肾阳虚证和肾阴虚证血浆蛋白表达谱的比较研究

肾阳虚证和肾阴虚证血浆蛋白表达谱的比较研究

论文摘要

目的:中医“证”是疾病发生过程中不同阶段病因病机的高度概括,既然同一证有共同的临床表现和病理机制,那么其肯定有共同的物质基础,而这种物质基础很有可能反应在基因或蛋白水平上。肾所藏之精禀受于父母,是构成胚胎发育的原始物质,其与现代医学描述的遗传物质(DNA)具有一定的同一性。而基因又要在表达相应蛋白质的情况下才能影响生物的功能。蛋白组学是研究在生命体或细胞的整体水平研究蛋白质的表达和修饰状态,以及蛋白质与蛋白质的相互作用,从而确定人体的功能蛋白并阐明其在细胞中的功能与相互关系,揭示生命活动的本质。肾阴虚证和肾阳虚证是中医学的基本证候,历代医家对肾阴虚证和肾阳虚证的理论与防治研究都颇为重视。肾阴虚证和肾阳虚证作为疾病的某一阶段的主要矛盾,必然受到“病”这一基本矛盾的影响。正是由于不同疾病的特异性,决定了不同疾病相同证侯之间的差异;而同一疾病不同中医证侯之间也存在差异。只有通过对这些差异的研究,进而归纳出证的一般规律,才有可能对肾阴虚证和肾阳虚证有更全面的解析。因此,“病证结合”是研究肾阴虚证和肾阳虚证差异蛋白表达的重要思路。本研究采取“病证结合”的方法,以IgA肾病和亚健康状态的肾阴虚证和肾阳虚证为研究对象,对其各种细胞因子靶蛋白进行抗体芯片表达谱的比较研究,筛选肾阴虚证、肾阳虚证相关蛋白的改变,通过细胞信号转导等方面的研究,结合前期试验结果,寻找主要的细胞因子改变,为确定中医肾虚证证候客观化指标提供依据。方法:1、采用“病证结合”的方法,选取确诊为IgA肾病和亚健康状态的肾阴虚证和肾阳虚证患者,作为实验组;选择健康志愿者作为正常对照组。2、收集样本,制备样品,运用生物素直接标记技术,检测出多种细胞因子的表达水平,研究肾阴虚证和肾阳虚证的细胞因子改变。结果:1、肾阴虚证组与正常对照组比较,获得差异表达蛋白共25条,其中表达水平上调的有2条(BMP5、TIMP4),表达水平下调的有23条(OSM、CXCR4、GCG、CXCR1、CTLA-4、Siglec-9、CCR7、IL-17A、IL-17F、TRADD、IGFBP-6、THBS2、IL-4R、HGFR、IL-RA、Osteoactivine、MMP10、M-CSF R、G-CSF R、CNTF、IL-17C、TGFβ、FGF23)。这些差异表达的蛋白按功能分析进行大体分类,主要涉及到免疫失调、新陈代谢、蛋白质生物合成、氧化应激、损伤修复、细胞凋亡、细胞信号传导有关等方面。肾阴虚证差异表达蛋白的异常变化,与中医肾阴虚证所表现的五心烦热、潮热盗汗、腰膝酸软、头晕目眩、易感外邪、精神萎靡、反应迟钝等症状相符。2、肾阳虚证组与正常对照组比较,获得差异表达蛋白共14条(Csk、BMP5、Frizzled1、Frizzled4、BDNF、CXCR3、LBP、LTBP1、IL-27RA、M-CSF、L-13RαⅡ、PECAM-1、Activin RⅡA、FGF R5),表达水平均上调。主要涉及到免疫应答、新陈代谢、细胞凋亡、细胞黏附、损伤修复、氧化应激、生殖能力等方面。肾阳虚证差异表达蛋白的异常变化,与中医肾阳虚证所表现的腰膝酸软、发脱齿松、耳鸣耳聋、反应迟钝、手足发冷、性欲减退,男子阳痿早泄,女子宫寒不孕等症状相符。3、肾阳虚证与肾阴虚证比较,共获得差异表达蛋白1条(BMP5),表达水平上调。主要涉及细胞凋亡、骨的合成等方面。中医认为,肾藏精,主人体的生长、发育和生殖,在体合骨,生髓。此共同蛋白的改变与中医理论相符。4、中医认为:肾藏精,主人体的生长、发育和生殖,肾主水,主纳气,在体合骨,生髓。肾精气盛衰是机体生、长、壮、老、已的基石,同时又是人体全身阴阳的根本。通过比较分析,我们发现肾阴虚证与肾阳虚证存在明显的靶蛋白改变,主要涉及到免疫失调、新陈代谢、细胞周期、骨骼发育、DNA修复、蛋白质的合成、生殖能力、神经营养、造血功能等方面的功能,与中医基本理论相符。结论:1、肾阴虚证与肾阳虚证差异表达蛋白存在明显不同,提示肾阴虚证与肾阳虚证有着各自不同的蛋白表达谱,这是符合中医理论的。同时,肾阴虚证与肾阳虚证差异表达蛋白可以为肾阴虚证和肾阳虚证的中医辨证分型提供科学依据。2、肾阴虚证与肾阳虚证存在共同的差异表达蛋白,这表明肾阴虚证与肾阳虚证都存在肾虚的现象,这不但为研究中医证侯本质提供科学的思路与方法,也为探讨肾阴虚证和肾阳虚证在蛋白水平的发生机制奠定基础。3、蛋白芯片是研究中医证候相关蛋白的比较理想的一种技术方法。从蛋白组学的角度探讨肾阴虚证与肾阳虚证,有利于揭示肾的本质。

