亚洲1型口蹄疫核酸疫苗与重组鸡痘疫苗的构建及实验免疫研究

论文摘要

在分离Asia 1型口蹄疫病毒的基础上,对其衣壳蛋白前体P1-2A基因和蛋白酶3C基因进行了克隆和遗传进化分析,证实了该毒株与我国的Jiangsu/05株同源关系最近,核苷酸和氨基酸序列同源性最高,分别达到98.9%和99.1%。另表明,蛋白酶3C基因氨基酸序列保守,与其它血清型及同血清型不同毒株的同源性达97%以上。成功构建了含有Asia 1 FMDV/JL/05株的P1-2A-3C基因的真核表达质粒pVAX1P1-2A-3C;构建了含有Asia 1/JL/05株FMDV的P1-2A、3C和猪白细胞介素IL18基因的鸡痘病毒中间转移质粒pUTAL-P1-2A-3C-IL18,以及含有Asia 1/JL/05 FMDV的P1-2A、3C基因及O/LZ株FMDV的P1-2A和IL18基因的鸡痘病毒中间转移质粒pUTAL-P1-2A-3C-P1-2A-IL18;筛选出两株重组鸡痘病毒vUTAL-P1-2A-3C-IL18和vUTAL-P1-2A-3C-P1-2A-IL18。并进行了单独的和联合实验免疫研究,证明了上述重组体均能诱导小鼠产生一定水平的体液免疫和细胞免疫反应。用vUTAL-P1-2A-3C-IL18免疫的豚鼠能够抵抗同源强毒攻击,有3/4豚鼠获得了保护。用vUTAL-PI-2A-IL18-P1-2A-3C单独免疫小鼠时比用vUTAL-P1-2A-3C-IL18和vUATL3CP1混合免疫小鼠产生体液免疫反应和细胞免疫反应水平高,但差异不显著。此研究为研制多价、有效、新型口蹄疫疫苗奠定了打下一定基础。

论文目录

• 提要
• 引言
• 第一篇 文献综述
• 第一章 口蹄疫病毒基因组、结构蛋白和非结构蛋白的特点及功能
• 1 FMDV 基因组结构及特点
• 2 FMDV 结构蛋白和非结构蛋白的特点及功能
• 第二章 口蹄疫疫苗研究进展
• 1 灭活疫苗
• 2 活疫苗
• 3 新型疫苗
• 第二篇 研究内容
• 第一章 亚洲1 型口蹄疫病毒的分离、鉴定
• 1 材料和方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 4 小结
• 第二章 ASIA 1 FMDV/JL/05 株衣壳前体蛋白 P1-2A 基因和 3C 蛋白酶基因克隆、遗传进化分析与表位预测
• 1 材料与方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 4 小结
• 第三章 亚洲1 型口蹄疫核酸疫苗的构建、表达及小鼠实验免疫
• 1 材料与方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 4 小结
• 第四章 共表达亚洲1 型FMDV P1-2A-3C 和IL18 基因重组鸡痘病毒的构建和实验免疫研究
• 1 材料与方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 4 小结
• 第五章 O 型、亚洲1 型口蹄疫二价重组鸡痘疫苗的构建及小鼠实验免疫研究
• 1 材料和方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 4 小结
• 第六章 单价O 型、亚洲1 型口蹄疫重组鸡痘病毒联合免疫与O 型、亚洲1 型二价重组鸡痘病毒单独免疫对比实验免疫研究
• 1 材料与方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 4 小结
• 结论
• 参考文献
• 攻读期间发表的论文
• 中文摘要
• 英文摘要
• 致谢
• 导师简介
• 作者简介
• CURRICULUM VITAE