白藜芦醇抗Friend型鼠艾滋病（MAIDS）的实验研究

论文题目: 白藜芦醇抗Friend型鼠艾滋病（MAIDS）的实验研究

论文类型: 博士论文

论文专业: 中医临床基础

作者: 洪志哲

导师: 王新华

关键词: 白藜芦醇,鼠白血病病毒,鼠艾滋病,抗病毒,机理

文献来源: 广州中医药大学

发表年度: 2005

论文摘要: 1.目的本课题研究的目的是通过体内实验,研究中药虎杖有效成分白藜芦醇的抗Friend型鼠艾滋病（MAIDS）作用,并初步探讨其抗病毒作用的机理,为开发传统中药有效抗病毒单体,并应用于临床提供可靠的实验数据。 2.实验内容 2.1 Friend型鼠白血病病毒传代与病毒滴度(ID50)测定。 2.2 白藜芦醇对Friend型鼠白血病病毒致小鼠脾肿大的抑制作用。 2.3 白藜芦醇对Friend型鼠白血病病毒感染鼠的细胞免疫功能影响的初步研究。 2.4 白藜芦醇对Friend型鼠白血病病毒感染小鼠血象的影响。 2.5 RT-PCR法评价白藜芦醇对FLV-gag基因mRNA表达的影响。 3.实验方法 3.1 BALB/C雌性小鼠20只,随机分成5组,每组4只。取毒种,流水冲浸融化。酒精、碘酒消毒小鼠后,腹腔注射,每只约0.5ml,14日后处死小鼠,剖取脾重>1g者,用无菌匀浆器研磨后,加无菌生理盐水混悬,同时加入青霉素和链霉素配制成的双抗（10,000单位/ml）,配成终浓度500单位/ml。冷冻离心取上清液,制成10%脾悬液,攻击实验小鼠,后面重复此步骤两次。经两次传代,毒力增强,鼠脾适应株制备完成。将收集的脾悬液,倍比稀释成10-1、10-2、10-3、10-4、10-5共5个浓度,进行病毒滴度测定。以雌性BALB/C小鼠20只,随机分为4组,每组5只,用以上5个浓度脾悬液腹腔注射,感染小鼠,每只0.5ml。感染后观察14天,处死并解剖,称取脾重,鼠重,测定脾指数。同时设正常对照组,以脾指数大于正常组均数+3倍标准差者定为阳性,以REED-MUENCH法计算ID50,确定病毒液应稀释的倍数。 3.2 取毒种用流水冲浸融化,以DMEM稀释成100 ID50,放冰水中保存。把雌性BALB/C小鼠随机分为阳性药物组（AZT）、正常对照组、病毒对照组及白藜芦醇药物大、小剂量组。除正常对照组外,各组小鼠经消毒后,用已滴定Friend型鼠白血病病毒液腹腔注射感染,每鼠约0.5ml。各组病毒攻击后一天开始给药,共给药21天,每天一次,灌胃给药。感染后21天,处死小鼠,处死前禁食禁水4小时以上。称鼠体重,处死后取出鼠脾,将脾放在盛有0.9%生理盐水的平碟中洗涤二次,用吸水纸吸干表面水分,称出脾重。按公式计算出脾指数与脾指数抑制率。选取脾脏同一部位组织,用10%中性甲醛固定,选块、石蜡包埋、切片5μm、H.E染色。光镜下观察并拍照。 3.3 取毒种用流水冲浸融化,以DMEM稀释成100 ID50,放冰水中保存。把雌性BALB/C

论文目录:

中文摘要

英文摘要

引言

研究背景

第一部分文献研究

第一节现代医学对艾滋病的认识

1.艾滋病的流行与危害

2.艾滋病病毒病原学

3.HIV的传播途径

4.AIDS的病因及发病机理

5.AIDS的临床表现

6.AIDS的诊断

7.AIDS的预防与治疗

8.AIDS的研究进展

第二节中医对艾滋病相关病证的认识

1.辨证论治HIV的研究

2.中医药抗人类免疫缺陷病毒的研究进展

第三节艾滋病实验动物模型的研究进展

1.灵长类动物模型

2.啮齿类动物模型

第四节白藜芦醇现代药理学的研究新进展

第二部分实验研究

第一节 Friend型鼠白血病病毒传代与病毒滴度测定

第二节白藜芦醇对Friend型鼠白血病病毒致小鼠脾肿大的抑制作用

第三节白藜芦醇对Friend型鼠白血病病毒感染鼠的细胞免疫功能影响的初步研究

第四节白藜芦醇对Friend型鼠白血病病毒感染小鼠血象的影响

第五节 RT-PCR法评价白藜芦醇对FLV-gag基因mRNA表达的影响

结语

创新点

问题与展望

参考文献

外文缩略语表

致谢

附图

发布时间: 2005-07-22

白藜芦醇抗Friend型鼠艾滋病（MAIDS）的实验研究

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