论文摘要
【目的】通过检测SLE患者外周血中HSP90蛋白、HSP90 mRNA、抗HSP90抗体以及IL-6、IL-10的表达水平,旨在探讨HSP90在SLE发病中的作用以及SLE患者中Th2型细胞因子IL-6、IL-10与HSP90基因、HSP90蛋白、抗HSP90抗体间相互作用的相关性。【方法】分别使用双抗夹心ELISA法、免疫组化法、原位杂交法、Western-blot免疫印迹法检测45例SLE患者和15例健康对照者外周血中IL-6、IL-10、HSP90蛋白、HSP90 mRNA及抗HSP90抗体的表达情况,并应用计算机图像分析系统作半定量分析,同时对相关因子表达间的相关性进行直线相关性分析。【结果】⑴. SLE患者血清IL-6阳性表达31例(68.89%),SLE活动组、非活动组及正常对照组血清IL-6水平分别为16.82±1.79pg/ml,12.58±1.12pg/ml,10.13±2.95pg/ml;IL-10阳性表达29例(64.44%),SLE活动组、非活动组及正常对照组血清IL-10水平分别为47.31±16.20pg/ml,42.78±11.21pg/ml,22.05±8.82pg/ml。SLE活动组血清IL-6、IL-10水平均显著高于正常对照组和SLE非活动组(均P<0.01);SLE非活动组血清IL-6、IL-10水平亦显著高于正常对照组(P<0.05)。⑵. 45例SLE患者PBMC中HSP90蛋白阳性表达17例(37.78%),15例正常对照组中未见明显阳性细胞的表达。半定量分析:SLE活动组PBMC中HSP90蛋白表达的平均光度值为(0.412±0.230),显著高于正常对照组(0.117±0.033)和SLE非活动组(0.187±0.019)(P<0.01);SLE非活动组HSP90蛋白表达亦显著高于正常对照组(P<0.05)。45例SLE患者中HSP90 mRNA阳性表达20例(44.44%),15例正常对照组中未见阳性细胞的表达。半定量分析:SLE活动组PBMC中HSP90 mRNA表达的平均光度值为(0.350±0.225),高于正常对照组(0.114±0.009)(P<0.01)和SLE非活动组(0.221±0.040)(P<0.05);SLE非活动组HSP90 mRNA表达亦高于正常对照组(P<0.05)。抗心磷脂抗体阳性患者HSP90水平明显高于阴性患者。⑶. IL-6、IL-10的表达与HSP90 mRNA的含量之间均呈显著的直线正相关关系(n=45,r=0.413,t=2.971,P<0.01)/(n=45,r=0.334,t=2.319,P<0.05)。IL-6的表达与HSP90蛋白的含量之间呈显著的直线正相关关系(n=45,r=0.63,t=5.339,P<0.001);IL-10的表达与HSP90蛋白的含量之间无相关关系。⑷. 45例SLE患者血浆中HSP90 IgG抗体阳性表达23例(51.11%),HSP90 IgM抗体阳性表达12例(26.67%)。15例正常对照组中未见HSP90 IgG/IgM抗体阳性表达。⑸. SLE患者中HSP90蛋白水平与HSP90 IgG抗体的表达间呈显著的相关关系(X2=4.15,P<0.05);与HSP90 IgM抗体的表达间无相关关系。【结论】SLE患者体内存在过度表达的IL-6,其可导致HSP90 mRNA表达的增多,进而HSP90生成增多,HSP90的大量聚集被抗原特异性淋巴细胞识别而产生抗HSP90自身抗体,导致SLE患者免疫功能紊乱。这可能在SLE的发病机制中起着一定的作用。
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