川芎超临界CO2萃取及组织培养研究

论文摘要

川芎（Ligusticum chuanxiong Hort.）是伞形科藁本属多年生草本植物,是四川著名的道地药材,具有活血行气,祛风止痛之功效。川芎被广泛用于治疗目前困扰人类的心脑血管系统疾病。其活性成分主要有以藁本内酯、川芎内酯等为代表的苯酞类化合物；以阿魏酸为代表的有机酸类化合物以及生物碱类化合物等。本文以2008年5月下旬采收于四川省都江堰石羊镇徐渡村川芎GAP基地川芎药材为实验材料,用超临界CO2萃取法提取川芎有效组分,以提取率为指标,采用L9（34）正交试验,考察萃取温度、萃取压力、CO2流速三个因素提取的影响,优选出最佳提取工艺为：萃取温度48℃,萃取压力30MPa,CO2流速30L／h,在最佳萃取条件下做三次验证试验,平均提取率4.715%,比九组实验中最高提取率高出0.542%。在最佳条件下,以2009年5月下旬新产川芎为材料,做两次提取,提取率分别为3.880%、3.627%。在最佳条件下,以新产川芎为材料,分别加300mL、500mL无水乙醇作夹带剂提取,提取率分别为4.380%、3.732%。用GC-MS法,对贮存一年的川芎、新产川芎及新产川芎加300mL夹带剂,在最佳萃取条件下的超临界CO2萃取物（分别称为样品1、样品2、样品3）化学成分进行了分析,结果表明川芎超临界CO2萃取物成分在数量上以苯酞类化合物和酯类化合物居多,它们是组成川芎挥发油的主要成分。新产的川芎与贮存一年的川芎相比,具有更多的酯类化合物、烃类化合物及有机酸类化合物。在用超临界CO2萃取法提取川芎有效组分时,引入夹带剂,能更好地将一些极性较大的化合物如酚类化合物、有机酸类化合物及生物碱类化合物提取出来。在川芎组织培养研究过程中,以带小芽的川芎茎节为外植体,不能成功诱导丛生芽的分化。选择幼嫩川芎茎节及茎段作为外植体,经暗培养诱导愈伤组织的效果较好,当培养基条件为MS+24-D （2. 0mg/L）+KT（1. 0mg/L）时,愈伤组织诱导率为70%；为MS+KT（0.5mg/L）+NAA（1. 0mg/L）时,诱导率为28.5%；为MS+24-D（0.5mg/L）时,诱导率为87.5%（培养基中蔗糖、琼脂的含量均分别为30g/L、4.5g/L）,获得的愈伤组织能分化产生丛生芽。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第1章 项目背景及主要内容
• 1.1 本课题的研究背景及意义
• 1.2 国内外研究现状
• 1.3 本课题研究的主要内容和方法
• 1.3.1 本课题研究的主要内容
• 1.3.2 本课题研究的主要方法
• 1.4 本研究课题的来源
• 第2章 川芎研究概述
• 2.1 川芎历史沿革
• 2.2 川芎的生物学特性
• 2.3 川芎的生长周期
• 2.3.1 育苓期
• 2.3.2 苗期
• 2.3.3 茎发生生长期
• 2.3.4 倒苗期
• 2.3.5 二次茎叶发生期
• 2.3.6 根茎膨大期
• 2.4 川芎的繁育与种植
• 2.4.1 川芎的繁育
• 2.4.2 川芎的种植
• 2.5 川芎的采收及加工
• 2.5.1 川芎的采收
• 2.5.2 川芎的加工
• 2.6 川芎的贮藏
• 2.7 川芎的病害与虫害及防治措施
• 2.7.1 川芎田间病害及防治措施
• 2.7.2 川芎田间虫害及防治措施
• 2.7.3 川芎仓储害虫与防治措施
• 2.8 川芎中重金属及农药残留
• 2.8.1 川芎重金属残留
• 2.8.2 川芎农药残留
• 2.9 川芎主要药效成分及其提取
• 2.9.1 川芎的主要药效成分
• 2.9.2 川芎主要药效成分的提取
• 2.9.3 川芎药效成分提取评价指标的选取
• 2.10 川芎主要药效成分含量的测定
• 2.10.1 挥发油成分含量的测定
• 2.10.2 阿魏酸含量的测定
• 2.10.3 川芎生物碱含量的测定
• 2.10.4 其它有效组分含量的测定
• 2.11 川芎药材质量评价
• 2.11.1 液相色谱指纹图谱
• 2.11.2 气相色谱指纹图谱
• 2.11.3 液-质联用指纹图谱
• 2.11.4 气-质联用指纹图谱
• 2.12 川芎药理作用
• 2.12.1 对冠状动脉循环的作用
• 2.12.2 扩张外周血管和降低血压
• 2.12.3 抑制血小板聚集和抗血栓形成
• 2.12.4 镇静作用
• 2.12.5 其他作用
• 2.13 川芎的应用
• 2.13.1 川芎的临床应用
• 2.13.2 其他方面的应用
• 2.14 川芎制剂
• 2.14.1 速效救心丸
• 2.14.2 复方川芎胶囊
• 2.14.3 太极通天液
• 2.14.4 茶调散
• 2.14.5 川芎茶调颗粒
• 2.14.6 川芎茶调袋泡剂
• 2.14.7 川芎茶调滴丸
• 2.15 川芎组织培养研究概况
• 2萃取及萃取物GC-MS分析'>第3章 川芎超临界CO₂萃取及萃取物GC-MS分析
• 3.1 前言
• 3.2 仪器、材料与试剂
• 3.2.1 仪器
• 3.2.2 材料与试剂
• 2萃取'>3.3 川芎有效组分超临界CO₂萃取
• 3.3.1 川芎（样品A）有效组分的提取
• 3.3.2 川芎（样品B）有效组分的提取
• 2萃取物GC-MS分析'>3.4 川芎超临界CO₂萃取物GC-MS分析
• 3.5 小结与讨论
• 第4章 川芎组织培养研究
• 4.1 前言
• 4.2 仪器、设备与试剂
• 4.2.1 仪器
• 4.2.2 试剂
• 4.3 外植体诱导丛生芽的研究
• 4.4 外植体诱导愈伤组织的研究
• 4.4.1 光培养
• 4.4.2 暗培养
• 4.5 愈伤组织分化丛生芽的研究
• 4.6 小结与讨论
• 结论
• 致谢
• 参考文献
• 附录
• 攻读硕士学位期间发表的论文及科研成果