本文主要研究内容
作者辛晶（2019）在《Bcl2l10基因在小鼠植入前胚胎发育过程中的作用》一文中研究指出：母源因子是卵子发生过程中积累的mRNA,蛋白质和小RNA,参与调控精卵融合,染色质重塑和母源-合子转换等早期胚胎发育过程。本实验利用单细胞转录组数据筛选潜在母源基因,并从中选择一个基因进行敲低验证。Bcl2l10是抗凋亡基因,与卵母细胞成熟相关,可能参与小鼠早期胚胎发育。本实验利用RNAi技术进行敲低,研究其在早期胚胎中的作用。1)单细胞转录组数据的简单分析利用本实验室单细胞转录组数据,对卵母细胞-囊胚七个阶段体内胚进行数据分析。首先我们对42个已知母源基因进行了表达模式分析,根据其表达规律,从27238个差异基因中筛选出135个潜在的母源基因。最后,通过GO分析,从这些潜在母源基因中选择Bcl2l10开展深入研究。2)Bcl2l10在卵母细胞和早期胚胎中的表达分析通过定量PCR技术分析Bcl2l10在卵母细胞和早期胚胎中表达量,结果发现:在卵母细胞和原核胚胎中表达量最高,2-cell阶段降低,4-cell阶段表达量急剧下降,8-cell阶段几乎检测不到表达;通过免疫荧光技术分析其蛋白的定位,结果显示:Bcl2l10在卵母细胞、1-cell和2-cell阶段定位于细胞膜,后期转移到细胞质中表达。3)敲低Bcl2l10对小鼠植入前胚胎发育的影响在原核胚胎阶段进行显微注射,Bcl2l10 mRNA在2-cell阶段表达被抑制,而蛋白在8-cell阶段检测到被抑制。敲低Bcl2l10导致囊胚发育率降低,且具有显著性差异(P<0.01)。同时,我们利用Morpholino进行敲低验证,得到一致的结果。上述结果显示,敲低Bcl2l10影响了囊胚发育。因此我们检测了囊胚标志基因Oct4、Cdx2、Nanog和Sox17。结果显示:内细胞团发育相关基因Oct4、Nanog和Sox17的表达都被显著性降低,表明Bcl2l10可能与内细胞团发育相关。由于Bcl-2家族与细胞凋亡相关,因此我们检测了凋亡相关基因Bax和Trp53的表达。结果显示:Bax的表达不受影响;而Trp53在囊胚阶段的表达下降。而敲低Bcl2l10之后,线粒体的活性降低。这表明,Bcl2l10参与线粒体凋亡途径,并影响Trp53的表达。综上,Bcl2l10具有母源基因特征,影响Oct4、Nanog和Sox17的表达,参与内细胞团的发育。这些结果表明,我们筛选的母源基因具有一定的可信性,将为哺乳动物早期胚胎发育研究提供新的候选基因。
Abstract
mu yuan yin zi shi luan zi fa sheng guo cheng zhong ji lei de mRNA,dan bai zhi he xiao RNA,can yu diao kong jing luan rong ge ,ran se zhi chong su he mu yuan -ge zi zhuai huan deng zao ji pei tai fa yo guo cheng 。ben shi yan li yong chan xi bao zhuai lu zu shu ju shai shua qian zai mu yuan ji yin ,bing cong zhong shua ze yi ge ji yin jin hang qiao di yan zheng 。Bcl2l10shi kang diao wang ji yin ,yu luan mu xi bao cheng shou xiang guan ,ke neng can yu xiao shu zao ji pei tai fa yo 。ben shi yan li yong RNAiji shu jin hang qiao di ,yan jiu ji zai zao ji pei tai zhong de zuo yong 。1)chan xi bao zhuai lu zu shu ju de jian chan fen xi li yong ben shi yan shi chan xi bao zhuai lu zu shu ju ,dui luan mu xi bao -nang pei qi ge jie duan ti nei pei jin hang shu ju fen xi 。shou xian wo men dui 42ge yi zhi mu yuan ji yin jin hang le biao da mo shi fen xi ,gen ju ji biao da gui lv ,cong 27238ge cha yi ji yin zhong shai shua chu 135ge qian zai de mu yuan ji yin 。zui hou ,tong guo GOfen xi ,cong zhe xie qian zai mu yuan ji yin zhong shua ze Bcl2l10kai zhan shen ru yan jiu 。2)Bcl2l10zai luan mu xi bao he zao ji pei tai zhong de biao da fen xi tong guo ding liang PCRji shu fen xi Bcl2l10zai luan mu xi bao he zao ji pei tai zhong biao da liang ,jie guo fa xian :zai luan mu xi bao he yuan he pei tai zhong biao da liang zui gao ,2-celljie duan jiang di ,4-celljie duan biao da liang ji ju xia jiang ,8-celljie duan ji hu jian ce bu dao biao da ;tong guo mian yi ying guang ji shu fen xi ji dan bai de ding wei ,jie guo xian shi :Bcl2l10zai luan mu xi bao 、1-cellhe 2-celljie duan ding wei yu xi bao mo ,hou ji zhuai yi dao xi bao zhi zhong biao da 。3)qiao di Bcl2l10dui xiao shu zhi ru qian pei tai fa yo de ying xiang zai yuan he pei tai jie duan jin hang xian wei zhu she ,Bcl2l10 mRNAzai 2-celljie duan biao da bei yi zhi ,er dan bai zai 8-celljie duan jian ce dao bei yi zhi 。qiao di Bcl2l10dao zhi nang pei fa yo lv jiang di ,ju ju you xian zhe xing cha yi (P<0.01)。tong shi ,wo men li yong Morpholinojin hang qiao di yan zheng ,de dao yi zhi de jie guo 。shang shu jie guo xian shi ,qiao di Bcl2l10ying xiang le nang pei fa yo 。yin ci wo men jian ce le nang pei biao zhi ji yin Oct4、Cdx2、Nanoghe Sox17。jie guo xian shi :nei xi bao tuan fa yo xiang guan ji yin Oct4、Nanoghe Sox17de biao da dou bei xian zhe xing jiang di ,biao ming Bcl2l10ke neng yu nei xi bao tuan fa yo xiang guan 。you yu Bcl-2jia zu yu xi bao diao wang xiang guan ,yin ci wo men jian ce le diao wang xiang guan ji yin Baxhe Trp53de biao da 。jie guo xian shi :Baxde biao da bu shou ying xiang ;er Trp53zai nang pei jie duan de biao da xia jiang 。er qiao di Bcl2l10zhi hou ,xian li ti de huo xing jiang di 。zhe biao ming ,Bcl2l10can yu xian li ti diao wang tu jing ,bing ying xiang Trp53de biao da 。zeng shang ,Bcl2l10ju you mu yuan ji yin te zheng ,ying xiang Oct4、Nanoghe Sox17de biao da ,can yu nei xi bao tuan de fa yo 。zhe xie jie guo biao ming ,wo men shai shua de mu yuan ji yin ju you yi ding de ke xin xing ,jiang wei bu ru dong wu zao ji pei tai fa yo yan jiu di gong xin de hou shua ji yin 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自阜阳师范学院的辛晶，发表于刊物阜阳师范学院2019-09-16论文，是一篇关于母源基因论文,胚胎发育论文,转录组测序论文,小鼠论文,阜阳师范学院2019-09-16论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自阜阳师范学院2019-09-16论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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