三种植物的组织培养及生根过程中酶活性的变化

论文摘要

本论文以紫叶挪威槭、一品红、萱草为材料,进行组织培养,建立再生体系。研究了植物生长调节剂DPC和复合VB对一品红试管苗生长、芽增殖及生根的影响。研究了三种植物生根过程中IAAO、POD活性的变化及POD同功酶酶谱的变化。研究结果如下:1.紫叶挪威槭最佳芽增殖培养基为MS+BA1.5mg/L （单位下同）+ZT0.1+NAA0.1+GA0.5+CH300,芽增殖率为4.35;最佳生根培养基为MS+ NAA0.1+IBA0.5+PG40,生根率为72.4%。一品红最佳芽增殖培养基为MS+ BA1.0+IBA0.1,增值率为7.87;最佳生根培养基为1/2MS+IBA1.0,生根率为82.6%。萱草最佳分化培养基为MS+BA1.0+KT1.0+IBA0.5,分化率为93.3%;最佳生根培养基为1/2MS+IBA0.5,生根率为100%。2.培养基中DPC浓度为5mg/L时,利于芽的增殖;浓度为10mg/L时,试管苗生长健壮;浓度为30mg/L时,矮化作用明显。复合VB浓度为0.5～1.0mg/L时,苗高显著增加;浓度为0.2～0.5mg/L时,促进根的分化,提高生根数量。3.萱草和一品红IAAO、POD活性变化趋势有相似之处,IAAO活性先升高再降低,之后回升;POD活性则先降低后升高,之后略有下降。紫叶挪威槭生根诱导初期IAAO、POD活性大体都呈缓慢上升趋势,后期活性降低。当IAAO和POD在各自的动态曲线中处于相对低水平时有利于生根。紫叶挪威槭IAAO、POD起始活性较高,推测试管苗生根培养起始时期酶活性的差异可能也是造成不同植物生根难易的一个影响因素。生根过程中POD同功酶酶谱发生变化。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 文献综述
• 1.1 植物组织培养介绍
• 1.2 三种植物研究进展
• 1.2.1 紫叶挪威槭研究进展
• 1.2.2 一品红研究进展
• 1.2.3 萱草研究进展
• 1.3 植物生长调节剂的应用
• 1.4 离体试管苗生根机理的研究进展
• 1.4.1 基因表达与不定根发生
• 1.4.2 内源激素水平与不定根发生
• 1.4.3 酶的活性变化与不定根发生
• 1.4.4 多胺水平与不定根发生
• 1.4.5 外植体类型与不定根发生
• 1.4.5.1 基因型
• 1.4.5.2 试管苗的继代次数
• 1.4.6 培养基成分与不定根发生
• 1.4.6.1 无机盐类
• 1.4.6.2 生长调节物质
• 1.4.6.3 PH 值
• 1.4.7 其他成分
• 1.4.7.1 糖
• 1.4.7.2 琼脂
• 1.4.7.3 活性炭（AC）
• 1.4.7.4 酚类物质
• 1.4.8 培养条件与不定根发生
• 1.4.8.1 光照
• 1.4.8.2 温度
• 1.4.8.3 湿度
• 1.4.8.4 通气
• 1.5 本论文目的与意义
• 第二章 三种植物组织培养与快速繁殖的研究
• 2.1 紫叶挪威槭再生体系的建立
• 2.1.1 材料与方法
• 2.1.2 结果与分析
• 2.1.2.1 基本培养基的确定
• 2.1.2.2 不同外源激素配比对休眠芽诱导的影响
• 2.1.2.3 不同外源激素配比对芽增殖的影响
• 2.1.2.4 不同外源激素配比对继代的影响
• 2.1.2.5 试管苗的生根培养及移栽
• 2.2 一品红再生体系的建立
• 2.2.1 材料与方法
• 2.2.2 结果与分析
• 2.2.2.1 芽的诱导与增殖
• 2.2.2.2 继代培养
• 2.2.2.3 根的诱导与幼苗移栽
• 2.3 萱草再生体系的建立
• 2.3.1 材料与方法
• 2.3.2 结果与分析
• 2.3.2.1 最佳外植体的选择
• 2.3.2.2 花茎不同部位对愈伤组织诱导的影响
• 2.3.2.3 不同激素浓度配比对愈伤组织诱导及分化的影响
• 2.3.2.4 生根培养与移栽成活
• 第三章 植物生长调节剂对一品红试管苗生长发育的影响
• 3.1 材料与方法
• 3.2 结果与分析
• 3.2.1 DPC 和复合VB 对一品红生长的影响
• 3.2.2 DPC 和复合VB 对一品红芽增殖的影响
• 3.2.3 DPC 和复合VB 对一品红生根的影响
• 3.3 讨论
• 3.4 小结
• 第四章 植物离体培养生根过程中相关酶活性的变化
• 4.1 材料与方法
• 4.1.1 植物材料
• 4.1.2 培养及取样方法
• 4.1.3 吲哚乙酸氧化酶（IAAO）活性测定
• 4.1.3.1 试剂与仪器
• 4.1.3.2 制作IAA 标准曲线
• 4.1.3.3 样品的制备
• 4.1.3.4 酶促反应
• 4.1.3.5 IAAO 活性的测定与计算
• 4.1.4 过氧化物酶（POD）活性的测定
• 4.1.4.1 试剂与仪器
• 4.1.4.2 样品的制备
• 4.1.4.3 POD 活性的测定与计算
• 4.1.5 POD 同工酶凝胶电泳
• 4.1.5.1 试剂与仪器
• 4.1.5.2 酶的提取
• 4.1.5.3 聚丙烯酰胺凝胶电泳
• 4.2 结果与分析
• 4.2.1 吲哚乙酸氧化酶（IAAO）的活性变化
• 4.2.2 过氧化物酶（POD）的活性变化
• 4.2.3 POD 同工酶酶谱分析
• 4.3 讨论
• 4.3.1 吲哚乙酸氧化酶（IAAO）对生根的调控
• 4.3.2 过氧化物酶（POD）对生根的调控
• 4.4 结论
• 参考文献
• 致谢