论文题目: 基因枪法转化铝敏感小麦体系的建立
论文类型: 硕士论文
论文专业: 生物化工
作者: 肖驰平
导师: 何光源
关键词: 小麦,成熟胚,植株再生,基因枪转化
文献来源: 华中科技大学
发表年度: 2005
论文摘要: 小麦(Triticum aestivum L.)是世界上最重要的粮食作物之一。近年来,随着世界工业化的发展,导致了土壤中铝的大量活化,严重制约了小麦的生长和产量。因此,利用植物基因工程技术改良小麦品质、提高耐铝性是非常重要的。为了建立基因枪法转化铝敏感小麦的稳定体系,本课题研究了质粒的转化与大量制备;酸性条件下铝胁迫对小麦成熟胚盾片诱导和分化的影响;在诱导培养基中加入卡那霉素对成熟胚污染问题的作用;此外,本文研究了在不同的条件下,GUS基因瞬时表达量的差异,确定了利用基因枪转化小麦幼胚的最适条件。实验结果表明,采用TB处理大肠杆菌细胞,并加入DMSO、PIPES和无机离子K+、Mn2+,使转化频率有较大幅度的提高;抗性品系小麦Atlas66受铝毒害较小,培养基中铝的存在与否对诱导率、分化率无显著影响,而铝敏感品系小麦EM12随培养基中铝浓度的增加诱导率、分化率呈梯度下降;随着卡那霉素浓度的增加,小麦离体完整胚在诱导培养过程中污染率呈线性降低,但愈伤组织诱导频率与卡那霉素浓度无明显相关性;受体材料在轰击前幼胚经过不同时间的预培养,对GUS基因瞬时表达量有明显影响,诱导10天的幼胚GUS表达量远高于诱导4天及诱导24天的幼胚盾片;在甘露醇浓度为0.75mol/L时GUS基因活性最高,此时蓝点数目比对照高4-5倍。
论文目录:
摘要
Abstract
1 综述
1.1 小麦生产概况
1.2 铝毒害及耐铝性机制
1.3 小麦组织培养
1.4 小麦遗传转化
1.5 本研究的目的和内容
2 质粒转化及大量制备
2.1 材料与方法
2.2 结果与分析
2.3 讨论
3 铝对小麦成熟胚盾片诱导及分化的影响
3.1 材料与方法
3.2 结果与分析
3.3 讨论
4 基因枪转化小麦条件的优化
4.1 材料与方法
4.2 结果与分析
4.3 讨论
5 总结与展望
5.1 总结
5.2 展望
致谢
参考文献
附录1 作者攻读硕士学位期间发表的论文
发布时间: 2008-02-19
参考文献
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