抗金黄色葡萄球菌工程多肽论文-高浩嵩,朱要宏,诸葛增玉,马金磊,李秀娟

抗金黄色葡萄球菌工程多肽论文-高浩嵩,朱要宏,诸葛增玉,马金磊,李秀娟

导读:本文包含了抗金黄色葡萄球菌工程多肽论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:奶山羊,乳房炎,金黄色葡萄球菌,抗耐药金黄色葡萄球菌工程多肽

抗金黄色葡萄球菌工程多肽论文文献综述

高浩嵩,朱要宏,诸葛增玉,马金磊,李秀娟[1](2010)在《抗耐药金黄色葡萄球菌工程多肽对金黄色葡萄球菌人工感染奶山羊所致乳房炎的影响研究》一文中研究指出本实验用1mL浓度为106 CFU/mL的金黄色葡萄球菌(CVCC 545)菌液注入泌乳期奶山羊一侧乳房内引发急性乳房炎后,随机分为2组.Ph-SA治疗组(5只)经乳头管注入3mL浓度为1.4mg/mL的Ph-SA,无治疗组(5只)无治疗措施,以考察Ph-SA对人工感染金黄色葡萄球菌性乳房炎的影响.本实验检测和记录了接种前和接种后一段连续时间内奶山羊体温变化,乳汁中细菌计数的情况,乳汁的眼观变化和乳汁中体细胞数的变化以及血清中几种主要细胞因子、急性期蛋白的浓度变化等.通过该研究,我们看到接种后4 h两组奶山羊体温均显着升高(P<0.05),在12 h达到峰值,两组体温差异极显着(P<0.01).无治疗组2只奶山羊死亡.接种后12 h开始采集乳样,两组奶山羊右侧接种乳区产奶量均下降,乳汁中体细胞数到实验结束时仍居高不下.对接种乳区乳汁金黄色葡萄球菌进行培养、计数,可见其均在12h达到峰值,治疗组乳中金葡菌数于12 h后回落,至72 h后奶样中几乎无金葡菌.治疗组TNF-α浓度于8h显着低于NT组(P<0.05),并在各时间点与同组0 h未见显着差异.两组IL-6浓度均在2 h升高,治疗组血清IL一6浓度在各时间点与同组0 h未见显着差异,无治疗组在48 h显着升高(P<0.05).治疗组与无治疗组IL-1β浓度均值在2 h大幅升高,于6-8 h降低,48 h降至正常水平,又分别在72 h,96 h达到峰值,两组间未见显着差异.无治疗组SAA浓度在6 h显着升高(P<0.05),在12 h达到峰值(P<0.05),48 h降至正常水平,而治疗组血清SAA浓度变化不显着,在8 h,12 h,治疗组与无治疗组差异显着(P<0.05).治疗组Hp浓度在2h降低,48h后回升.无治疗组血清Hp浓度在2 h升高,随后降低,于72 h降至最低值,与治疗组差异显着(P<0.05).结论 :乳房内注射1mL浓度为106 CFU/mL金黄色葡萄球菌菌液能引起奶山羊急性乳房炎;Ph-SA对金黄色葡萄球菌人工感染奶山羊急性乳房炎在72 h即可达到良好的抑菌效果,6天治疗期内乳汁颜色和奶中凝块得到明显改善,但乳中体细胞数量并未下降,奶产量未恢复;发生急性金黄色葡萄球菌性乳房炎时,血清中TNF-α和急性期蛋白SAA于发病6-24 h浓度升高非常明显,具有一定临床诊断价值.(本文来源于《中国畜牧兽医学会2010年学术年会——第二届中国兽医临床大会论文集(上册)》期刊2010-08-15)

