siRNA沉默PAR1基因表达对大肠癌细胞侵袭力的影响

论文摘要

目的:研究RNA干扰活性蛋白酶受体PAR1表达以及对人类大肠癌细胞侵袭力的影响。方法:体外化学合成PAR1基因序列特异性双链RNA（dsRNA）,在脂质体（Lipid）的介导下转染入人大肠癌Lovo细胞株,荧光倒置显微镜下观察转染效率,应用RT-PCR和Western-blot检测PAR1mRNA和蛋白表达,体外实验测定肿瘤细胞穿透matrigel的能力。结果:干扰片段转染组的转染Pgenesil-1-PAR1-siRNA后大肠癌Lovo细胞株的PAR1基因和蛋白的表达被PAR1-siRNA有效沉默,与阴性对照组、空白质粒转染组相比PAR1mRNA和蛋白表达水平明显降低（P<0.05）。转染48h后测定大肠癌Lovo细胞的侵袭力明显降低（P<0.01）。结论: PAR1-siRNA能有效抑制人大肠癌细胞株PAR1基因和蛋白的表达,降低人大肠癌细胞的侵袭力。

论文目录

• 英汉缩略语名词对照
• 摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 第一章 PAR1 特异性siRNA 载体的构建及鉴定
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 实验方法和步骤
• 2 结果
• 3 讨论
• 第二章 RT-PCR 和Western-blot 法检测PAR1 基因的表达
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 实验方法和步骤
• 2 结果
• 3 讨论
• 第三章 Tanswell 小室法检测大肠癌细胞Lovo 细胞株侵袭性的改变
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 实验方法和步骤
• 2 结果
• 3 讨论
• 全文总结
• 附图
• 参考文献
• 文献综述
• 参考文献
• 致谢
• 攻读硕士期间发表论文