论文摘要
研究背景我们对于呼吸疾病的认识，大多都是从动物实验中得到的。最典型的一个例子就是，对很多动物包括人类的研究表明，肺的炎症反应与气道的高反应性是有关的。小鼠被广泛的用于呼吸疾病的研究中是有很多优势所决定的，包括：对于小鼠的免疫系统有了一定的认识，大量的试剂可以在小鼠身上使用，小鼠较短的繁殖周期，对于小鼠基因组的充分认识，转基因技术的出现，以及价格便宜等经济方面的优势。然而小鼠的体积决定了测量小鼠肺通气功能需要克服一系列的难题。目前测量小鼠气道反应性的方法多种多样，从无创到有创，各种方法各有利弊。目前无创测量的最常用的是Penh(enhanced pause)的测定。Penh的测量是将小鼠自由的放置于一容器内，仅测量容器内压力的变化。容器内的压力随着小鼠的呼吸而变化，压力的变化就用来衡量小鼠的肺通气功能，这就最大可能的避免了人为因素对测量结果的影响。但Penh是通过容器压力变化间接反映小鼠气道的反应性，并不是一个直接测定的结果。在进行Penh的测量时，体描箱内压力变化是其基础值，容易受到很多因素如小鼠的运动、小鼠的潮气量、功能残气量以及气体的温度、湿度等的影响。因此，与其说是反映通气功能，不如说Penh反映小鼠的通气模式更为恰当(如呼吸频率、潮气量)。以上因素一定程度上限制了Penh反映小鼠通气功能的特异性和准确性。相对于无创法来说，有创法是测量小鼠的肺阻力。测量小鼠肺阻力，需要控制小鼠的呼吸频率、潮气量等参数，因此是目前测量小鼠通气功能最为精确的方法。但是，这种方法对于小鼠的操作较多，需要气管插管等，小鼠在测量时所处的状态与它的自然状态差异很大。研究目的在我们成熟的哮喘模型基础上，应用有创和无创的方法，在同一小鼠上测量其气道高反应性(Airway hyperresponsiveness，AHR)，并观察了糖皮质激素地塞米松干预后的AHR改变情况。研究方法选择健康雄性的C57BL／6小鼠，6—8周龄，体重18—22g。以卵白蛋白(OVA)作为抗原进行两次腹腔注射致敏和三次雾化吸入激发，建立哮喘模型，同时设立空白对照组(以生理盐水代替OVA)，以及地塞米松治疗组(造模程序同OVA组，在OVA激发前每只小鼠腹腔注射溶于0.2ml生理盐水的地塞米松25ug)。在造模的第27天行无创测量，第28天进行有创的气道反应性测量。研究结果Penh和肺阻力测量结果，无论在不同激发药物之间，还是不同组间，其主效应均存在显著性差异，尤其是激发主效应(P＜0.001)。Pearson相关性分析结果显示，Penh和肺阻力指标具有良好的正相关性(r=0.545，P＜0.001)。结论在我们的哮喘模型上，可以用Penh来测定小鼠的气道反应性。糖皮质激素地塞米松干预后的AHR明显下降。