论文摘要
临床工作中发现伴有脑外伤的骨折病人,其骨痂生长明显增多加快,甚至在某些关节周围出现异位骨化。关于此现象国内外均有临床报道和基础研究,提出了很多假说,但其中机制迄今仍不明朗。目前提出的机制多数是针对脑外伤后是否会导致脑组织内某些成份释放入血液系统促进新骨形成,但没有关于颅骨骨折是否会引起颅骨中的某些成分进入血液系统促进新骨形成的研究和报道。目的:探讨颅骨骨折在脑外伤促新骨形成过程中的作用;研究颅骨骨折伴股骨骨折组大鼠血浆对骨髓间质细胞的作用;研究颅骨移植对骨折愈合的影响作用;研究IGFBP-5在颅骨组织中的表达情况,及其对骨髓间质细胞的作用。方法:研究分以下几个部分进行:1.建立实验动物模型,比较颅骨骨折伴股骨骨折、脑外伤伴股骨骨折及单纯股骨骨折后骨折愈合的情况。2.进行大鼠骨髓间充质干细胞的分离、培养、纯化及鉴定。3.比较颅骨骨折组血浆、脑外伤组血浆及单纯骨折组血浆对大鼠骨髓间充质细胞增殖、分化及矿化功能的影响;比较颅骨浸泡液、髂骨浸泡液对大鼠骨髓间充质细胞增殖、分化及矿化功能的影响。4.研究IGFBP-5在颅骨、髂骨及股骨中的表达,比较不同浓度IGFBP-5对大鼠骨髓间充质细胞增殖、分化及矿化功能的影响;去除脑外伤组血浆中的IGFBP-5,比较其与未处理脑外伤组血浆对大鼠骨髓间充质细胞增殖、分化及矿化功能的影响。结果:1.通过建立脑外伤、颅骨骨折及股骨骨折动物模型,实验结果显示术后4周颅骨骨折组生成骨痂体积比单纯骨折组骨痂大（P<0.05）,但小于脑外伤组（P<0.05）;骨折断端骨密度检测结果显示颅骨骨折组与颅脑损伤组无明显差异（P>0.05）,但两组都低于单纯骨折组（P<0.05）;组织形态学HE染色显示颅骨骨折组与脑外伤组类似,但不同与单纯骨折组。2.采用密度梯度离心法和贴壁筛选法相结合,利用Ficoll分离液能有效地将大部分造血细胞和单个核细胞分离开来,再经过体外贴壁培养,去除悬浮生长的造血系细胞,所获得的BMSCs纯度高且活性强。3.颅骨移植组骨痂体积明显大于髂骨移植（P<0.05）和单纯骨折组（P<0.05）。骨折断端骨密度检测结果显示颅骨移植组低于单纯骨折组及髂骨移植组（P<0.05）;组织形态学HE染色显示颅骨移植组不同于髂骨移植组和单纯骨折组; CBF+F血浆组细胞在增殖、向成骨细胞分化及促进钙结节生成能力均较F组血浆培养组强,二者比较有统计学差异（P<0.05）,但较TBI+F动物血浆培养组数量差,二者比较有统计学差异（P<0.05）;颅骨浸泡液在增殖、向成骨细胞分化及促进钙结节生成能力三方面均较髂骨浸泡液强（P<0.05）。4.各骨折组动物模型血浆中IGFBP-5浓度于骨折后第8小时达到高峰,此后逐渐减低,至术后第5天时,各组血浆IGFBP-5浓度与正常组血浆无差别。骨折后8小时CBF+F组血浆IGFBP-5浓度是单纯骨折组血浆IGFBP-5浓度的2.83倍,是正常大鼠血浆IGFBP-5浓度的3.12倍。结论:1.颅骨骨折可促进新骨形成,颅骨骨折在脑外伤促新骨形成过程中起着重要作用。2.颅骨移植促进新骨形成作用强于髂骨移植。3. IGFBP-5在颅骨中高表达,且具有促BMSCs增殖、向成骨细胞分化及钙化的作用,在颅骨骨折促新骨形成过程中起着重要作用。
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