不同精/粗比日粮对山羊前胃上皮生长的影响

论文摘要

本研究包括两部分：1、不同精/粗比目粮对瘤胃上皮生长的影响2、不同精/粗比日粮对瓣胃上皮的影响。一、不同精/粗比日粮对山羊瘤胃上皮生长的影响9只青年山羊随机分为高精/粗比组（H,n=3）、中精/粗比组（M,n=3）、低精/粗比组（L,n=3）。L、M、H组日粮精/粗比例分别为10：90,35：65,60：40。连续饲喂21d后屠宰取瘤胃和瓣胃样品。采用气相色谱法测定挥发性脂肪酸浓度；流式细胞仪测定细胞周期；半定量RT-PCR测定细胞周期蛋白D1（cyclin D1）和细胞周期依赖性激酶4（CD K4） mRNA表达；组织切片技术观察前胃上皮形态；生化分析技术测定苹果酸脱氢酶活性。测定结果显示：1)高精/粗比（60：40）组和中精/粗比（35：65）组瘤胃液pH显著低于低精/粗比（10：90）组,相反瘤胃液总挥发性脂肪酸和丁酸浓度显著高于低精/粗比（10：90）组。流式细胞术分析显示高精/粗比（60：40）组Go/G1期细胞百分比显著低于低精/粗比（10：90）组（p<0.05）,而s+G2/M期比例显著高于低精/粗比（10：90）组,提示高精/粗比（60：40）日粮加快了细胞周期进程；细胞周期调节蛋白D1mRNA表达水平升高（p<0.05）,提供了高精/粗比日粮加快细胞周期G1期进程的证据。2)组织切片统计分析显示：高精/粗比（60：40）组瘤胃上皮乳头角质层脱落现象明显,同时其厚度、细胞层数显著低于低精/粗比（10：90）组（p<0.05,）；此外,高精/粗比（60：40）组瘤胃上皮基底层细胞数量显著高于低精/粗比（10：90）组,提示高精/粗比（60：40）组目粮促进基底层细胞分裂,引起细胞数量增多。以上结果表明,高精/粗比（60：40）日粮不仅增加山羊瘤胃上皮基底层细胞数量,同时加快角质层细胞脱落。苹果酸脱氢酶测定结果表明高精/粗比日粮显著增强瘤胃上皮能量代谢。3)目视观察及测量显示：中精席比（35：65）组瘤胃上皮乳头的长度、单位面积内（1cm2）乳头个数以及乳头表面积均显著高于高精/粗比（60：40）组俨<0.05),提示中精/粗比（35：65）日粮更有助于增加瘤胃上皮乳头吸收面积。二、不同精/粗比日粮对山羊瓣胃上皮生长的影响试验动物及饲喂方法同试验一,低精/粗比（10：90）组瓣胃上皮角质层细胞层厚度显著高于高精/粗比（60：40）组（P<0.05）；并且棘突颗粒层细胞层数以及单位面积内细胞数量均显著高于高精/粗比（60：40）组（P<0.05）,这与瘤胃上皮形态学的结果相反；以上结果提示低精/粗比（10：90）日粮有利于瓣胃上皮棘突颗粒层细胞数量的增加。但是流式细胞术分析显示,G徊1期细胞百分率和S+G2/M细胞百分率在三组间无显著差异（p>0.05）。有关不同精粗比日粮对瓣胃上皮生长的影响需继续研究。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 引言
• 第一篇 文献综述
• 第一章 反刍动物瘤胃上皮生长发育
• 1 反刍动物瘤胃的解剖结构
• 2 反刍动物瘤胃上皮的结构特点
• 3 瘤胃上皮生长发育的过程及调节
• 3.1 瘤胃上皮生长发育的过程
• 3.2 瘤胃上皮生长发育的调节因素
• 4 瘤胃上皮的吸收功能及调节
• 4.1 瘤胃上皮的吸收功能
• 4.2 影响瘤胃上皮吸收功能的因素
• 5 细胞周期及其调节
• 参考文献
• 第二章 瓣胃上皮的生长发育与调节
• 1 瓣胃上皮的结构特征
• 2 瓣胃上皮的生长
• 3 瓣胃上皮的基本功能
• 3.1 瓣胃的消化功能
• 3.2 瓣胃对SCFA的吸收
• 3.3 瓣胃对氨的吸收
• 3.4 氨基酸和小肽的吸收
• 3.5 水的吸收
• 4 不同精/粗比日粮对瓣胃上皮生长与吸收的影响
• 参考文献
• 第二篇 试验研究
• 第一章 不同精/粗比日粮对瘤胃上皮生长的影响
• 1 材料与方法
• 1.1 试验设计及动物饲养
• 1.2 主要仪器和试剂
• 1.3 样品采集
• 1.4 瘤胃pH的测定
• 1.5 瘤胃液挥发性脂肪酸（VFA）的测定
• 1.6 目视观察瘤胃乳头
• 1.7 切片观察瘤胃乳头
• 1.8 流式细胞技术检测瘤胃上皮细胞周期
• 1.9 RT-PCR方法检细胞周期蛋白D1和细胞周期蛋白依赖激酶4 mRNA的影响
• 1.10 组织苹果酸脱氢酶（MDH）活性的测定
• 1.11 统计分析
• 2 实验结果
• 2.1 不同精/粗比日粮对生长山羊瘤胃pH和VFA浓度的影响
• 2.2 不同精/粗比日粮对生长山羊瘤胃上皮角质层细胞脱落的影响
• 2.3 不同精/粗比日粮对生长山羊瘤胃上皮细胞层数的影响
• 2.4 不同精/粗比日粮对生长山羊瘤胃上皮厚度的影响
• 2.5 不同精/粗比日粮对生长山羊瘤胃上皮细胞数量的影响
• 2.6 不同精/粗比日粮对瘤胃上皮乳头表面积的影响
• 2.7 不同精/粗比日粮对瘤胃上皮MDH活性的影响
• 2.8 不同精/粗比日粮对瘤胃上皮细胞周期的的影响
• 2.9 不同精/粗比日粮对瘤胃上皮细胞蛋白D1（cyclinD1）mRNA表达的影响
• 2.10 不同精/粗比日粮对瘤胃上皮细胞周期依赖性激酶4（CDK4）mRNA表达的影响
• 3 讨论
• 4 小结
• 参考文献
• 第二章 不同精/粗比日粮对瓣胃上皮生长的影响
• 1 材料与方法
• 1.1 试验设计及动物饲养
• 1.2 主要仪器及试剂
• 1.3 样品采集
• 1.4 瓣胃常规石蜡切片的制作
• 1.5 切片观察瓣胃上皮
• 1.6 流式细胞技术检测瓣胃上皮细胞周期
• 1.7 统计分析
• 2 实验结果
• 2.1 不同精/粗比日粮对生长山羊瓣胃上皮组织形态学的影响
• 2.2 不同精/粗比日粮对生长山羊瓣胃上皮细胞层层数和厚度的影响
• 2.3 不同精/粗比日粮对生长山羊瓣胃上皮乳头各层细胞数量的影响
• 2.4 不同精/粗比日粮对瓣胃上皮细胞周期的的影响
• 3 讨论
• 4 小结
• 参考文献
• 全文结论
• 附录
• 致谢