论文目录

  • 摘要
  • ABSTRACT
  • 前言
  • 第一章 研究背景与研究设想
  • 第一节 古代中医与现代研究对肾虚证的认识
  • 1 肾藏象理论的现代研究
  • 2 现代医学对肾虚证的认识
  • 3 肾虚证与蛋白组学
  • 第二节 本研究的设想
  • 第二章 肾阴虚证血浆蛋白质表达谱的比较研究
  • 第一节 研究对象和研究方法
  • 1 材料和方法
  • 2 研究对象
  • 3 统计分析
  • 第二节 资料分析
  • 1 研究对象的临床资料
  • 2 芯片扫描分析结果
  • 3 讨论
  • 第三章 肾阳虚证血浆蛋白质表达谱的比较研究
  • 第一节 研究对象和研究方法
  • 1 材料和方法
  • 2 研究对象
  • 3 统计分析
  • 第二节 资料分析
  • 1 研究对象的临床资料
  • 2 芯片扫描分析结果
  • 3 讨论
  • 第四章 肾阴虚证和肾阳虚证共同改变蛋白
  • 全文小结
  • 研究不足与研究展望
  • 参考文献
  • 附录
  • 附录1 RayBio(?) Biotin Label-based Human Antibody List
  • 附录2 中医证候调查表
  • 攻读学位期间发表论文
  • 致谢
  • 统计学证明
  • 相关论文文献

    • [1].家畜免疫球蛋白表达谱研究进展[J]. 家畜生态学报 2016(05)
    • [2].苯并(a)芘作用下人支气管上皮细胞蛋白表达谱的改变[J]. 环境与职业医学 2009(02)
    • [3].十字花科黑腐病菌分泌蛋白表达谱分析[J]. 基因组学与应用生物学 2014(02)
    • [4].硒代甲硫氨酸对胃癌细胞蛋白表达谱的影响[J]. 世界华人消化杂志 2010(16)
    • [5].肉种鸡饲养方式对子代胚肝蛋白表达谱的影响[J]. 畜牧兽医学报 2009(06)
    • [6].牛皮蝇幼虫蛋白表达谱及一种高表达蛋白的分离纯化[J]. 动物医学进展 2015(03)
    • [7].胃癌术前适形放疗的蛋白表达谱变化及意义[J]. 中国病理生理杂志 2011(02)
    • [8].人胰液蛋白2D图谱的建立[J]. 山东大学学报(医学版) 2008(11)
    • [9].缺陷型/非缺陷型精神分裂症患者血清蛋白表达谱的比较研究[J]. 国际检验医学杂志 2015(15)
    • [10].甲硫氨酸限制对胃癌细胞蛋白表达谱的影响[J]. 肿瘤防治研究 2010(03)
    • [11].RASSF1A基因对胃癌SGC7901细胞蛋白表达谱的影响[J]. 中国普通外科杂志 2010(10)
    • [12].肌层浸润性膀胱癌的间质蛋白表达谱研究[J]. 中国现代医学杂志 2012(05)
    • [13].氯化两面针碱对肝癌细胞蛋白表达谱的影响研究[J]. 内科 2018(06)
    • [14].应用液体蛋白芯片飞行时间质谱系统研究卵巢癌的血清蛋白表达谱[J]. 现代妇产科进展 2008(02)
    • [15].高效液相色谱法及SDS-PAGE分析紫外线照射致白内障大鼠晶状体相关蛋白表达谱的变化[J]. 眼科新进展 2013(01)
    • [16].基于蛋白芯片技术研究参苈加颗粒对慢性心衰大鼠心肌活性蛋白表达谱的影响[J]. 中华中医药杂志 2017(03)
    • [17].应用液体蛋白芯片筛查糖尿病性视网膜病变的血清蛋白标志物[J]. 中国现代医学杂志 2015(04)
    • [18].幼鼠颞叶癫痫模型匹罗卡品致痫后潜伏期末海马的形态学以及蛋白表达谱变化[J]. 中南大学学报(医学版) 2013(06)
    • [19].石斛合剂序贯法治疗糖尿病大鼠的基因和蛋白表达谱之糖代谢研究[J]. 中华中医药学刊 2014(12)
    • [20].转Cry1ab/ac基因水稻与相应非转基因水稻种子的蛋白表达谱和营养组分分析[J]. 农业生物技术学报 2013(12)
    • [21].不同精粗比日粮对泌乳山羊肝脏蛋白表达谱及物质代谢的影响[J]. 畜牧与兽医 2012(S1)
    • [22].辐射致癌相关蛋白质筛选及其表达研究[J]. 生物物理学报 2009(S1)
    • [23].双向凝胶电泳技术在食管癌差异蛋白表达检测中的应用[J]. 福建医药杂志 2014(06)
    • [24].早期胃癌患者外周血清差异蛋白表达谱的建立及其生物学分析[J]. 现代生物医学进展 2015(16)
    • [25].肾癌患者血清差异蛋白的初步实验研究[J]. 重庆医科大学学报 2014(06)
    • [26].铬胁迫对西红花叶片蛋白表达谱的影响[J]. 浙江大学学报(理学版) 2016(06)
    • [27].应用液体蛋白芯片飞行时间质谱技术研究21-三体综合征胎儿羊水蛋白表达谱[J]. 现代妇产科进展 2010(11)
    • [28].红芪多糖对脑微血管内皮细胞氧化损伤保护作用的差异蛋白质研究[J]. 中药药理与临床 2016(02)
    • [29].氢醌对人骨髓间充质干细胞蛋白质表达谱的影响[J]. 环境与职业医学 2009(05)
    • [30].胰腺癌血清差异蛋白表达谱[J]. 基础医学与临床 2012(04)

    标签:;  ;  ;  

    肾阳虚证和肾阴虚证血浆蛋白表达谱的比较研究
    下载Doc文档

    猜你喜欢