兔圆小囊内弥散神经内分泌细胞及免疫细胞发生发育研究

论文摘要

圆小囊为兔所特有,是一个集免疫、内分泌、及消化于一体的多功能器官。为了进一步揭示了兔圆小囊内神经内分泌细胞（DNES）和相关免疫细胞的发生发育规律,本研究采用免疫组织化学及电镜技术等方法,观察了1d～60d兔圆小囊中SP（P物质）、SYP（突触素）、S-100蛋白、CD3（T细胞）、CD20（B细胞）、CD57（NK细胞）和CD68（巨噬细胞）的分布规律和数量变化。同时,又对5和15d兔圆小囊进行扫描电镜观察。结果如下: 1.免疫组织化学染色观察发现,在1d可见SP阳性细胞出现,而且其数量也一直处于较高水平;SYP是在20d时开始出现;而S-100蛋白的阳性反应细胞在30d时才开始出现。当它们出现以后,则都随着兔日龄的增长而增多。 2.组织形态学观察发现,在1d兔圆小囊淋巴组织中主要可见两种类型的细胞（Ⅰ型和Ⅱ型）:其中Ⅰ型细胞体积大、着色浅,核大而空亮。此类细胞向四周发出许多细小的突起,这些突起与其相邻细胞的突起相互交织成疏松的网状结构;Ⅱ型细胞体积较小、染色深,在兔圆小囊淋巴组织发育初期比Ⅰ型细胞少。5d时,兔圆小囊淋巴组织中可见圆形、核大、浓染的淋巴样细胞。随着兔日龄的增长,兔圆小囊淋巴组织中淋巴细胞、巨噬细胞及网状细胞等逐渐增多。 3.对不同日龄兔圆小囊中CD3、CD20、CD57和CD68的免疫组化对比观察和定量分析结果表明:1d时可见一定数量的CD68+细胞出现,从形态和位置来看这些细胞与组织形态学观察中所见的Ⅰ型细胞一致,同时还可见有少量的CD57+细胞,但未见有CD3+和CD20+细胞。5d、10d时CD68+、CD57+细胞的数量逐渐增多。而CD3+和CD20+细胞在10d时才偶见有少量出现。以后随着兔日龄的增长CD3+、CD20+、CD68+、和CD57+均逐渐增多。到25d时,CD3和CD20阳性细胞逐渐高于CD68和CD57阳性细胞,35 d时达到显著（P<0.05）。通过SPSS分析发现,上述各细胞之间的增长有一定的相关性。 4.扫描电镜观察发现,5d兔圆小囊黏膜绒毛稀疏,表面光滑,绒毛顶端有许多边缘整齐的微孔。15d时,黏膜绒毛呈指状或舌片状,表面凹凸不平,与5d相比,其黏膜绒毛明显增粗、增长,且密度增大,微孔则明显减少。这些形态变化可能与仔兔营养物质的吸收及防御机能不断完善有关。 上述分析结果表明,三种DNES细胞标志物在兔圆小囊中出现的最早日龄及分布的部位是不同的。这说明圆小囊中DNES的各种细胞成分存在着发育时间差;从免疫相关细胞成分来看,巨噬细胞和NK细胞在兔出生当日就有,而T细胞、B细胞则在5天以后才出现。这说明兔圆小囊淋巴组织中获得性免疫细胞的发育较天然免疫细胞的发育明显迟后,同时也表明圆小囊是一个外周免疫器官。 本研究主要揭示了幼兔圆小囊内DNES细胞和免疫相关细胞的发育特点,为进一步研究哺乳动物神经-内分泌-免疫网络学说提供了新的形态学证据,并为兔病防治尤其是幼兔肠道感染性疾病的防控提供了重要的形态学依据。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 文献综述
• 1.1 兔的应用价值
• 1.2 关于弥散神经内分泌系统
• 1.2.1 弥散神经内分泌系统的研究进展
• 1.2.2 神经内分泌系统与免疫系统的关系
• 1.2.3 关于P-物质、突触素、S-100蛋白的研究进展
• 1.2.4 P-物质、突触素、S-100蛋白在医学上的价值
• 1.3 关于黏膜免疫
• 1.3.1 关于黏膜相关淋巴组织
• 1.3.2 粘膜免疫系统的应用
• 1.4 国内外研究现状
• 1.5 本研究的目的意义
• 第二章 不同日兔龄圆小囊内P-物质、SYP、S-100阳性反应细胞的动态观察
• 2.1 不同日兔龄圆小囊内P-物质、SYP、S-100阳性反应细胞的动态观察
• 2.1.1 材料与方法
• 2.1.2 结果与分析
• 2.1.3 讨论与小结
• 2.2 不同日龄圆小囊内SYP阳性反应细胞的动态观察
• 2.2.1 材料与方法
• 2.2.2 结果与分析
• 2.2.3 讨论与小结
• 2.3 不同日龄圆小囊内S-100阳性反应细胞的动态观察
• 2.3.1 材料与方法
• 2.3.2 结果与分析
• 2.3.3 讨论与小结
• 第三章 不同日龄兔圆小囊的组织结构及相关免疫细胞的动态观察
• 3.1 不同日龄兔圆小囊的形态结构及组织化学观察第一部分
• 3.1.1 材料与方法
• 3.1.2 结果与分析
• 3.1.3 讨论与小结
• 3.2 不同日龄兔圆小囊中相关免疫细胞的动态观察
• 3.2.1 材料与方法
• 3.2.2 结果与分析
• 3.2.3 讨论与小结
• 第四章 结论
• 参考文献
• 致谢
• 个人简介
• 附图及说明