拮抗菌在草莓采后病害防治中的应用研究

论文摘要

草莓（Fragaria）果实属于浆果,果皮薄,柔嫩多汁,是极不便运输,不耐贮藏的水果。目前,除少数使用造价高昂的气调室进行保鲜外,化学药剂仍然是最常使用的草莓保鲜手段。但由此带来的化学残留及健康危害问题严重制约了草莓生产的发展。因此,利用微生物之间的拮抗作用,研制与开发这种绿色抑菌剂已成为一个研究新热点,并且越来越多的试验证明该方法在理论上具有可行性且蕴含着广阔的市场前景。本试验从已知的几种草莓拮抗菌出发,通过在草莓上进行活体试验（in vivo）筛选出有最佳抑菌效果的拮抗菌菌种。随后对该拮抗菌的增殖培养条件进行了优化,并进一步对该拮抗菌的工业制剂的制备方法进行了研究,同时还对该拮抗菌的抑菌机理进行了分析,最后为进一步提高该工业制剂的抑菌效能与化学防腐剂联合施用进行了尝试。主要研究结果如下:1通过in vivo试验,季也蒙毕赤氏酵母对抑制草莓采后的灰霉病的发生有最佳拮抗效果。2通过测定菌体数量、绘制生长曲线确定PDB培养基为季也蒙毕赤氏酵母的基础培养基,在其基础上获得优化后的增殖培养基组成为马铃薯20%,果糖2.0%,酵母膏0.8%,MnSO40.1%,烟酰胺0.001%,蒸馏水100ml。菌体增殖率为19.6。3按照拮抗菌抑菌机理的判断树进行分析、排除,得知季也蒙毕赤氏酵母在草莓保鲜中最为显著的抑菌途径是与病原菌空间及营养竞争,碳源是其竞争的营养之一。4对干粉制剂的载体和保护剂进行选择,通过衡量对活菌数的保持情况得出以脱脂奶粉与淀粉1:1的复合保护剂,甘油作为载体制取的季也蒙毕赤氏酵母干粉,细胞存活率的维持效果最好。其保质期在6个月以上。5以草莓腐烂率、失重率、可溶性固形物、总酸、Vc含量为指标比较了季也蒙毕赤氏酵母干粉与传统化学抑菌剂的保鲜效果看出,拮抗菌干粉对比对照组有明显的抑菌性,但在效果上尚不及化学药剂。6为提高拮抗菌干粉的抑菌效果而进行的与化学防腐剂联合施用试验发现,单一使用拮抗菌干粉的草莓组比对照组的腐烂率降低了30%,而与化学防腐剂混合增效后的拮抗干粉制剂的腐烂率比对照组降低了50%,比单一施用化学防腐剂降低了5%。具有良好的开发潜力。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 前言
• 1.1 国内外研究动态
• 1.1.1 草莓常见病害的研究
• 1.1.2 果实采后生物防治研究进展
• 1.1.3 国内外拮抗菌商业应用现状
• 1.2 果蔬采后贮运中拮抗微生物的选用
• 1.2.1 选用拮抗菌的一般原则
• 1.2.2 理想拮抗菌的标准
• 1.3 拮抗菌分离筛选方法
• 1.4 拮抗菌的作用机理
• 1.4.1 分泌抗菌素
• 1.4.2 营养与空间竞争
• 1.4.3 重寄生作用
• 1.4.4 对寄主抗病性的诱导作用
• 1.5 利用拮抗菌控制果蔬采后病害的途径
• 1.5.1 提高果蔬表面已存在的拮抗菌的拮抗菌的拮抗能力
• 1.5.2 直接导入拮抗菌
• 1.5.3 利用拮抗菌分泌的抗生素
• 1.6 提高拮抗菌抑菌效果的措施
• 1.6.1 使用多种拮抗菌混合制剂
• 1.6.2 与化学杀菌剂结合
• 1.6.3 添加特定的营养佐剂
• 1.6.4 与采后涂被措施结合
• 1.6.5 其它物质对接抗效果的影响
• 1.7 拮抗菌在果蔬采后贮运中应用存在的问题及前景
• 1.7.1 亟待解决的问题
• 1.7.2 前景展望
• 2 材料与方法
• 2.1 试验材料
• 2.2 主要仪器设备
• 2.3 试验设计和方法
• 2.3.1 草莓采后病害最佳拮抗菌的活体抑菌试验
• 2.3.2 优化拮抗菌增殖培养基条件试验
• 2.3.3 拮抗菌抑菌机理初探
• 2.3.4 拮抗菌干粉制剂的制备
• 2.3.5 干粉制剂的抑菌性能
• 2.3.6 与化学防腐剂联合施用的In vivo试验
• 3 结果与分析
• 3.1 草莓采后病害最佳拮抗菌的in vivo试验
• 3.2 优化拮抗菌增殖培养基条件试验
• 3.2.1 生长曲线的绘制及基础培养基的选择
• 3.2.2 培养基增殖因子的单因素试验
• 3.2.3 季也蒙毕赤氏酵母培养基优化试验
• 3.2.4 优化培养基效果比较试验
• 3.3 拮抗菌抑菌机理初探
• 3.3.1 In vitro（离体）抑菌试验
• 3.3.2 重寄生现象的探讨
• 3.3.3 拮抗酵母各处理液对抑菌效果的影响
• 3.3.4 改良察氏培养基混菌培养对拮抗酵母抑菌的影响
• 3.4 拮抗菌干粉制剂的制备
• 3.4.1 干粉载体的选择
• 3.4.2 混合载体中的组分比例确定
• 3.4.3 干粉保护剂的选择
• 3.4.4 草莓拮抗菌干粉制剂的品质
• 3.5 拮抗菌干粉在草莓上的活体抑菌效果
• 3.5.1 拮抗菌干粉抑菌效果试验
• 3.5.2 干粉施用对草莓的生理生化影响
• 3.6 干粉与化学防腐剂联合施用试验
• 4 讨论
• 4.1 拮抗菌种类与作用对象的关系
• 4.2 拮抗菌使用浓度与抑菌效能的关系
• 4.3 贮藏温度与拮抗菌抑菌效能的关系
• 4.4 季也蒙毕赤氏酵母抑菌机理的初探
• 4.5 培养液与季也蒙毕赤氏酵母增殖培养的关系
• 4.6 保护剂和载体对季也蒙毕赤氏酵母制剂活性的影响
• 4.7 与化学防腐剂联合施用对季也蒙毕赤氏酵母抑菌效果的影响
• 结论
• 论文创新点
• 下一步工作设想
• 参考文献
• 英文缩写表
• 致谢
• 作者简介