论文摘要
目的：神经母细胞瘤（Neuroblastoma,NB）是起源于胚胎期交感神经系统神经嵴细胞的恶性肿瘤,是儿童最常见的颅外实体瘤之一,其具有恶性程度高、早期多处转移、易产生化疗耐药、复发率高等特点。干细胞是一类具有自我更新能力和多向分化潜能的原始细胞。近年来,越来越多的证据表明在肿瘤组织中存在极少量肿瘤干细胞。它们是肿瘤发生,维持生长、增殖、转移和复发的关键所在,并且在耐受放化疗而导致的复发中发挥重要作用。对肿瘤干细胞的深入研究是开发更有效的肿瘤诊治方法的基础,能为靶向治疗等新途径提供理论依据。研究干细胞标志物CD133、CD24、CD44在神经母细胞瘤中的表达及与Ki-67的表达关系,分析上述指标与患者临床病理因素及预后的关系,寻找复发及难治的神经母细胞瘤的新的治疗靶点。方法：选取天津医科大学附属肿瘤医院收治的并行手术治疗的神经母细胞瘤78例石蜡包埋组织标本切片,通过免疫组织化学技术检测瘤巢中CD133、CD24、CD44、Ki-67的表达情况,分析上述蛋白表达之间的关系及进行临床病理预后分析。应用SPSS16.0统计学软件进行数据分析,计数资料采用χ2检验,Kaplan-Meier生存分析估计其生存曲线,Log-rank法比较组间的差别,Cox回归模型进行多因素分析。两组间等级相关性采用Spearman相关分析。P<0.05认为有统计学意义。结果：1.CD133阳性表达率为55.1%,其表达与INSS分期、肿瘤直径及病理类型有关。Ⅰ、Ⅱ、Ⅳs期与Ⅲ、Ⅳ期之间表达差异具有统计学意义（P=0.037）；肿瘤直径≤7cm与肿瘤直径>7cm之间表达差异具有统计学意义（P=0.040）；神经母细胞瘤、节细胞神经母细胞瘤之间表达差异具有统计学意义（P=0.019）。2.CD24阳性表达率为60.3%,其表达与年龄、INSS分期、是否骨转移、病理类型及是否术前化疗有关。年龄≤1岁组与年龄>1岁组之间表达差异具有统计学意义（P=0.008）；Ⅰ、Ⅱ、Ⅳs期与Ⅲ、Ⅳ期之间表达差异具有统计学意义（P=0.001）；骨转移组与非骨转移组之间表达差异具有统计学意义（P=0.005）；神经母细胞瘤、节细胞神经母细胞瘤之间表达差异具有统计学意义（P=0.038）；术前化疗组与术前未化疗组之间表达差异具有统计学意义（P=0.027）。3.CD44阳性表达率为75.6%,其表达与INSS分期、是否骨转移、病理类型、是否术前化疗有关。Ⅰ、Ⅱ、Ⅳs期与Ⅲ、Ⅳ期之间表达差异具有统计学意义（P=0.007）；骨转移组与非骨转移组之间表达差异具有统计学意义（P=0.006）；神经母细胞瘤、节细胞神经母细胞瘤之间表达差异具有统计学意义（P=0.032）；术前化疗组与术前未化疗组之间表达差异具有统计学意义（P=0.009）4.Ki-67阳性表达率为59.0%,其表达与年龄及INSS分期有关。年龄≤1岁组与年龄>1岁组之间表达差异具有统计学意义（P=0.011）；Ⅰ、Ⅱ、Ⅳs期与Ⅲ、Ⅳ期之间表达差异具有统计学意义（P=0.002）5.CD133和CD24的表达呈显著正相关（rs=0.479,P=0.000）；CD133和CD44的表达、CD24和CD44的表达均呈显著负相关（rs=-0.235,P=0.039；rs=-0.237,P=0.037）；CD133和Ki-67的表达、CD24和Ki-67的表达、CD44和Ki-67的表达未见明显相关性（均P>0.05）。6.年龄>1岁、是否复发及CD133阳性表达为神经母细胞瘤独立的预后影响因素,P值分别为0.037、0.001、0.001。结论：1.年龄>1岁、复发及CD133阳性是NB独立预后不良因素。2. NB中CD133与CD24表达呈正相关,CD133与CD44、CD24与CD44表达均呈负相关。3. CD133、CD24、CD44联合检测有助于判断神经母细胞瘤患者的预后。4. CD133+肿瘤细胞、CD24+肿瘤细胞及CD44-肿瘤细胞有望成为NB新的治疗靶点。