黄艳,张杰,戴萍,丘小庆[2](2004)在《抗金黄色葡萄球菌工程多肽体内外抗菌活性研究》一文中研究指出目的 评价我室制备的抗金黄色葡萄球菌工程多肽 (Ph- SA)对耐甲氧西林 /苯唑西林金黄色葡萄球菌 (MRSA )的体内外抗菌活性。方法 采用琼脂二倍稀释法测定 Ph- SA对 6 9株临床分离病原菌的最小抑菌浓度(minim al inhibitory concentration,MIC) ;采用腹腔感染后经尾静脉注射药物方法测定 Ph- SA及对照药物对小鼠的体内保护作用。结果 体外抗菌试验结果显示 Ph- SA对金黄色葡萄球菌呈现强抗菌作用 ,对金黄色葡萄球菌的甲氧西林 /苯唑西林耐药株和敏感株的 MIC50 分别为 8mg/L 和 0 .5 mg/L,按相对分子质量差异换算 ,强于万古霉素 12倍和 4 8倍 ;体内抗菌试验结果显示 :Ph- SA对 MRSA菌株 ATCC BAA- 4 2抗菌效力极强 ,按相对分子质量差异换算 ,至少强于万古霉素 5 9倍。结论  Ph- SA对耐甲氧西林 /苯唑西林金黄色葡萄球菌体内外均呈现极强的抗菌活性 ,具有潜在的临床应用价值。(本文来源于《四川大学学报(医学版)》期刊2004年06期)

张淑华,袁靖,欧真蓉,邱晓庆,李幼平[3](2004)在《抗金黄色葡萄球菌工程多肽体内外抗菌作用研究》一文中研究指出随着抗生素的问世和不断发展 ,以及临床广泛应用 ,细菌的获得性抗药性也逐年递增。近年来 ,抗耐药金黄色葡萄球菌最有效的万古霉素也出现了耐药。  耐青霉素金黄色葡萄球菌不只是医院内感染的最大难题。正常人群中的感染发生率也一直在上升。因此寻找能对抗这些耐药菌(本文来源于《四川生理科学杂志》期刊2004年04期)

