论文摘要
目的:比较联合激动Toll样受体（Toll-like receptor,TLR）的树突细胞（dendritic cell.DC）和常规培养的树突细胞在功能上的区别,并通过体外试验比较两者作为肿瘤疫苗对表达CEA肠癌的治疗作用。材料与方法:本课题使用人CEA转基因小鼠和转染人CEA的MC38小鼠肠癌细胞株MC38-CEA作为动物模型。将体外培养的DC分为联合激动TLR组和常规组,通过检测DC表面重要标志物、DC分泌IL-12量及DC对淋巴细胞的促增殖作用,比较两者在激活细胞免疫方面功能的区别。另外,在DC上荷载小鼠MHCⅠ类分子限制性表位CEA526-533,制备CEA特异性DC肿瘤疫苗,在体外进行细胞毒试验,初步研究其对MC38-CEA的治疗作用。结果:1联合TLR组DC重要表面标志物的表达普遍高于常规组DC。2联合TLR组DC的IL-12分泌量显著高于常规组DC。（P＜0.001）3联合TLR组DC对淋巴细胞的促增值作用显著强于常规组DC（P＜0.05）。4联合TLR组DC作为DC疫苗免疫小鼠后获得的效应细胞对MC38-CEA肠癌细胞在较高效应细胞:靶细胞（E:T）比值时具有一定的杀伤作用并显著优于常规组（P＜0.05）。对荷载CEA526-533的MC38-CEA肠癌细胞,联合TLR组和常规组都具有高效的特异性杀伤作用,其中在较低E:T值时联合TLR组的杀伤作用显著高于常规组（P＜0.05）。结论:1联合TLR组DC与常规组DC相比,具有更理想的成熟度,并能更有效激活细胞免疫反应,提示联合激动TLR可能增强DC肿瘤疫苗的抗肿瘤效应。2使用联合激动TLR的DC制备CEA特异性DC肿瘤疫苗,在体外试验中对MC38-CEA小鼠肠癌细胞株具有一定杀伤作用且是CEA特异性的,而常规DC疫苗无明显杀伤作用,但还须进行体内试验进一步验证治疗效果。
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