本文主要研究内容
作者顾丽红,徐铁山,林哲敏,赵建国,林鹏,杨少雄,林大捷,侯水生（2019）在《miR-21在鸭胚胎期胸肌发育中的功能研究》一文中研究指出：旨在通过研究鸭miR-21的分子特征、时空表达模式以及对鸭骨骼肌卫星细胞的增殖与分化的影响,为探索骨骼肌发育机制提供支撑。本研究选取180枚(98±5)g鸭蛋,相同条件孵化。从孵化第11天到第27天每天取3枚鸭蛋(分别表示为:E11、E12、E13……E26、E27),无菌状态下逐只采集鸭胚胸肌样品。E27时另取3只鸭胚逐只采集腿肌、心、肝、肾、肌胃、小肠、腹脂和皮脂。混合酶消化法和差速贴壁法分离和纯化骨骼肌卫星细胞,骨骼肌卫星细胞增殖、分化时期分别过表达和干扰miR-21表达,利用荧光定量、蛋白杂交、EdU检测及流式细胞术等检测miR-21对鸭骨骼肌卫星细胞增殖和分化的影响。qRT-PCR结果显示,miR-21的表达随着孵化时间的增加而增加,E19天时到达最高,然后逐渐降低;E27时,miR-21在肝中的表达量最高。在增殖的鸭骨骼肌卫星细胞中过表达miR-21,荧光定量PCR检测CDK2和CyclinD1基因的mRNA表达量分别显著(P<0.05)和极显著增加(P<0.01),EdU检测阳性细胞数目显著增加(P<0.05),流式细胞仪检测发现G2期细胞数目极显著降低(P<0.01)、S期细胞数量显著增加(P<0.05)。在增殖的骨骼肌卫星细胞中,干扰miR-21表达,所得结果相反。在分化的鸭骨骼肌卫星细胞中过表达miR-21,qRT-PCR检测MyoG和MyHC基因的mRNA表达量均极显著增加(P<0.01);蛋白杂交(WB)检测结果显示,MyoG蛋白表达显著增加(P<0.05),MyHC蛋白表达极显著增加(P<0.01)。免疫荧光检测发现,MyHC阳性细胞数和10核以上的肌管数都极显著增加(P<0.01)。在分化的鸭骨骼肌卫星细胞中,干扰miR-21的表达,所得结果相反。结果表明,miR-21具有促进成肌细胞鸭骨骼肌卫星细胞增殖和分化的作用。
Abstract
zhi zai tong guo yan jiu ya miR-21de fen zi te zheng 、shi kong biao da mo shi yi ji dui ya gu ge ji wei xing xi bao de zeng shi yu fen hua de ying xiang ,wei tan suo gu ge ji fa yo ji zhi di gong zhi cheng 。ben yan jiu shua qu 180mei (98±5)gya dan ,xiang tong tiao jian fu hua 。cong fu hua di 11tian dao di 27tian mei tian qu 3mei ya dan (fen bie biao shi wei :E11、E12、E13……E26、E27),mo jun zhuang tai xia zhu zhi cai ji ya pei xiong ji yang pin 。E27shi ling qu 3zhi ya pei zhu zhi cai ji tui ji 、xin 、gan 、shen 、ji wei 、xiao chang 、fu zhi he pi zhi 。hun ge mei xiao hua fa he cha su tie bi fa fen li he chun hua gu ge ji wei xing xi bao ,gu ge ji wei xing xi bao zeng shi 、fen hua shi ji fen bie guo biao da he gan rao miR-21biao da ,li yong ying guang ding liang 、dan bai za jiao 、EdUjian ce ji liu shi xi bao shu deng jian ce miR-21dui ya gu ge ji wei xing xi bao zeng shi he fen hua de ying xiang 。qRT-PCRjie guo xian shi ,miR-21de biao da sui zhao fu hua shi jian de zeng jia er zeng jia ,E19tian shi dao da zui gao ,ran hou zhu jian jiang di ;E27shi ,miR-21zai gan zhong de biao da liang zui gao 。zai zeng shi de ya gu ge ji wei xing xi bao zhong guo biao da miR-21,ying guang ding liang PCRjian ce CDK2he CyclinD1ji yin de mRNAbiao da liang fen bie xian zhe (P<0.05)he ji xian zhe zeng jia (P<0.01),EdUjian ce yang xing xi bao shu mu xian zhe zeng jia (P<0.05),liu shi xi bao yi jian ce fa xian G2ji xi bao shu mu ji xian zhe jiang di (P<0.01)、Sji xi bao shu liang xian zhe zeng jia (P<0.05)。zai zeng shi de gu ge ji wei xing xi bao zhong ,gan rao miR-21biao da ,suo de jie guo xiang fan 。zai fen hua de ya gu ge ji wei xing xi bao zhong guo biao da miR-21,qRT-PCRjian ce MyoGhe MyHCji yin de mRNAbiao da liang jun ji xian zhe zeng jia (P<0.01);dan bai za jiao (WB)jian ce jie guo xian shi ,MyoGdan bai biao da xian zhe zeng jia (P<0.05),MyHCdan bai biao da ji xian zhe zeng jia (P<0.01)。mian yi ying guang jian ce fa xian ,MyHCyang xing xi bao shu he 10he yi shang de ji guan shu dou ji xian zhe zeng jia (P<0.01)。zai fen hua de ya gu ge ji wei xing xi bao zhong ,gan rao miR-21de biao da ,suo de jie guo xiang fan 。jie guo biao ming ,miR-21ju you cu jin cheng ji xi bao ya gu ge ji wei xing xi bao zeng shi he fen hua de zuo yong 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自畜牧兽医学报的顾丽红,徐铁山,林哲敏,赵建国,林鹏,杨少雄,林大捷,侯水生，发表于刊物畜牧兽医学报2019年02期论文，是一篇关于骨骼肌卫星细胞论文,增殖论文,分化论文,畜牧兽医学报2019年02期论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自畜牧兽医学报2019年02期论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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