黄艳[4](2004)在《抗金黄色葡萄球菌工程多肽体内外抗菌活性研究》一文中研究指出金黄色葡萄球菌是一种重要的病原菌,能引起从轻微的皮肤感染到创口感染、脓毒血症等多种感染。随着抗生素的广泛使用,耐药菌不断出现并呈逐年上升趋势。在一些亚洲国家,90%以上的金黄色葡萄球菌为产青霉素酶菌株,70%-80%的金黄色葡萄球菌为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA),迫使万古霉素等糖肽类抗生素的使用增多,最终导致金葡菌株对糖肽类抗生素敏感性下降,甚至出现完全耐受万古霉素的菌株(VRSA)。因此,在合理使用现有抗菌药物、延缓耐药菌株产生的同时,还必须积极研制和开发新型的抗菌药物,应对已有耐药菌的治疗难题。 早在1877年,Pasteur和Joubert就系统记录了细菌间的竞争现象,他们发现不管在自然培养基或实验动物体内,大肠杆菌都能够影响与其混合培养的炭疽杆菌的生长,并预言了其潜在的医疗应用价值。接下来的叁四十年间,广泛开展了用低毒性的细菌抑制潜在病原菌生长的研究。由于这些研究多属临床应用研究,并没有对抗菌物质进行分离和纯化,因而其中可能既有细菌素的作用又有抗生素的作用。1925年,Gratia最早描述了大肠杆菌分泌的抗菌物质——大肠菌素V,在高度稀释的条件下仍能抑制大肠杆菌Φ的生长。而大肠菌素V与后来发现的大多数大肠菌素完全不同,其正确的归属应为microcin。现已发现的大肠菌素超过25种之多,它们只能识别大肠杆菌近缘菌株外膜和内膜上的受体,因而四川大学硕士学位论文只杀伤大肠杆菌近缘菌株而不能识别其它细菌。大肠菌素按其作用方式可分为叁类:形成离子通道使膜取极化(El族)、降解DNA(EZ族)或抑制蛋白质合成(E3族)。大肠菌素la属于可形成离子通道的El族大肠菌素,它的受体结合域和跨膜结构域能特异识别同种异株和近缘菌株外膜及内膜上的受体,再由通道结构域在其内膜上形成致死性离子通道,造成细菌内容物外泄而死亡。 1997年,Wiener报道了大肠菌素Ia的X光晶体结构,显示其通道形成域由10个卜螺旋构成。幻enker&Qiu等利用人工脂质膜系统,对大肠菌素Ia动态跨膜结构与功能的关系进行了研究,发现通道的形成分为两步:首先VIII一仄a-螺旋组成的疏水发夹结构循亲疏水效应插入脂质膜中;然后I和VI一切a-螺旋在跨膜电压差的驱动下插入膜内,形成电压依赖性离子通道,此时H一Va-螺旋的(约68个氨基酸残基长度)跨膜移动暴露于脂膜的tran:侧(相当于细胞内)。 最近二十年来,在基础微生物领域取得的重大进展之一是发现细菌细菌间通过分泌和感应特定的信号分子进行细胞间“通讯”,以判断环境中同类细菌数量,决定自身的生长、基因的表达以及毒力因子的产生的现象,称作“数量阂值感应(Quo~sensing)”。其信号因子(信息素)具有自主导向(autofnducing)并特异性识别同种细菌膜上受体的作用,又被称作“自主诱导因子(autoinduoer)”。Qiu等选择金黄色葡萄球菌的八肤信息素a盯Dl作为大肠菌素fa的“诱导物”,将其连接到大肠菌素Ia的梭基端上,产生融合蛋白pheromoniein一SA(Ph一SA)。该融合蛋白表现出了构成它的两个前体—金黄色葡萄球菌信息素和大肠菌素Ia各自都不具有的杀伤金黄色葡萄球菌的生物活性。前期研究己证实,Ph一SA对产青霉素霉金黄色葡萄球菌ATCC 29213及耐甲氧西林/本哇西林金黄色葡萄球菌显示出了极强的杀菌活性,本研究将在此基础上进一步定量四川大学硕士学位论文评价Ph一SA对多种细菌尤其是耐甲氧西林/本哇西林金黄色葡萄球菌 (MRSA)的体内外抗菌活性。 方法:体外部分采用琼脂二倍稀释法检测Ph一SA对多种革兰氏阳性菌和阴性菌的最小抑菌浓度(mi垃mal inhibito砂concentration,Mle);并重点比较Ph一SA与对照药物头抱哇琳、苯哇西林、万古霉素等对耐甲氧西林/苯哇西林金葡菌(MRSA)的抗菌活性大小(将试验所得MICS。按分子量差异进行校正)。体内部分选用K全江小鼠腹腔注射最小致死剂量(1 MLD)的金葡菌ATCC BAA一42(为MRSA菌株),建立全身系统感染模型,1小时后经尾静脉注射给予不同剂量的Ph一SA及对照药物,观察8天内小鼠存活情况,绘制生存曲线图,比较不同药物高低剂量处理小鼠的8天存活率,以评价Ph一SA对MRSA感染小鼠的体内保护作用。体外部分结果: (1)对所试甲氧西林/苯哇西林敏感菌(MSSA)菌株的抗菌作用 非常显着,其MICS。值为o.sm岁L,抗菌活性分别强于万古霉 素48倍,头抱哇琳巧5倍,苯哇西林200倍; (2)Ph一SA对所试耐甲氧西林/苯哇西林金葡菌(MRSA)菌株的 抗菌作用也很强,其MICSO值为sm留L,抗菌活性分别强于 万古霉素12倍,苯哇西林3200倍,头抱哇琳622倍; (3)Ph一SA对所试甲氧西林敏感表皮葡萄球菌(MSSE)菌株呈现 了较强的抗菌活性,MICS。值为lm留L,抗菌活性分别强于万 古霉素192倍,苯哇西林400倍,头抱哩琳巧5倍; (4) Ph一SA对所试耐甲氧西林/苯哩西林表皮葡萄球菌(MRSE) 菌株呈现了相对弱于对抗MSSE的抗菌活性,其MICS。值为 Zm留L,但抗菌活性仍然分别强于头抱哇琳72倍,苯哇西林 12800倍,万古霉素96倍;四川大学硕士学位论文 (5) Ph一SA对所试革兰氏阴性菌中大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌、 鲍曼一不?(本文来源于《四川大学》期刊2004-10-20)

