复杂天然产物特征组分HPLC筛选方法的研究

论文摘要

天然产物成分复杂,不同的来源、不同部位、不同的处理方法得到的产物中有效药用组成、含量等皆可能有相当大的差别。天然产物复杂体系研究中的重点为其特征组分的研究。发展系统化的高效液相色谱特征组分筛选方法,对于寻找特征组分、质量控制等具有重要意义。水飞蓟作为一种重要的中药,具有诸多药理特征,已知水飞蓟素是其最重要的有效组分之一。本文以水飞蓟作为实验样品,系统研究其幼草、种子、花、叶、根、茎等不同部位,采用不同极性的溶剂热回流、超声提取等方法得到的组分的结构特征。说明了不同部位提取物中化学成分的差异,建立了完备的水飞蓟HPLC分析方法。并进一步对水飞蓟幼草和全草的水提物进行抗肿瘤研究,实验发现除种子外,水飞蓟幼草和全草的水提物,对HepG2,MNK45,MCF-7,A431四种不同种类的癌细胞都有抗肿瘤的抑制作用,可以为水飞蓟的全草的植物利用度提供一定参考。茶叶是中国传统饮品。以茶叶提取物制备的茶饮料为样品,将构建的方法运用于茶饮料中特征组分茶氨酸的快速分析。研究不同处理方法得到的绿茶、红茶、铁观音、乌龙茶、普洱茶等不同品种茶饮料中的茶氨酸水平。通过优化样品预处理方法,结合UPLC技术,发展了相应的快速分析方法,与普通HPLC分析方法时间相比节约了分析时间,且具有灵敏度高,干扰少等特点。所发展的HPLC方法普适、稳健,为复杂天然产物的特征组分的高效液相色谱法筛选提供了系统策略。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第1章 前言
• 第2章 水飞蓟高效液相色谱法分析方法的建立
• 2.1 引言
• 2.2 实验部分
• 2.2.1 试剂和样品
• 2.2.2 仪器
• 2.2.3 样品处理及实验方法
• 2.3 结果与讨论
• 2.3.1 水飞蓟HPLC分析条件的建立
• 2.3.1.1 流动相类型及梯度的优化
• 2.3.1.2 检测波长的选择
• 2.3.1.3 流动相pH条件的优化
• 2.3.1.4 缓冲盐浓度的调节
• 2.3.1.5 流速的考察
• 2.3.1.6 柱温的考察
• 2.3.2 不同提取溶剂及不同提取工艺的研究
• 2.3.2.1 水飞蓟幼草的不同溶剂的研究
• 2.3.2.2 水飞蓟幼草不同提取工艺的研究
• 2.4 本章小结
• 第3章 水飞蓟不同部位组成特征的考察
• 3.1 引言
• 3.2 实验部分
• 3.2.1 试剂和样品
• 3.2.2 仪器
• 3.2.3 主要试剂配制
• 3.2.4 样品处理及实验方法
• 3.3 结果与讨论
• 3.3.1 水飞蓟不同溶剂提取组分的分析
• 3.3.1.1 水飞蓟种子的不同溶剂提取组分分析
• 3.3.1.2 水飞蓟花的不同溶剂提取组分分析
• 3.3.1.3 水飞蓟叶的不同溶剂提取组分分析
• 3.3.1.4 水飞蓟茎的不同溶剂提取组分分析
• 3.3.1.5 水飞蓟根的不同溶剂提取组分分析
• 3.3.2 利用化学检测法初测水飞蓟不同部位的主要成分
• 3.3.3 水飞蓟体外抗肿瘤活性的初筛
• 3.3.3.1 水飞蓟幼草、种子和全草的水提物对HepG2肿瘤细胞增殖的抑制作用
• 3.3.3.2 水飞蓟幼草、种子和全草的水提物对A431肿瘤细胞增殖的抑制作用
• 3.3.3.3 水飞蓟幼草、种子和全草的水提物对MCF-7肿瘤细胞增殖的抑制作用
• 3.3.3.4 水飞蓟幼草、种子和全草的水提物对MNK45肿瘤细胞增殖的抑制作用
• 3.4 本章小结
• 第4章 茶饮料中茶氨酸的快速分析方法发展
• 4.1 引言
• 4.2 实验部分
• 4.2.1 试剂与样品
• 4.2.2 仪器
• 4.2.3 样品处理及实验方法
• 4.3 结果与讨论
• 4.3.1 样品前处理SPE柱的选取及优化
• 4.3.2 UPLC条件的优化
• 4.3.3 检出限与线性关系
• 4.3.4 精密度与回收率的测定
• 4.3.5 实际样品的测定
• 4.4 本章小结
• 第5章 结论
• 参考文献
• 攻读学位期间发表的论文目录
• 致谢