不同作用模式的内分泌干扰物对模式鱼的毒性效应及分子机理研究

论文摘要

在基因表达水平研究内分泌干扰作用有助于进一步了解环境内分泌干扰物的作用模式和毒性机制。由于现实环境中同时存在众多的化学物质,对不同作用模式内分泌干扰物的联合暴露研究也日益受到关注。在本研究中,以日本青鳉为实验生物,确定了三个不同浓度30,100和300μg/L两种抗雌激素模式物来曲唑（LET）和他莫昔芬（TAM）的72小时暴露处理后雌雄成鱼下丘脑-垂体-性腺（HPG；或HPG[L]肝脏）轴上涉及的一系列相关基因的转录水平变化,结果表明,LET和TAM处理后其基因表达图谱差异明显,并具有组织和性别特异性,确认两者是通过不同的分子机制发挥其抗雌激素效应的。在此基础上,研究了20ng/L EE2和LET及TAM的二元混合物联合暴露后相关基因的转录变化,发现雌激素EE2的处理明显诱导如VTG等生物标志物的表达,而雌激素和抗雌激素的共暴露使基因表达谱变化更为复杂,并可出现非单调的浓度效应曲线。本研究为评价抗雌激素作用类物质以及和雌激素共同暴露的混合效应提供了科学的实验数据。研究表明,环境内分泌干扰物可通过调节水生生物的免疫力对其产生不利影响。本研究在确定了日本青鳉早期发育阶段（受精卵孵化后0-28天）若干免疫相关基因表达的个体发育变化后,通过E2的暴露,研究了幼鱼期雌激素对免疫系统的影响。研究结果表明,雌激素E2处理后,青鳉幼鱼免疫相关基因变化趋势和本底发育表达基本呈负相关,表明环境雌激素类物质可影响鱼类免疫相关基因的表达而干扰其免疫力。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 目录
• 缩略词表
• 第一章 绪论
• 1.1 环境内分泌干扰物的简介
• 1.1.1 环境内分泌干扰物的定义
• 1.1.2 环境中内分泌干扰物的来源及种类
• 1.1.3 环境内分泌干扰物的危害
• 1.2 环境内分泌干扰物的作用机制及模式
• 1.2.1 环境内分泌干扰物的作用机制
• 1.2.2 环境内分泌干扰物的几种不同作用模式
• 1.3 模式鱼在环境内分泌干扰物检测的运用
• 1.3.1 环境内分泌干扰物测试研究中的鱼类实验动物
• 1.3.2 鱼类的生殖发育内分泌系统调节轴
• 1.3.3 鱼类肝脏在内分泌干扰研究中的作用
• 1.3.4 EDCs可能的内分泌干扰作用位点
• 1.3.5 鱼类的内分泌干扰生物标志物
• 1.4 环境内分泌干扰物对免疫系统的作用
• 1.5 研究意义及内容
• 1.5.1 研究意义
• 1.5.2 研究内容
• 第二章 两类抗雌激素单一暴露对青鳉鱼的内分泌干扰效应的研究
• 2.1 前言
• 2.2 材料与方法
• 2.2.1 实验材料
• 2.2.2 暴露实验设计和取样
• 2.2.3 实验方法
• 2.2.4 数据分析
• 2.3 实验结果
• 2.3.1 暴露于LET对青鳉内分泌相关基因表达的影响
• 2.3.2 暴露于TAM对青鳉内分泌相关基因表达的影响
• 2.4 讨论
• 2.4.1 LET暴露对青鳉内分泌相关基因表达的影响
• 2.4.2 TAM暴露对青鳉内分泌相关基因表达的影响
• 2.5 小结
• 第三章 抗雌激素与雌激素联合作用对青鳉鱼的内分泌干扰效应的研究
• 3.1 前言
• 3.2 材料与方法
• 3.2.1 实验材料
• 3.2.2 暴露实验设计与取样
• 3.2.3 实验方法
• 3.2.4 数据分析
• 3.3 实验结果
• 3.3.1 暴露于EE2青鳉内分泌相关基因的表达变化
• 3.3.2 EE2和LET联合暴露的目标基因表达
• 3.3.3 EE2和TAM联合暴露的目标基因表达
• 3.4 讨论
• 3.4.1 EE2暴露对青鳉内分泌相关基因表达的影响
• 3.4.2 EE2和LET联合暴露对青鳉内分泌相关基因表达的影响
• 3.4.3 EE2和TAM联合暴露对青鳉内分泌相关基因表达的影响
• 3.5 小结
• 第四章 免疫相关基因在日本青鳉幼鱼发育阶段中的表达变化及雌激素暴露的影响
• 4.1 前言
• 4.2 材料与方法
• 4.2.1 实验材料
• 4.2.2 暴露实验设计与取样
• 4.2.3 实验方法
• 4.2.4 数据分析
• 4.3 实验结果
• 4.3.1 孵化后28天日本青鳉的免疫相关基因的表达图谱
• 4.3.2 E2暴露对孵化后28天日本青鳉的免疫相关基因表达图谱的影响
• 4.4 讨论
• 4.5 小结
• 结论与创新点
• 参考文献
• 致谢
• 攻读学位期间发表的学术论文