廖颖[5](2003)在《缩小型抗金黄色葡萄球菌靶向工程多肽》一文中研究指出由于抗生素的滥用和耐药菌株的不断出现,特别是耐甲氧西林和耐万古霉素金黄色葡萄球菌的出现,使人类对金黄色葡萄球菌感染的控制受到了严重的挑战,因此在合理使用抗生素的同时更要发展新型的抗生素。而组装出满足人类需要的多结构域蛋白质机器是二十一世纪分子生物学工作的前沿之一。大肠菌素Ia是可形成离子通道的一种细菌素,其通道结构域(D451—I626)能在同种异株的大肠杆菌内膜上形成致死性离子通道。然而由于其信号识别结构域只能识别大肠杆菌外膜和内膜上的特异受体,因此野生型大肠菌素难以拓展成为对抗它种细菌的抗菌素。上世纪九十年代人们逐步确定了革兰氏阳性菌分泌的调节同种细菌生长和毒素产生的信息素多是由数个或数十个氨基酸残基组成的多肽,具有自主寻找同种菌胞膜受体的生物学活性。丘小庆等利用信息素的自主导向特性和大肠菌素Ia的致死性通道特性构建了由金黄色葡萄球菌信息素AgrD和大肠菌素Ia组成的融合蛋白,命名为Pheromonicin,该蛋白表现出了信息素和大肠菌素Ia都不具有的抗金黄色葡萄球菌活性。但这样的融合蛋白尚有大肠菌素Ia两个与抗金黄色葡萄球菌活性无关的信号识别结构域,从理论上讲还不属于纯粹的多结构域蛋白质分子机器,因而本四川大学硕士学位论文研究将进一步裁减掉大肠菌素Ia的非通道形成肤链,利用大肠菌素Ia的水性孔道结构域(K54牛一1626)和金黄色葡萄球菌信息素AgrD构建结构上更紧凑的多结构域蛋白质分子机器(Engineered’multidomainProtein maehine)。 利用点突变方法将金黄色葡萄球菌信息素AgrD(I型,YSTCDFIM)的基因引入到大肠菌素fa梭基端1626基因上,并将限制性内切酶Sacl酶切位点基因分别引入到大肠菌素fa的P4和K544上,通过酶切、胶回收、连接获得含大肠菌素Ia水性孔道结构域和金黄色葡萄球菌信息素AgrD基因的重组质粒。将重组质粒转化入大肠杆菌TGI工程菌中,生产构建的工程多肤,离子交换纯化后获得工程多肤初步纯化产物,体外抗菌试验、药物撤离试验检测工程多肤的抗菌活性,在人工脂质膜上测定其形成离子通道的特性以初步研究抗菌机理,·并观察其对真核细胞的毒性作用。 实验结果表明:该工程多肤对叁种ATcc标准菌株ATcc 25923(青霉素敏感菌株)、ATCC 29213(产青霉素酶菌株)、ATCC BAA一42(耐甲氧西林菌株)的Mlc分别为1林留血l、2林留ml、4林创ml。药物撤离试验和PI染色结果显示工程多肤对金黄色葡萄球菌的作用是致死性的。该工程多肤能在人工脂质膜上形成电压依赖性离子通道,即当电压由OmV变为+somV时通道立刻开放,电导骤然上升到某一数值,其后电导发生丫系列谐振式变化;而当电压由+SOmV变为一50mV时电导并不立即减小至O,而出现正电压状态下类似的表现。细胞毒性实验显示工程多肤对真核细胞没有明显的毒性作用。 以上结果说明,缩小型抗金黄色葡萄球菌靶向人工多肤能在金黄色葡萄球菌信息素AgrD的诱导下,在其细胞膜上形成致死性离子通道,因而具有抗金黄色葡萄球菌的生物活性,对耐甲氧西林的金黄色葡萄球四川大学硕士学位论文菌也表现出了较强的抗菌活性,因而该工程多肤极具发展成为抗耐药金黄色葡萄球菌药物的潜在价值,同时它也是将两个来自不同种源蛋白质,生物活性截然不同的微结构域构建成为一种自然界所没有的抗菌蛋白质分子机器(bactericidal protein machine)的一个实例。(本文来源于《四川大学》期刊2003-11-01)

