在230℃条件下可以获得较好的气化效果，并且使农药残留物保持稳定，从而获得高农药回收率。从色谱柱温相条件上来看，针对甲胺磷等农药，由于先出峰，在130℃条件下可以获得较好峰型，对硫磷色等药物色谱图可以实现完全分离。在升温速率方面，尽管农药可以在9℃/min和10℃/min速率条件下实现分离，但是由于出峰集中容易导致检测人员容易出现误判问题。因此最佳升温速率应为8℃/min，既可以获得较好的分离度，同时又能实现快速检测。从优化方法的检验情况来看，在添加回收检验中农药残留添加回收率在70.95%～127.9%范围内，检出限在9.68×e-5到0.027mg/kg范围内，能够适用于农药残留分析。从平行性检测结果来看，农药检测相对偏差在1.64%到9.26%范围内。由此可见，采用优化后的方法可以实现农药残留高效、准确检测[3]。
结论：通过研究蔬菜水果农药残留检测问题可以发现，采用原本固相萃取柱和气相色谱法进行农药残留检测，容易出现农药峰拖尾和农药分离度低等问题，导致检测效率和精度受到影响。对方法运用过程中的前处理环节和色谱柱条件进行适当优化，能够使农药得到较好的分离，并且解决峰拖尾问题，从而实现准确、高效检测，因此能够使蔬菜水果农药残留检测技术水平得到提升。
参考文献：
[1]周琼.蔬菜水果中多种类农药残留的气质联用同时检测方法应用[J].农业与技术，2018，38（23）：36-37.
[2]张秀花.蔬菜水果中农药残留检测方法的改善研究[J].现代食品，2018（13）：106-108+112.
[3]孙红艳，贾琦，孟庆庆，等.蔬菜水果中7种农药残留检测前处理方法优化[J].安徽农业科学，2015，43（21）：119-120+124.