浒苔多糖提取纯化及生物活性研究

论文摘要

浒苔（Enteromorpha Prolifera）是我国资源丰富的野生绿藻,营养丰富,具有食用、药用价值。目前国内对浒苔,包括浒苔多糖的研究还较少。本文以浒苔为原料,研究浒苔多糖提取纯化工艺,对其基础理化性质进行分析,以活性氧去除率为指标对浒苔多糖体外抗氧化活性进行研究,并通过动物试验研究浒苔多糖体内抗氧化及降血脂活性。（1）热水浸提浒苔多糖,通过单因素试验和正交试验得到浒苔多糖最佳提取工艺组合为:提取温度90℃,提取时间3 h,料液比1:40。影响提取率的三个因素中,温度和时间对多糖提取率的影响显著,料液比则影响不显著。（2）测得浒苔粗多糖EP1中主要化学成分含量:多糖33.06%、蛋白质3.23%、硫酸根15.85%。经过三氯乙酸脱蛋白的多糖半纯品EP2蛋白质含量为1.56%,总糖含量为44.21%,脱蛋白率达到51.69%,总糖含量增加33.72%。（3）热水提取浒苔粗多糖,三氯乙酸法脱蛋白后,经过Sephadex G-100凝胶色谱分离,得到分子量较为均一的组分,其中检测出含蛋白质成分,推断检测到的蛋白可能是多糖与蛋白的复合物,有待进一步鉴定。（4）通过研究浒苔粗多糖EP1对活性氧自由基的抑制率,考察体外抗氧化活性。结果显示,EP1对O2?·具有抑制作用,浓度25 mg/mL时达到最大抑制率55.11%,效果弱于VC ;对OH·具有较强的抑制作用,浓度0.30 mg/mL时对OH·的抑制率可达到75.52%,效果与VC相近,且随浓度增加效果继续提升。表明EP1对活性氧自由基有较好的抑制作用,达到抗氧化的目的。（5）以正常喂养小鼠为对照,建立高脂模型,以不同剂量EP1对高脂喂养小鼠灌胃4 w,考察其对小鼠高血脂症预防效果。结果显示,EP1能有效降低高血脂症小鼠血清中TCHO、TG含量,提高HDL-C含量,对LDL-C无显著作用,表明EP1对小鼠高血脂症防治有一定功效;高脂喂养各组小鼠肝脏指数均大于正常喂养小鼠,表明EP1无抑制高脂引起的肝脏肿大的效果。（6）取降血脂试验中正常组、高脂模型组和多糖中剂量组测定抗氧化指标（血清和肝脏的MDA、T-SOD、T-AOC、T-AOC/MDA）,结果显示,EP1能显著抑制血清MDA的生成,提高肝脏T-AOC、T-SOD,血清T-AOC/MDA,对其他指标没有显著影响。表明EP1对减轻脂质过氧化损伤、提高总抗氧化能力、优化体内抗氧化/氧化平衡有一定作用,但效果不全面。本文对浒苔多糖的提取、分离纯化、基础理化性质进行研究,并考察其体外抗氧化、体内抗氧化、降血脂活性,为进一步开展浒苔多糖的研究及在食品、保健食品、医药行业的应用提供基础数据和参考资料。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 绪论
• 1.1 浒苔研究概况
• 1.1.1 浒苔及其多糖化学组成和结构
• 1.1.2 浒苔多糖生理活性
• 1.2 多糖研究概况
• 1.2.1 多糖的来源
• 1.2.2 多糖的提取与分离纯化
• 1.2.3 多糖分析方法
• 1.2.4 多糖生理活性研究
• 1.3 立题的背景和意义
• 1.4 研究内容
• 第二章 浒苔多糖提取工艺研究
• 前言
• 2.1 材料与设备
• 2.1.1 主要材料
• 2.1.2 主要设备
• 2.2 试验方法
• 2.2.1 测定及计算方法
• 2.2.2 浒苔多糖提取工艺流程
• 2.2.3 浒苔多糖提取工艺单因素试验
• 2.2.4 浒苔多糖提取正交试验
• 2.3 结果与分析
• 2.3.1 浒苔多糖提取单因素试验结果
• 2.3.2 浒苔多糖提取工艺参数的优化
• 2.4 讨论
• 本章小结
• 第三章 浒苔多糖纯化及基础理化性质研究
• 前言
• 3.1 材料与设备
• 3.1.1 主要材料
• 3.1.2 主要设备
• 3.2 试验方法
• 3.2.1 浒苔粗多糖主要成分测定
• 3.2.2 浒苔多糖分离纯化工艺流程
• 3.3 结果与分析
• 3.3.1 浒苔粗多糖主要化学组分分析
• 3.3.2 浒苔多糖分离纯化
• 3.3.3 浒苔多糖基础物理性质
• 3.4 讨论
• 本章小结
• 第四章 浒苔多糖体外抗氧化活性研究
• 前言
• 4.1 材料与设备
• 4.1.1 主要材料
• 4.1.2 主要设备
• 4.2 试验方法
• 4.2.1 清除超氧阴离子自由基能力
• 4.2.2 清除羟自由基能力
• 4.3 结果与分析
• 4.3.1 浒苔多糖对超氧阴离子自由基抑制效果
• 4.3.2 浒苔多糖对羟自由基抑制效果
• 4.4 讨论
• 本章小结
• 第五章 浒苔多糖体内抗氧化及降血脂活性研究
• 前言
• 5.1 材料与设备
• 5.1.1 主要材料
• 5.1.2 主要设备
• 5.2 试验方法
• 5.2.1 试验设计
• 5.2.2 检测方法
• 5.3 结果与分析
• 5.3.1 浒苔多糖降血脂效果
• 5.3.2 浒苔多糖体内抗氧化能力
• 5.4 讨论
• 5.4.1 降血脂效果探讨
• 5.4.2 抗氧化活性探讨
• 本章小结
• 全文总结
• 参考文献
• 致谢