廖颖,张杰,卢晓风,万琳,李胜富[6](2003)在《抗耐药金黄色葡萄球菌工程多肽—一种人工构建的抗菌蛋白质分子机器》一文中研究指出目的 将两个不同种来源 ,不同生物活性的蛋白质结构域构建成为一种具有靶向抗菌活性的工程多肽。方法 利用质粒重组 ,将金黄色葡萄球菌 Agr D信息素 (8肽 )基因连接在大肠菌素 Ia水性孔道结构域 (K5 4 4 -I6 2 6 )羧基端基因上 ,将重组的质粒转化入工程菌生产构建的工程多肽 ,离子交换柱纯化后经体外抗菌试验检测其抗菌活性。结果 构建的工程多肽具有强于青霉素类抗生素上百倍的抗耐药金黄色葡萄球菌的活性。结论 构建的工程多肽表现出了两个结构域前体都不具备的靶向抗金黄色葡萄球菌活性 ,从而构建成功了一种具有特异抗菌功能的人造多结构域蛋白质分子机器(本文来源于《四川大学学报(医学版)》期刊2003年04期)

抗金黄色葡萄球菌工程多肽论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

目的 评价我室制备的抗金黄色葡萄球菌工程多肽 (Ph- SA)对耐甲氧西林 /苯唑西林金黄色葡萄球菌 (MRSA )的体内外抗菌活性。方法 采用琼脂二倍稀释法测定 Ph- SA对 6 9株临床分离病原菌的最小抑菌浓度(minim al inhibitory concentration,MIC) ;采用腹腔感染后经尾静脉注射药物方法测定 Ph- SA及对照药物对小鼠的体内保护作用。结果 体外抗菌试验结果显示 Ph- SA对金黄色葡萄球菌呈现强抗菌作用 ,对金黄色葡萄球菌的甲氧西林 /苯唑西林耐药株和敏感株的 MIC50 分别为 8mg/L 和 0 .5 mg/L,按相对分子质量差异换算 ,强于万古霉素 12倍和 4 8倍 ;体内抗菌试验结果显示 :Ph- SA对 MRSA菌株 ATCC BAA- 4 2抗菌效力极强 ,按相对分子质量差异换算 ,至少强于万古霉素 5 9倍。结论  Ph- SA对耐甲氧西林 /苯唑西林金黄色葡萄球菌体内外均呈现极强的抗菌活性 ,具有潜在的临床应用价值。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

抗金黄色葡萄球菌工程多肽论文参考文献

[1].高浩嵩,朱要宏,诸葛增玉,马金磊,李秀娟.抗耐药金黄色葡萄球菌工程多肽对金黄色葡萄球菌人工感染奶山羊所致乳房炎的影响研究[C].中国畜牧兽医学会2010年学术年会——第二届中国兽医临床大会论文集(上册).2010

[2].黄艳,张杰,戴萍,丘小庆.抗金黄色葡萄球菌工程多肽体内外抗菌活性研究[J].四川大学学报(医学版).2004

[3].张淑华,袁靖,欧真蓉,邱晓庆,李幼平.抗金黄色葡萄球菌工程多肽体内外抗菌作用研究[J].四川生理科学杂志.2004

[4].黄艳.抗金黄色葡萄球菌工程多肽体内外抗菌活性研究[D].四川大学.2004

[5].廖颖.缩小型抗金黄色葡萄球菌靶向工程多肽[D].四川大学.2003

[6].廖颖,张杰,卢晓风,万琳,李胜富.抗耐药金黄色葡萄球菌工程多肽—一种人工构建的抗菌蛋白质分子机器[J].四川大学学报(医学版).2003

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