大豆资源过敏蛋白的鉴定及其遗传规律的研究

论文摘要

大豆蛋白是食用蛋白的主要来源之一,富含人体所需的各种氨基酸,但大豆含有多种过敏蛋白。近年来包括中国在内的世界各国对大豆的消费迅速增长,增加了大豆食品引发过敏的机率。本研究利用481 份我国大豆核心种质、保留种质和野生大豆,以免疫学方法鉴定出缺失过敏蛋白(28K、30K 过敏蛋白)的种质,并进一步研究了28K 过敏蛋白的遗传规律,并且通过SSR 分子标记的分析,明确了缺失过敏蛋白的种质间的关系,同时检验了我国大豆核心种质的代表性。为育种和资源的研究奠定理论基础。通过本论文的研究工作得到的主要结论如下:1. 中国栽培大豆的28K 过敏蛋白缺失比例由北向南呈升高趋势,其平均缺失比例为37.7%。黄淮夏大豆和南方大豆间没有显著性差异,但是它们与北方春大豆间差异极显著。地方品种的28K 过敏蛋白缺失比率(40.4%)高于选育品种,但未达到显著水平。2. 大豆过敏蛋白(30K、28K)的含量非常丰富,但其含量与蛋白质含量没有相关性。3. 核心种质、保留种质及野生大豆28K 过敏蛋白的缺失比例分别为36.3%、39.3%、13.3%,且核心种质和保留种质与野生大豆间的差异极显著,但核心种质与保留种质间差异不显著。核心种质与保留种质的28K 过敏蛋白缺失在各生态区的分布规律基本相同,表明核心种质具有代表性。4. 缺失28K 过敏蛋白的种质遗传变异较为丰富,且分布较为均匀(Simpson 均值0.801),相似性较低。其中,核心种质遗传基础更为广泛,其平均相似系数(0.186)低于保留种质。在利用这些资源时,可以考虑直接在小类群中或在同一大类群的小类群间选配优良组合。5. 无论核心种质与保留种质是分别聚类还是一起聚类,结果都表明同一生态区的品种聚成一大类,同一生态区内产地相同或相近的品种聚成亚类,亚类内又可分为一些小组,聚在一个小组内的品种,其种皮色基本相同。另外,核心种质和保留种质一起聚类时,它们相互交错的聚在一起,各个类群中既有核心种质也有保留种质。这进一步说明核心种质具有代表性。6. 大豆28K 过敏蛋白受一对等位基因控制,其分离比例符合孟德尔遗传规律。其正反交组合表现完全一致,表明属核基因控制,不存在母性效应或细胞质效应。28K 过敏蛋白为隐性遗传,当纯合隐性基因存在时表现为缺失28K 过敏蛋白。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 目录
• 第一章 引言
• 1.1 文献综述
• 1.1.1 大豆蛋白质组成及作用
• 1.1.2 大豆过敏蛋白的研究
• 1.1.3 大豆品种资源蛋白亚基的筛选
• 1.1.4 蛋白亚基基因的遗传及定位
• 1.1.5 蛋白亚基基因的克隆及功能分析
• 1.1.6 分子标记的研究进展
• 1.2 研究的目的与意义
• 1.3 实验设计
• 第二章 材料与方法
• 2.1 实验材料
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 十二烷基磺酸钠聚丙烯胺氨凝胶电泳（SDS-PAGE）
• 2.2.2 免疫杂交实验
• 2.2.3 SSR 分析
• 第三章 结果与分析
• 3.1 聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）
• 3.2 栽培大豆过敏蛋白缺失种质的分析
• 3.2.1 栽培大豆过敏蛋白缺失筛选概况
• 3.2.2 栽培大豆28K 过敏蛋白缺失种质在三个栽培区的分布
• 3.2.3 栽培大豆过敏蛋白缺失种质7 个种植型中的分布
• 3.2.4 栽培大豆28K 过敏蛋白缺失的地方品种与选育品种分布
• 3.3 保留种质与核心种质及野生大豆的28K 过敏蛋白缺失的比较
• 3.3.1 28K 过敏蛋白缺失品种在三个栽培区中的分布
• 3.3.2 28K 过敏蛋白缺失地方品种与选育品种在核心种质和保留种质中的分布
• 3.3.3 核心种质与野生大豆的28K 过敏蛋白缺失比较
• 3.4 28K 过敏蛋白缺失的种质资源的利用
• 3.4.1 不同SSR 引物基本信息比较
• 3.4.2 核心种质与保留种质对比分析
• 3.5 28K 过敏蛋白遗传规律的研究
• 第四章 讨论
• 4.1 栽培大豆28K 过敏蛋白分布规律
• 4.2 核心种质和保留种质的28K 过敏蛋白对比分析
• 4.3 28K 过敏蛋白的遗传规律的研究
• 第五章 结论
• 参考文献
• 致谢
• 作者简历