棉籽粕中棉酚提取及固态发酵产生棉籽肽的研究

论文摘要

本研究主要针对增加棉粕的利用价值，综合开发棉粕的衍生产品。首先采用传统苯胺工艺及新型乙醚提取技术从棉粕中提取棉酚，将精制后的醋酸棉酚用现代波谱和光谱仪器对其进行结构表征，比对提取结果，并进一步研究了醋酸棉酚得抗氧化及对细胞增殖抑制活性的影响。之后收集提取棉酚后的棉粕，进行黑曲霉AS3.350固态发酵，生产棉籽肽，并对其各项指标进行测定，确定最佳发酵工艺条件，为工业化生产提供理论依据。主要结果如下：（1）提取精制醋酸棉酚，苯胺法提取纯度为99.2%、提取率为63.4%，乙醚索氏提取法提取纯度为96.7%、提取率为57.5%。（2）醋酸棉酚保存条件为避光、低温、乙醚浸泡。（3）醋酸棉酚对人T淋巴瘤细胞系细胞（Hut-102）有一定的抑制作用，其半数抑制浓度为4.04μmol/L，且抑制效果随时间的延长逐渐增加。（4）黑曲霉在察氏培养基中生长16h时，菌体进入生长旺盛阶段，适于接种固态发酵基质。（5）黑曲霉固态发酵最优发酵条件为：棉粕含量90%，PH5.9，温度31℃，发酵时间96h；此时肽转化率为67.5%、蛋白酶酶活475U/g。

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ABSTRACT

第1章绪论

1.1 棉籽饼粕简介

1.1.1 棉籽饼粕的生产及加工概况

1.1.2 棉籽饼粕的营养价值

1.1.3 棉籽粕的抗营养因子

1.2 棉酚的提取方法及应用概况

1.2.1 棉酚的提取方法

1.2.1.1 苯胺沉淀法

1.2.1.2 碱液提取法

1.2.1.3 色腺体浮选法

1.2.1.4 丙酮水稀释法

1.2.2 棉酚的应用

1.2.2.1 抗生育作用

1.2.2.2 抗肿瘤作用

1.2.2.3 抗病毒作用

1.2.2.4 棉酚在工业上的应用

1.2.2.5 棉酚在农业上的应用

1.3 固态发酵技术及棉籽肽研究概况

1.3.1 固态发酵技术简介

1.3.2 棉籽肽研究概述

1.3.2.1 小肽的营养作用

1.3.2.2 小肽的生理活性作用

1.4 立题依据及研究内容

1.4.1 立题依据

1.4.2 研究内容

第2章醋酸棉酚的制备

2.1 引言

2.2 材料与方法

2.2.1 材料与试剂

2.2.2 主要仪器与设备

2.2.3 苯胺法制备醋酸棉酚

2.2.3.1 制备原理

2.2.3.2 试验操作步骤

2.2.4 乙醚索氏提取制备醋酸棉酚

2.2.4.1 制备原理

2.2.4.2 试验操作步骤

2.2.5 醋酸棉酚分析

2.3 结果与讨论

2.3.1 产量及纯度比较

2.3.2 红外光谱扫描

2.3.3 核磁共振扫描

2.4 小结

第3章棉酚抗氧化及细胞增殖抑制研究

3.1 引言

3.2 材料与方法

3.2.1 药品及试剂

3.2.2 主要仪器与设备

3.2.3 溶液配制

3.2.4 醋酸棉酚抗氧化试验

3.2.5 醋酸棉酚细胞增殖抑制试验

3.3 结果与分析

3.3.1 醋酸棉酚抗氧化试验

3.3.2 醋酸棉酚的细胞增殖抑制研究

3.3.2.1 醋酸棉酚浓度对细胞增殖抑制的影响

3.3.2.2 醋酸棉酚作用时间对细胞增殖抑制的影响

3.4 小结

第4章黑曲霉生长曲线测定

4.1 引言

4.2 材料与方法

4.2.1 原料

4.2.2 主要仪器与设备

4.2.3 生长曲线材料准备及配置

4.2.4 试验方法

4.3 结果与分析

4.4 小结

第5章黑曲霉发酵棉粕制备棉籽肽的研究

5.1 引言

5.2 材料与方法

5.2.1 原料

5.2.2 主要仪器设备

5.2.3 试剂配制

5.2.4 实验方法

5.2.4.1 固态发酵工艺流程

5.2.4.2 还原糖及总糖的测定

5.2.4.3 蛋白酶酶活的测定

5.2.4.4 肽转化率的测定

5.2.4.5 pH 值的测定

5.3 结果与分析

5.3.1 固态发酵过程动态变化

5.3.1.1 总糖、还原糖

5.3.1.2 蛋白酶酶活

5.3.1.3 肽转化率

5.3.1.4 PH 值

5.3.2 单因素试验

5.3.2.1 棉粕含量、温度、PH 值对蛋白酶酶活的影响

5.3.2.2 棉粕含量、温度、PH 值对肽转化率的影响

5.3.2.3 棉粕含量、温度、PH 值对还原糖的影响

5.3.2.4 棉粕含量、温度、PH 值对总糖的影响

5.4 小结

第6章发酵棉粕饲喂效果的研究

6.1 引言

6.2 材料与方法

6.3 结果与分析

6.4 小结

结论

参考文献

致谢

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