喹胺醇对大鼠肝细胞色素P450酶系的影响

论文摘要

喹胺醇是中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所研制的一种新型抗菌促生长药物，是喹噁啉-1，4-二氧化物不同侧链的取代衍生物，属结构创新类药物，抗菌促生长作用明显，毒性和残留均低于喹乙醇，可发展为喹乙醇的良好替代品。细胞色素P450（CYP450）是机体药物代谢的关键酶，在药物生物转化中起着重要作用。本实验旨在分析喹胺醇对肝CYP450同工酶活性及其基因表达的影响，为阐述喹胺醇药理学作用机制和安全使用喹胺醇提供科学依据，并为兽医药理毒理学研究提供新思路。本实验选用体重180±30g健康Wistar大鼠，随机分为五组，分别为高剂量组（Ⅰ）、较高剂量组（Ⅱ）、中剂量组（Ⅲ）、低剂量组（Ⅳ）和空白对照组（C）。将纯度为99.97％的喹胺醇原料药用2％的吐温-80助溶，用蒸馏水配制成混悬液。每天分别灌胃给与大鼠400、200、100、50mg／kg·体重喹胺醇，生理盐水给对照，连续用药7d。制作肝微粒体，用酶学法测定其蛋白、细胞色素P450、细胞色素b5（Cyt b5）含量和CYP450同工酶氨基比林-N-去甲基酶（APND）、红霉素-N-去甲基酶（ERND）、7-乙氧基香豆素-O-脱甲基酶（EROD）以及谷胱甘肽-S-转移酶（GST）的活性；提取大鼠肝mRNA，用RT-PCR技术分析喹胺醇对肝CYP450亚型CYP1A1、CYP2E1和CYP3A1 mRNA表达水平的影响。结果：与对照组相比，大鼠肝微粒体蛋白含量随给药剂量升高而升高；雄性大鼠肝CYP450含量在大于100mg／kg．体重剂量组时显著降低（P＜0.05），雌性大鼠CYP450含餐则在小于100mg／kg·体重剂量组时显著升高，均随给药剂量升高而呈降低趋势；雄鼠Cyt b5含量在大于100mg／kg·体重剂量组时极显著升高（P＜0.01），雌鼠虽升高，但变化不明显；CYP450同工酶APND和ERND活性在200、400mg／kg·体重剂量组均极显著降低（P＜0.01），而EROD活性给药组极显著高于对照组（P＜0.01），并均与给药剂量呈负相关；肝微粒体GST活性在50、100 mg／kg·体重剂量组升高，200、400mg／kg·体重剂量组降低；CYP450酶的变化有性别差异。与对照组相比，雄性大鼠200、400mg／kg·体重剂量组肝CYP2E1、CYP3A1 mRNA表达量极显著降低（P＜0.01）；400mg／kg·体重剂量组CYP1A1 mRNA表达量显著降低（P＜0.05），其它药物剂量组基因亚型mRNA表达量均降低，但无明显统计学差异。结论：高剂量喹胺醇对大鼠肝微粒体酶含量和同工酶活性及肝CYP450亚型CYP1A1、CYP2E1和CYP3A1可能有抑制作用，低剂量喹胺醇对CYP450的作用不明显；喹胺醇对大鼠CYP450的作用存在性别差异；临床上按中、低剂量使用喹胺醇，不会因为CYP450酶的变化而导致不良后果和潜在毒性作用。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 文献综述
• 综述一 喹噁啉-1,4-二氧化物类抗菌促生长药物研究进展
• 综述二 细胞色素P450与兽药的研发应用
• 第二章 引言
• 第三章 喹胺醇对大鼠肝细胞色素P450酶活性的影响
• 3.1 材料与方法
• 3.1.1 材料
• 3.1.2 方法
• 3.2 结果
• 3.3 讨论
• 第四章 喹胺醇对大鼠肝细胞色素P450酶亚型mRNA表达的影响
• 4.1 材料与方法
• 4.1.1 材料
• 4.1.2 方法
• 4.2 结果
• 4.3 讨论
• 第五章 结论
• 参考文献
• 附录 缩略词汇表
• 致谢
• 发表论文及参与课题