沙葱多糖提取工艺及对小鼠免疫机能影响的研究

论文摘要

论文研究了沙葱多糖的检测方法、热水浸提法、除蛋白工艺以及对小鼠免疫功能的影响,试验结果如下:⑴优化了热水浸提沙葱多糖的工艺。研究了提取时间、提取温度和料液比对沙葱多糖得率的影响,确定了热水浸提法提取沙葱多糖的最佳工艺参数为:提取时间为6h,提取温度为90℃,料液比为1:20。在上述提取条件下,水提法提取沙葱多糖得率可达到2.56%。⑵比较了Sevage法和三氯乙酸法除沙葱多糖溶液中蛋白质的优劣,确定了Sevage法除沙葱中游离蛋白的最佳工艺条件。研究Sevage试剂的添加量、氯仿与正丁醇体积比以及除蛋白次数和除蛋白时间对除蛋白效果的影响,确定了Sevage法去除沙葱多糖蛋白的最佳工艺条件为:Sevage试剂添加量为沙葱多糖溶液体积的1/4,氯仿正丁醇的体积比为3:1,除蛋白时间为30min。此时沙葱多糖的除蛋白率为43.82%,沙葱多糖损失率为4.67%。⑶研究了沙葱多糖对小鼠免疫机能的影响,通过预试验确定了沙葱多糖的最适添加量为75mg/kg·BW·d。在沙葱多糖对免疫器官指数的影响研究中,试验结果显示:试验7d、14d时,空白对照组和实验组的脾指数没有显著差异（P > 0.05）。胸腺指数试验第7d时,实验组和空白对照组没有显著差异（P > 0.05）,14d时实验组显著高于空白对照组（P < 0.05）。在沙葱多糖对非特异性免疫机能的影响试验中,试验结果显示在试验第7d和第14d时,空白对照组、阳性对照组、实验组血清当中的酸性磷酸酶活力差异均不显著（P > 0.05）,肝脏当中的酸性磷酸酶活力在试验第14d时,实验组显著高于空白对照组（P < 0.05）。在沙葱多糖对巨噬细胞吞噬功能的影响试验中,碳廓清指数7d和14d各组差异均不显著,（P > 0.05）,吞噬指数7d和14d时实验组和阳性对照组显著高于空白对照组差异显著（P < 0.05）。在沙葱多糖对血清中溶菌酶含量的影响试验中,7d和14d时实验组的溶菌酶含量显著高于空白对照组（P < 0.05）,实验组和阳性对照组溶菌酶含量差异不显著（P > 0.05）。在沙葱多糖对特异性免疫机能的影响的试验研究中,分别测定了IgG和IL-2。试验结果如下:实验组小鼠血清当中IgG含量显著高于空白对照组（P < 0.05）,实验组和阳性对照组的差异不显著（P > 0.05）。小鼠血清中IL-2含量实验组显著高于空白对照组（P < 0.05）,实验组和阳性对照组差异不显著（P > 0.05）。非特性免疫、细胞免疫和体液免疫是评价受试物免疫调节功能的三项主要指标,其中如果有两个以上（含两个）功能检测结果为阳性,即可判断该受试物具有免疫调节效果。试验中沙葱多糖对小鼠的非特异性免疫、细胞免疫、体液免疫功能的影响检测结果均为阳性,所以判定沙葱多糖具有调节机体免疫功能的功效。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 引言
• 1.1 沙葱及葱属植物简介
• 1.1.1 沙葱的化学成分
• 1.1.2 沙葱的研究进展
• 1.2 多糖简介
• 1.3 多糖提取方法与除蛋白方法
• 1.3.1 多糖提取方法
• 1.3.2 多糖除蛋白方法
• 1.4 多糖含量检测方法
• 1.4.1 3,5—二硝基水杨酸（DNS）比色法
• 1.4.2 地衣酚—硫酸法
• 1.4.3 蒽酮—硫酸法
• 1.4.4 苯酚—硫酸法
• 1.5 多糖调节免疫功能的机理
• 1.5.1 多糖调节免疫活性细胞功能
• 1.5.2 调节细胞因子的分泌
• 1.5.3 调节抗体功能
• 1.5.4 调节补体功能
• 1.6 立题依据
• 1.6.1 多糖作为饲料添加剂在动物生产上的应用
• 1.6.2 多糖作为免疫增强剂在动物生产上的应用
• 1.6.3 沙葱多糖研究与开发的意义
• 1.7 研究目标与研究内容
• 1.7.1 研究目标
• 1.7.2 研究内容
• 1.8 技术路线
• 2 试验研究
• 2.1 沙葱多糖提取工艺的研究
• 2.1.1 沙葱多糖得率计算方法的建立
• 2.1.2 水提法提取沙葱多糖最佳工艺参数的确定
• 2.2 沙葱多糖除蛋白工艺的研究
• 2.2.1 试验材料
• 2.2.2 试验方法
• 2.2.3 数据处理
• 2.2.4 结果与分析
• 2.2.5 讨论
• 2.2.6 小结
• 2.3 沙葱多糖最适添加量的确定
• 2.3.1 试验材料
• 2.3.2 试验方法
• 2.3.3 数据处理
• 2.3.4 结果与分析
• 2.3.5 讨论
• 2.3.6 小结
• 3 沙葱多糖对小鼠免疫机能的影响
• 3.1 试验材料
• 3.1.1 材料和试剂
• 3.1.2 主要仪器和设备
• 3.1.3 试验动物及饲养
• 3.2 试验方法
• 3.2.1 沙葱多糖对免疫器官指数的影响
• 3.2.2 沙葱多糖对非特异性免疫机能的影响
• 3.2.3 沙葱多糖对特异性免疫机能的影响
• 3.3 数据处理
• 3.4 结果与分析
• 3.4.1 沙葱多糖对免疫器官指数的影响结果
• 3.4.2 沙葱多糖对非特异性免疫机能的影响
• 3.4.3 沙葱多糖对特异性免疫机能的影响
• 3.5 讨论
• 3.6 小结
• 4 论文总体结论
• 5 论文的创新点
• 6 有待于解决的问题
• 致谢
• 参考文献
• 作者简介