雄黄的微生物浸出及其浸出液的抑菌、药效作用研究

论文摘要

雄黄（Realgar）是常用的矿物药,雄黄和含雄黄中成药有多种疗效,在中药中具有举足轻重的地位。但是雄黄常以未溶解状态的粗糙矿物原粉入药,造成用量大、毒性严重超标,常有使用雄黄造成不良反应者。因而雄黄和含雄黄中成药在国际市场上受到了限制。基于上述原因,本文利用本实验室分离鉴定的一株高活性的氧化亚铁硫杆菌（Acidithiobacillus ferrooxidans,简称At.f）对矿物药雄黄进行浸出处理,比较普通氧化亚铁硫杆菌和经耐砷驯化后的氧化亚铁硫杆菌对雄黄的浸出效果。研究雄黄微生物浸出液的体外、体内抑菌作用。测定雄黄微生物浸出液的急性毒性,并初步研究了雄黄微生物浸出液的药效。通过摇瓶实验用氧化亚铁硫杆菌及经驯化后耐砷的氧化亚铁硫杆菌在OK培养基中处理干研后过200目筛的雄黄粉末,并测定摇瓶实验过程中体系内可溶性砷含量变化,得到结论:普通的氧化亚铁硫杆菌的浸出作用时间短,但对于高浓度雄黄浸出效果差;而经耐砷驯化后的氧化亚铁硫杆菌反应速度较慢,但对于高浓度雄黄的浸出效果好,浸出率高。研究雄黄微生物浸出液和经传统水飞方法炮制后雄黄的体外抑菌效果,结果表明雄黄微生物浸出液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、枯草芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌粪肠杆菌、铜绿假单胞菌、耐药表皮葡萄球菌、非耐药表皮葡萄球菌九种细菌均有明显的抑制作用;而水飞法炮制后的雄黄无论其水悬液还是助悬液均无任何抑菌作用。测定雄黄微生物浸出液的LD50,证明雄黄微生物浸出液具有一定毒性。在低于LD50值剂量一半的浸出液浓度下测定其体内抑菌作用,研究表明雄黄微生物浸出液能够有效的抑制金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌在小鼠体内的繁殖,提高小鼠的存活率。促睡眠实验证明雄黄微生物浸出液具有显著的抑制中枢神经作用,能够明显延长小鼠在戊巴比妥那作用下的睡眠时间。耐高温和扭体实验证明雄黄微生物浸出液具有一定的镇痛作用。耳肿胀实验证明雄黄微生物浸出液具有较明显的抗炎作用。

论文目录

• 缩略词表
• 中文摘要
• Abstract
• 第一部分 文献综述
• 1.雄黄的药用和毒性
• 1.1 组成及化学结构
• 1.2 药用价值
• 1.3 毒性
• 2.生物湿法冶金
• 2.1 浸矿微生物的种类
• 2.2 细菌的浸矿机理
• 3.课题的提出
• 第二部分 氧化亚铁硫杆菌浸出雄黄作用研究
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.1.1 培养基
• 1.1.2 菌种
• 1.1.3 雄黄
• 1.1.4 仪器
• 1.2 方法
• 1.2.1 细菌培养和复壮
• 1.2.2 驯化培养
• 1.2.3 摇瓶实验
• 1.2.4 ICP法检测砷浓度
• 2.实验结果和分析
• 3.讨论
• 第三部分 雄黄微生物浸出液的体外抑菌作用研究
• 1.材料与方法
• 1.1 材料
• 1.1.1 培养基
• 1.1.2 菌种
• 1.1.3 药品
• 1.2 方法
• 1.2.1 雄黄浸出液的制备
• 1.2.2 水飞雄黄的制备
• 1.2.3 阳性对照制备
• 1.2.4 细菌培养和复壮
• 1.2.5 梯度浓度的雄黄浸出液的抑菌实验
• 1.2.6 雄黄浸出液的最低抑菌浓度（MIC）测量
• 1.2.7 水飞雄黄的抑菌实验
• 2.实验结果与分析
• 2.1 梯度浓度的雄黄浸出液的抑菌效果
• 2.2 雄黄浸出液的最低抑菌浓度（MIC）测量
• 2.3 水飞雄黄的抑菌效果
• 3.讨论
• 第四部分 雄黄微生物浸出液的急性毒性研究
• 1.材料与方法
• 1.1 材料
• 1.1.1 药品
• 1.1.2 动物
• 1.2 方法
• 1.2.1 腹腔注射法急性毒性实验
• 1.2.2 灌胃法急性毒性实验
• 2.实验结果与分析
• 50测定结果'>2.1 腹腔注射法急性毒性LD₅₀测定结果
• 50测定结果'>2.2 灌胃法急性毒性LD₅₀测定结果
• 3.讨论
• 第五部分 雄黄微生物浸出液的体内抑菌作用研究
• 1.材料与方法
• 1.1 材料
• 1.1.1 药品
• 1.1.2 动物
• 1.1.3 培养基
• 1.1.4 菌种
• 1.2 方法
• 1.2.1 最低致死细菌浓度的测定
• 1.2.2 雄黄浸出液的体内抑菌实验
• 2.实验结果与分析
• 2.1 最低致死细菌浓度的测定结果
• 2.2 体内抑菌实验的死亡率测定结果
• 3.讨论
• 第六部分 雄黄微生物浸出液的初步药效实验
• 1.材料与方法
• 1.1 材料
• 1.1.1 药品
• 1.1.2 动物
• 1.2 方法
• 1.2.1 雄黄浸出液的镇痛作用实验
• 1.2.1.1 醋酸扭体法
• 1.2.1.2 热板法
• 1.2.2 雄黄浸出液的抗炎作用实验
• 1.2.3 雄黄浸出液的中枢抑制作用实验
• 2.实验结果与分析
• 2.1 醋酸扭体法中雄黄浸出液的镇痛作用
• 2.2 热板法中雄黄浸出液的镇痛作用
• 2.3 雄黄浸出液的抗炎作用
• 2.4 雄黄浸出液的的中枢抑制作用
• 3.讨论
• 第七部分 结论
• 附录 微生物平板抑制实验
• 参考文献
• 致谢