脱蛋白骨复合VEGF真核表达质粒促进兔股骨头早期缺血坏死修复的实验研究

脱蛋白骨复合VEGF真核表达质粒促进兔股骨头早期缺血坏死修复的实验研究

论文题目: 脱蛋白骨复合VEGF真核表达质粒促进兔股骨头早期缺血坏死修复的实验研究

论文类型: 博士论文

论文专业: 外科学

作者: 曹凯

导师: 安洪

关键词: 脱蛋白骨,血管内皮生长因子,股骨头缺血坏死,基因治疗

文献来源: 重庆医科大学

发表年度: 2005

论文摘要: 股骨头缺血性坏死(avascular necrosis of femoral head , AVNFH)是一种发生在髋关节的棘手疾病。年轻患者的发病率呈进行性的增加,而过早进行全髋关节置换会带来不少更困难的问题。因此,在股骨头塌陷之前寻求一种改善血供,修复股骨头的方法是有意义之举。 近年来 VEGF 基因治疗局部骨缺损、促进骨折愈合的文献报道较多,其中大多数实验均取得了肯定的效果。但无论是局部骨缺损还是骨折,其周围血供情况均较为正常。文献报道 VEGF 基因转染缺血骨骼肌可增加局部血供,同时其转染效率是转染正常骨骼肌的 6 倍,所以受此启发,VEGF 基因治疗缺血性骨坏死的效果又会如何?相关文献目前罕有报道。脱蛋白骨(deproteinized bone, DPB)具有天然的密集微孔系统,极有利于新生毛细血管的长入与间质细胞的迁入,与软材料相比有更好的机械强度,更适合作为骨修复移植材料。目前尚无利用 DPB作为承载体复合 VEGF 质粒基因治疗股骨头缺血性坏死的相关报道。我们用 DPB-VEGF 复合物植入坏死股骨头以期通过诱导血管的发生,促进股骨头的修复。本实验从四个方面进行研究,主要方法、结果及结论如下: 1. 生物衍生骨支架材料—脱蛋白骨的制作及检测 将新鲜成年新西兰大耳白兔干骺端松质骨,采用过氧化氢-乙醚法制作生物衍生骨材料-脱蛋白骨(DPB)。经倒置相差显微镜、扫描电镜观察及多项理化指标检测,证实用该法制得的 DPB 具有与原骨组织基本相同的孔隙-网架三维结构系统,其孔径、孔隙率、孔间交通率以及孔内表面结构均符合组织工程骨的要求,材料中蛋白质、脂质成份基本被完全去除,消除了免疫源。由松质骨来源制作的 DPB 是一种较理想的骨支架材料。 2. 兔股骨头早期坏死模型的建立 将新西兰大白兔分为三组,A 组联合应用马血清和地塞米松磷酸钠诱导骨坏死模型,B 组单纯应用地塞米松磷酸钠,C 组应用生理盐水作为对照组,对三组实验兔股骨头进行 HE、MRI 观察,并对各组兔的血脂、AST 和 ALT 进行检测,分析比较。结果显示 A 组出现了典型的股骨头缺血坏死改变,血脂、AST 和 ALT 与另外两组相比差异有显著性。单纯应用激素组和对照组未出现股骨头缺血坏死。运用马血清和地塞米松磷酸钠可成功诱导出兔骨坏死模型,血管炎、血脂代谢异常和肝功能损害共同导致股骨头缺血坏死发生,短期应用大剂量激素难以诱导出骨坏死模型。

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论文正文:脱蛋白骨复合 VEGF 真核表达质粒促进兔股骨头早期缺血坏死修复的实验研究

前言

第一部分 生物衍生骨支架材料—脱蛋白骨制作及检测

材料与方法

结果

讨论

小结

参考文献

论文图片

第二部分 兔股骨头早期坏死模型的建立

材料与方法

结果

讨论

小结

参考文献

论文图片

第三部分 pcDNA3.1/VEGF165 的构建及生物活性鉴定

材料与方法

结果

讨论

小结

参考文献

第四部分 脱蛋白骨复合 VEGF 质粒促进兔股骨头早期缺血坏死的修复

材料与方法

结果

讨论

小结

参考文献

论文图片

全文结论

综述

致谢

攻读学位期间发表论文

发布时间: 2005-07-22

参考文献

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脱蛋白骨复合VEGF真核表达质粒促进兔股骨头早期缺血坏死修复的实验研究
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