大豆体细胞胚培养和遗传定性研究

论文摘要

本研究以61个大豆基因型为材料,培养未成熟子叶诱导体细胞胚胎进行直接分化和继代培养后再进行分化再生植株的研究。试验探讨了影响不同大豆基因型未成熟子叶体细胞胚胎诱导的因素并获得再生植株。通过液体悬浮培养,选择形态较规则的体细胞胚进行继代后,改良了大豆的再生性。用SSR检测不同继代时间的体细胞胚及再生植株,表明本人豆体细胞胚培养体系有较高的微卫星DNA遗传稳定性。 本研究具体结果如下: 1.大豆未成熟子叶体细胞胚胎诱导对基因型依赖较大,体细胞胚胎诱导率在基因型间的变异范围在0—92.5%之间,其中在MSB培养基上,25℃时,最佳培养条件下,最高体胚发生率是南农90C006,其次是卫515,为87.5%。 2.试验具体分析了大豆未成熟子叶离体培养的影响因素,发现温度对未成熟子叶的体细胞胚胎诱导率影响不大,但对其愈伤组织的形成有较大的影响;培养基对体细胞胚的诱导也有较大的影响,但可能和基因型有互作。影响大豆体细胞胚诱导的其它因素还有成熟种子蛋白质含量和外植体生理状态等。成熟种子蛋白质含量和大豆未成熟子叶体细胞胚发生之间存在负相关。 3.对试验的61份大豆材料诱导体细胞胚后,对部分基因型直接分化共获得了50多株再生植株,并结实。完成了大豆未成熟子叶诱导体细胞胚胎发生及直接分化再生植株。 4.试验以国外品种为材料,通过液体悬浮继代培养、选择形态较规則的体细胞胚建立大豆体细胞胚系,进行分化培养得到了超过200株再生植株,并结实。 5.用102个微卫星DNA标记(SSR)检测不同继代培养时间的大豆体细胞胚系及其再生植株的无性系变异。发现经过一年继代培养,此系统中,悬浮培养的大豆体细胞胚系遗传变异较低,是一个遗传上相当稳定、具有良好再生性的大豆离体培养体系,因此也是一个良好的离体遗传操作系统。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 缩略表
• 第一部分 引论
• 第一章 文献综述
• 1.植物体细胞胚胎培养与植株再生研究进展
• 1.1 植物体细胞胚胎发生的影响因素及特点
• 1.2 植物体细胞胚胎研究概况
• 1.3 大豆体细胞胚胎与再生植株研究概况
• 2.植物体细胞无性系变异研究概况
• 2.1 植物体细胞无性系变异的概念和特点
• 2.2 植物体细胞无性系变异机理的研究
• 2.3 体细胞无性系变异的来源和影响因素
• 3.植物体细胞无性系变异的检测
• 3.1 表型水平的形态学等检测
• 3.2 分子生物学检测
• 4.体细胞无性系变异发生的调控
• 第二章 本研究的目的与意义
• 第二部分 研究报告
• 第一章 材料与方法
• 1.材料
• 2.试验方法
• 2.1 大豆体细胞无性系的建立
• 2.2 体细胞胚胎的分化及植株再生
• 2.3 大豆体细胞无性系变异的SSR检测
• 第二章 结果与分析
• 1.大豆体细胞胚胎的诱导及影响因素
• 1.1 温度对大豆体细胞胚胎的诱导及影响因素
• 1.2 氮素来源和浓度的影响
• 1.3 大豆未成熟子叶体细胞胚胎发生中的基因型效应
• 1.4 影响大豆体细胞胚胎发生的其它因素
• 2.大豆体细胞胚胎分化和植株再生
• 3.大豆体细胞无性系变异的SSR检测分析
• 第三章 讨论与结论
• 1.讨论
• 1.1 大豆未成熟子叶体细胞胚胎发生对基因型的筛选
• 1.2 大豆成熟种子蛋白质含量和体细胞胚胎发生之间的关系
• 1.3 其它影响大豆体细胞胚胎发生的因素
• 1.4 植物体细胞无性系变异
• 1.5 植物体细胞变异的遗传基础
• 2.结论
• 附录
• 参考文献
• 图版
• 致谢