论文摘要
目的研究南方红豆杉水提物体外抗肿瘤作用,明确其与紫杉醇抗肿瘤机制的不同,并初步探讨其可能的作用机理。方法采用水煎提取南方红豆杉；以MTT法检测南方红豆杉水提物对体外培养的人肺腺癌A549细胞、胃癌SGC-7901细胞和乳腺癌细胞MCF-7增殖的影响,并以紫杉醇为对照；以生长曲线法分别观察水提物与紫杉醇抑制A549细胞生长的时间-效应曲线；以流式细胞仪检测南方红豆杉水提物对A549细胞、SGC-7901细胞和MCF-7细胞凋亡的影响,以紫杉醇为对照；以普通光学显微镜观察南方红豆杉水提物和紫杉醇对A549细胞、SGC-7901细胞和MCF-7细胞形态的影响；以Western blot检测细胞凋亡相关蛋白P-JNK的表达。结果（1）南方红豆杉的水提物得率为8.25%；（2）南方红豆杉水提物对体外培养的人肺腺癌A549细胞、胃癌SCG-7901细胞和乳腺癌MCF-7细胞的增殖存在明显抑制作用,各浓度组（1.0mg/ml、1.5mg/ml、2.0mg/ml、2.5mg/ml、3.0mg/ml、3.5mg/ml）处理后OD值与对照组比较均存在显著性差异（P<0.05或P<0.01）,且其对各肿瘤细胞的半数抑制率（IC50）相近,表明各肿瘤细胞对其敏感性无明显差异。而紫杉醇对上述各细胞的增殖亦存在明显抑制作用,各浓度组（2μg/ml、4μg/ml、6μg/ml、8μg/ml、10μg/ml、12μg/ml）处理后OD值与对照组比较均存在显著性差异（P<0.05或P<0.01）,但其对各肿瘤细胞的半数抑制率（IC50）差异性较大（P<0.05）,表明各肿瘤细胞对其敏感性存在差异；（3）生长曲线法观察发现南方红豆杉水提物对各细胞增殖抑制作用有一定的剂量-效应关系；（4）光镜观察发现南方红豆杉水提物处理后各肿瘤细胞呈典型的凋亡表现,而紫杉醇处理后的各肿瘤细胞以坏死表现为主；（5）Western blot检测发现南方红豆杉水提物处理后A549细胞P38蛋白表达无变化、P-JNK蛋白随药物浓度增加表达减少。结论（1）南方红豆杉水提物具有抑制多种肿瘤细胞增殖的作用；且其作用呈现一定的剂量-效应依赖和时间-效应依赖；（2）南方红豆杉水提物抗肿瘤机制与紫杉醇不同,其作用机理主要与诱导肿瘤细胞凋亡有关。
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中文摘要ABSTRACT前言实验研究一、材料与方法（一） 实验材料1. 实验室2. 实验细胞株3. 实验仪器4. 实验药品5. 实验试剂6. 主要试剂的配置（二） 实验方法1. 南方红豆杉水提物的制备2. 紫杉醇注射液3. 肿瘤细胞的复苏、培养与传代4. MTT法检测南方红豆杉水提物及紫杉醇分别对三种肿瘤细胞增殖的影响5. 生长曲线法观察南方红豆杉水提物和紫杉醇对人肺癌A549细胞作用的时-效关系6. 光镜观察南方红豆杉水提物和紫杉醇作用于肿瘤细胞24h后对细胞形态的影响7. 流式细胞仪及Annexin V-FITC试剂盒分析细胞凋亡8. Western blot检测南方红豆杉水提物作用后对人肺癌A549细胞凋亡相关蛋白的影响（三） 统计学处理二、结果（一） 南方红豆杉水提物得率（二） 南方红豆杉水提物和紫杉醇对肿瘤细胞增殖的影响1. 南方红豆杉水提物和紫杉醇对肺癌A549细胞增殖的影响2. 南方红豆杉水提物和紫杉醇对胃癌SCG-7901细胞增殖的影响3. 南方红豆杉水提物和紫杉醇对乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响4. 南方红豆杉水提物和紫杉醇作用于三种肿瘤细胞的半数抑制率（三） 南方红豆杉水提物和紫杉醇分别对人肺癌A549细胞作用的生长曲线的影响（四） 南方红豆杉水提物和紫杉醇处理后肿瘤细胞形态的对比1. 光镜观察A549细胞形态变化2. 光镜观察SCG-7901细胞形态变化3. 光镜观察MCF-7细胞形态变化（五） 南方红豆杉水提物和紫杉醇对肿瘤细胞凋亡的影响1. 南方红豆杉水提物和紫杉醇对人肺癌A #549细胞凋亡的影响2. 南方红豆杉水提物和紫杉醇分别对人胃癌SGC-7901细胞凋亡的影响3. 南方红豆杉水提物和紫杉醇分别对人乳腺癌MCF-7细胞凋亡影响的对比（六） 南方红豆杉水提物对人肺癌A549细胞凋亡相关蛋白的影响三、分析与讨论（一） 中药水提物抗肿瘤作用的研究1. 肿瘤细胞增殖的抑制作用2. 抑制肿瘤血管生成3. 协同诱导作用4. 免疫调节作用（二） 中药水提物与醇提物抗肿瘤作用的对比研究（三） 南方红豆杉水提物主要活性成分与紫杉醇（四） 南方红豆杉水提物对肿瘤细胞增殖的抑制作用（五） 南方红豆杉水提物诱导肿瘤细胞的凋亡作用1. 细胞形态学变2. 流式细胞仪检测细胞凋亡3. Western blot检测细胞凋亡相关蛋白的表达（六） 工作展望四、小结结论参考文献附图致谢文献综述参考文献
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