大豆多肽的酶解及脱色与分离工艺的研究

论文摘要

大豆肽是大豆蛋白水解后形成的一定分子量范围的多肽混合物,与大豆蛋白质相比,往往具有更良好的理化性质,在食品、医药、化妆品等领域有着广泛的开发和应用前景。本论文以豆粕为实验原料,采用先固态发酵后酶解的方法制得大豆多肽。研究了固态发酵用微生物菌种所产蛋白酶的酶活性,确定微生物所产蛋白酶的酶活最佳温度为50℃,pH 7.2;选取已有最优化条件对豆粕进行固态发酵,并进行大豆多肽酶解提取工艺优化,通过正交实验确定豆粕酶解最适温度为50℃,料水比（以干基计）1:6,水解时间11h,大豆多肽蛋白得率可达69.6%（w/w）。凝胶层析图谱表明大豆多肽酶解液分子量主要分布在1000 D-6000 D,占总蛋白含量的87.61%。大豆多肽酶解液采用活性炭吸附法脱色,最佳脱色条件为:活性炭添加量为2%,温度50℃,pH5,脱色3 h,脱色率达75.2%。进一步用膜法对大豆多肽酶解液进行分离,确定了膜分离系统的组成,膜分离的工艺流程和操作过程中的主要参数。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 1 绪论
• 1.1 肽的概述
• 1.1.1 生物活性肽的概念
• 1.1.2 大豆多肽的概念
• 1.2 大豆多肽的基本特性
• 1.2.1 大豆多肽的营养特性
• 1.2.2 大豆多肽的加工特性
• 1.2.3 大豆多肽的生物活性
• 1.2.3.1 降低血压作用
• 1.2.3.2 降血脂和胆固醇作用
• 1.2.3.3 促进脂肪代谢的作用
• 1.2.3.4 抗氧化功能
• 1.2.3.5 调节血糖浓度
• 1.2.3.6 低过敏性
• 1.2.3.7 促进矿物质吸收作用
• 1.2.3.8 增强运动员体能的作用
• 1.2.3.9 促进发酵的作用
• 1.2.3.10 抗癌作用
• 1.3 大豆多肽的生产制备
• 1.3.1 酶水解法制备大豆多肽
• 1.3.2 发酵法生产大豆多肽
• 1.4 大豆多肽的精制
• 1.4.1 大豆多肽的脱色
• 1.4.2 大豆多肽的脱苦
• 1.5 大豆多肽类生物活性肽的分离纯化
• 1.5.1 分离纯化方法
• 1.5.2 膜分离纯化
• 1.6 课题研究的目的和意义
• 2 试验材料和方法
• 2.1 试验材料
• 2.1.1 试验材料与主要试剂
• 2.1.2 培养基
• 2.1.3 试验仪器设备
• 2.2 检测方法
• 2.2.1 微生物产蛋白酶酶活测定
• 2.2.2 蛋白质含量测定
• 2.2.3 水解度（DH）的测定
• 2.3 试验方法
• 2.3.1 微生物菌株生长曲线测定
• 2.3.2 微生物菌种产中性蛋白酶酶活性研究
• 2.3.3 豆粕固态发酵
• 2.3.4 酶解工艺条件的研究
• 2.3.5 大豆多肽酶解液得率
• 2.3.6 大豆多肽酶解液分子量分布分析
• 2.3.7 大豆多肽酶解液的脱色
• 2.3.7.1 色素最大吸收波长的测定
• 2.3.7.2 脱色率测定方法
• 2.3.7.3 肽氮损失率测定方法
• 2.3.7.4 不同脱色剂对脱色效果的影响
• 2.3.7.5 活性炭的用量对脱色效果的影响
• 2.3.7.6 不同温度对脱色效果的影响
• 2.3.7.7 pH对脱色效果的影响
• 2.3.7.8 时间对脱色效果的影响
• 2.3.7.9 正交试验设计及分析
• 2.3.8 大豆多肽酶解液分离工艺的研究
• 2.3.8.1 大豆多肽酶解液膜分离设备选型
• 2.3.8.2 大豆多肽酶解液膜分离工艺流程
• 2.3.8.3 膜分离工艺流程稳定性实验
• 2.3.8.4 膜设备评价
• 2.3.8.5 膜分离设备清洗维护
• 2.3.8.6 工艺流程中参数影响
• 3 结果和分析
• 3.1 微生物菌株的生长曲线
• 3.2 微生物产中性蛋白酶活性研究
• 3.2.1 pH对酶活的影响
• 3.2.2 温度对酶活的影响
• 3.2.3 微生物蛋白酶酶活最优条件的确定
• 3.3 酶解工艺条件的研究
• 3.3.1 温度（T）对酶解反应的影响
• 3.3.2 底物浓度（[S]）对水解反应的影响
• 3.3.3 水解时间对产物的影响
• 3.3.4 酶解作用条件的确定
• 3.4 大豆多肽酶解液得率
• 3.5 大豆多肽酶解液分子量分布分析
• 3.6 大豆多肽的脱色
• 3.6.1 色素最大吸收波长
• 3.6.2 不同脱色剂对脱色效果的影响
• 3.6.3 活性炭的不同用量对脱色效果的影响
• 3.6.4 作用温度对脱色效果的影响
• 3.6.5 溶液的pH值对脱色效果的影响
• 3.6.6 吸附时间对脱色效果的影响
• 3.6.7 正交试验设计及分析结果
• 3.7 大豆多肽的膜分离
• 3.7.1 大豆多肽的膜分离工艺流程
• 3.7.2 大豆多肽的膜分离设备选型
• 3.7.3 膜分离工艺流程稳定性实验
• 3.7.4 膜设备评价
• 3.7.5 膜分离设备清洗维护
• 3.7.6 工艺流程中参数影响及控制
• 4 结论
• 5 讨论
• 5.1 本研究的应用前景
• 5.2 关于产物的检测
• 5.3 关于大豆多肽的分离
• 参考文献
• 致谢