错配修复基因hMLH1、hMSH2与p53在散发性大肠癌中的表达

论文摘要

目的:错配修复基因（mismatch repair gene, MMR）是一组高度保守的看家基因,其主要功能是纠正复制和重组中的碱基配对错误及因基因损伤所致的碱基配对错误、碱基插入、缺失等损伤,对DNA复制的忠实性和基因组的稳定性起着重要的作用。错配修复基因的突变与遗传性非息肉性大肠癌（hereditary non-polyposis colorectal cancer, HNPCC）的发生密切相关,但其在散发性大肠癌中的突变情况及作用机制仍不清楚,而且与癌基因、抑癌基因突变导致的染色体不稳定性之间的关系目前存在一定争议。本研究通过应用免疫组化方法检测错配修复基因hMSH2、hMLH1和抑癌基因p53蛋白的表达,来分析散发性大肠癌中错配修复基因蛋白异常表达的意义并探讨错配修复系统功能与染色体不稳定性之间的关系。方法:诊断明确的大肠癌手术切除标本165例,肠镜下切除腺瘤型息肉32例,取正常大肠粘膜37例作为对照,用免疫组化方法检测hMLH1、hMSH2和p53蛋白在大肠癌和大肠腺瘤组织中的表达,并分析大肠癌和大肠腺瘤组织中hMLH1、hMSH2蛋白异常表达与P53蛋白表达的关系;同时分析三种基因的蛋白表达与患者性别、年龄、肿瘤发生部位、分化程度、浸润深度及淋巴结转移等临床特征的关系。所有数据均应用SPSS13.0统计软件分析。结果:1.hMLH1、hMSH2的蛋白表达情况:hMLH1和hMSH2蛋白在正常大肠粘膜、大肠腺瘤和大肠癌组织中表达的阳性率分别为100%、84.4%、81.2%和100%、87.5%、87.3%;呈逐渐降低趋势,在腺瘤和肠癌组中的表达明显低于正常肠粘膜（P<0.05）,但在该两组间无显著性差异（P>0.05）。2.hMLH1、hMSH2的蛋白表达与临床病理特征之间的关系（1）散发性大肠癌中,hMLH1和hMSH2在低年龄组（≤50岁）、中间组（51-69岁）与高年龄组（≥70岁）中的阳性表达率分别为68.8%、82.4%、87.5%和75.0%、85.9%、97.9%;hMLH1和hMSH2的蛋白表达在低年龄组中均明显降低,与高年龄组存在显著性差异（P<0.05）。hMLH1在男性患者中的阳性率78.1%明显低于女性患者中的阳性率85.5%（P<0.05）;hMSH2的阳性表达率分别为85.4%和89.9%,男性患者中阳性率也略低于女性患者,但统计学未见显著性差异（P>0.05）。而hMLH1和hMSH2的蛋白表达与患者的肿瘤部位、浸润深度、淋巴结转移和Ducks分期无关（P>0.05）。在高中分化腺癌、低分化腺癌、粘液腺癌中, hMLH1的阳性率分别为84.5%、64.7%、50%,呈逐渐降低趋势,其在高中分化腺癌中的表达明显高于低分化腺癌和粘液腺癌（P<0.05）,但低分化腺癌和粘液腺癌间无显著性差异（P>0.05）;hMSH2在三组中的阳性率分别为90.8%、70.6%、50%,也呈逐渐降低趋势,其在高中分化腺癌中的表达也明显高于低分化腺癌和粘液腺癌（P<0.05）,但在低分化腺癌和粘液腺癌间无显著性差异（P>0.05）。（2）大肠腺瘤中,hMLH1和hMSH2在低年龄组（≤50岁）、中年龄组（51-69岁）和高年龄组（≥70岁）中的阳性表达率分别为66.7%、83.3%、92.9%和50.0%、91.7%、100%,hMLH1和hMSH2的阳性率在低年龄组中明显降低,与高年龄组间存在显著性差异（P<0.05）。hMLH1在轻中度不典型增生中的阳性率为88.9%高于重度不典型增生中的60%,但统计学未见显著性差异（P>0.05） ,hMSH2在两组中的阳性率分别为92.6%和60%,存在显著性差异（P<0.05）。hMLH1和hMSH2的蛋白表达与患者性别、肿瘤部位无关（P>0.05）。3.p53的蛋白表达情况及其与临床病理特征之间的关系（1）p53在正常大肠粘膜、大肠腺瘤和大肠癌组织中的阳性表达率分别为0%、21.9%和48.5%,呈逐渐上升趋势,且各组间存在显著性差异（P<0.05）。（2）肠癌组中,p53在高中分化腺癌组、低分化腺癌和粘液腺癌组中的阳性率分别为53.5%、17.6%、16.7%,在高中分化腺癌组中的阳性率均明显高于低分化腺癌和粘液腺癌组,存在显著差异（P<0.05）,但在低分化腺癌和粘液腺癌组间无显著性差异（P>0.05）;未达浆膜层的肿瘤和达到浆膜层的肿瘤中阳性率均分别为72.7%和36.4%,未达浆膜层肿瘤的阳性率明显高于达到浆膜层肿瘤（P<0.05）;其蛋白表达与患者的年龄、性别、肿瘤部位、淋巴结转移和Ducks分期无关（P>0.05）。（3）腺瘤组中,p53蛋白的阳性表达率在轻中度不典型增生腺瘤和重度不典型增生腺瘤中分别为18.5%和40%,重度不典型增生中的阳性率高于轻中度不典型增生,但统计学无显著性差异（P>0.05）;其蛋白表达与患者年龄、性别、肿瘤部位无关（P>0.05）。4.hMLH1、hMSH2与p53的蛋白表达的相关性在散发性大肠癌和大肠腺瘤组中,hMLH1、hMSH2与p53的蛋白表达均未见明显相关性（P>0.05）。结论:1.在散发性大肠癌中,hMLH1、hMSH2的蛋白表达减少,提示二者可能与散发性大肠癌的发生存在一定关系。2.在散发性大肠癌中,hMLH1和hMSH2的蛋白表达缺失多见于男性患者,且发病年龄较早,提示错配修复基因突变肿瘤具有特殊的临床特征。3.随着大肠癌分化程度的降低,hMLH1和hMSH2的表达降低,提示二者可能与大肠癌的恶性程度有关。4.在大肠腺瘤中也存在着一定比例的hMLH1、hMSH2蛋白表达缺失,且在重度不典型增生中更为多见,提示在二者在腺瘤阶段已有一定的突变率,并可能促进大肠癌的发生。5.在大肠腺瘤和大肠癌中,p53的蛋白表达逐渐升高,提示p53基因突变可能与散发性大肠癌的发生有关。6.在散发性大肠癌和大肠腺瘤中,hMLH1、hMSH2和p53的表达均无明显相关,提示错配修复基因和抑癌基因突变在散发性大肠癌的发生过程中可能是两种不同的致病途径。

论文目录

• 一、正文
• （一） 中文摘要
• （二） 英文摘要
• （三） 前言
• （四） 材料与方法
• （五） 结果
• （六） 讨论
• （七） 结论
• （八） 参考文献
• 二、文献综述
• （一） 综述
• （二） 参考文献
• 三、致谢