Ezrin及WT1在原发性膜性肾病肾小球的表达及意义

论文摘要

目的:原发性膜性肾病（IMN）作为一种慢性肾炎的常见病理类型,其病情存在逐渐恶化和自发缓解两种不同预后。IMN药物治疗时间长、敏感性不一,副作用多,因此有关IMN发病机理及影响预后因素的研究一直受到人们的重视。大量的临床和实验研究表明,IMN作为免疫复合物介导的肾小球肾炎,其脏层上皮细胞即足细胞下免疫复合物沉积导致了足细胞和足细胞相关蛋白的改变。埃兹蛋白（ezrin）是近年来被认识的一种足细胞蛋白,属于细胞膜细胞骨架连接蛋白（ERM）家族,它与肌动蛋白（actin）细胞骨架和特定部位的细胞膜结构相连,参与维持细胞的形态、信号转导和生长控制等。在肾脏疾病的实验模型中,ezrin被认为是一种有活性或死亡的足细胞标记。有文献报道,在不同致病机制引起的足细胞损伤中, ezrin免疫的表达有着明显的差异。Wilm肿瘤蛋白1（WT1）作为一种转录调节因子,肾脏形成后,其表达则仅限于足细胞中,对维持正常的足细胞功能起着非常重要的作用。已有研究显示,WT1表达水平下降可导致新月体肾炎或系膜硬化,另外WT1可转录活化足细胞裂孔膜蛋白nephrin。本文研究的目的是通过免疫组化的方法检测ezrin、WT1在IMN患者肾小球中表达水平的变化,并与临床常用实验指标（如24小时尿蛋白定量、血肌酐）进行相关性研究,探讨ezrin、WT1是否可以作为判断IMN严重程度的免疫组化指标,并进一步分析ezrin、WT1免疫组化表达与肾脏损害的关系,从而为IMN发病的研究提供更多的视角,为临床诊治、预后判断提供新的思路和方法。方法:（1） IMN组病例来源于2005年12月至2006年12月在河北医科大学第二医院肾内科病房住院诊治并经临床和病理确诊的25例IMN患者,依据其病理分期进一步分为Ⅰ期IMN组（13例）、Ⅱ期IMN组（8例）、Ⅲ+Ⅳ期IMN组（4例）三组。（2）对照组病例来源于河北医科大学第二医院泌尿外科6例因肾脏肿瘤切除一侧肿瘤肾后经病理证实为肾脏良性肿瘤的患者。（3） IMN各组及对照组均在肾活检或肾切除前留取尿液、血清标本。（4）采用免疫组织化学方法分别检测Ⅰ期IMN组、Ⅱ期IMN组、Ⅲ+Ⅳ期IMN组患者与对照组患者肾小球ezrin及WT1的表达指数（EI）并分别进行组间比较,（5）测定各组24小时尿蛋白定量、血肌酐的水平,且分别与ezrin及WT1的EI水平进行相关性分析。（6）临床指标及实验数据以x±s表示, ezrin、WT1在对照组、Ⅰ期IMN组、Ⅱ期IMN组及III+Ⅳ期IMN组表达的关系组间采用单因素方差分析,进一步两两比较用SNK-q检验分析。ezrin、WT1与24h尿蛋白定量、血肌酐间采用直线相关分析。（7）采用SPSS 10.0软件处理数据,以P<0.05代表有统计学意义。结果1临床实验指标:IMN组患者平均年龄（42.52±12.71）与对照组患者平均年龄（41±13.78）比较无统计学差异（P>0.05）;对照组患者的的24小时尿蛋白定量、血肌酐分别为:（0.05±0.04 g/24h）、（79.93±11.52μmol/L）;Ⅰ期IMN组、Ⅱ期IMN组和Ⅲ+Ⅳ期IMN组24小时尿蛋白定量分别为:（5.02±2.14 g/24h）、（7.39±2.54 g/24h）、（9.53±3.78 g/24h）;Ⅰ期IMN组、Ⅱ期IMN组和Ⅲ+Ⅳ期IMN组血肌酐水平分别为:（74.65±13.47μmol/L）、（100.34±39.66μmol/L）、（151.68±34.65μmol/L）。2免疫组织化学结果:（1） ezrin在IMN组、对照组肾小球壁层、脏层上皮细胞和肾小管上皮细胞均有表达,在肾小球主要表达于足细胞。Ⅰ期IMN组、Ⅱ期IMN组和III+Ⅳ期IMN组肾小球ezrin表达的EI值分别为:（8.36±1.75）、（5.61±1.64）、（3.47±0.76）,均较对照组（10.79±1.85）显著降低（P均<0.01）;Ⅰ期IMN组、Ⅱ期IMN组与III+Ⅳ期IMN组肾小球足细胞ezrin的表达依次逐渐降低,各组间表达差异均有统计学意义（P均<0.05）。（2） WT1在IMN组、对照组肾小球足细胞细胞核及胞浆内表达。Ⅰ期IMN组、Ⅱ期IMN组肾小球内WT1表达的EI值分别为（7.31±2.76）、（9.25±4.02）与对照组（9.42±4.38）比较均无明显变化（P均>0.05）;Ⅰ期IMN组、Ⅱ期IMN组和对照组肾小球WT1表达的EI值均显著高于III+Ⅳ期IMN组（3.71±0.66）（P均<0.01）。3免疫组化结果与临床指标相关性分析:IMN患者肾小球ezrin的表达水平与24小时尿蛋白定量负相关（r=-0.615,P<0.01）,与血肌酐负相关（r=-0.395,P=0.028）。IMN患者肾小球WT1的表达与尿蛋白定量、血肌酐均无相关性（r值分别为-0.178、-0.256,P值均>0.05）。结论1提示ezrin在IMN的早期即可反映足细胞的损伤,且能反映出IMN病理发展过程中足细胞受损的严重程度,因而ezrin有可能成为判断IMN足细胞损害的免疫组化敏感指标。2 IMN患者肾小球内ezrin的表达水平下降与24小时尿蛋白定量严重程度呈负相关关系,提示IMN肾小球ezrin表达水平有可能成为预测IMN预后的有用指标。3 IMN患者肾小球WT1的免疫组化表达虽能反映足细胞损伤,但对于反映IMN早期病变足细胞损伤尚缺乏敏感。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 研究论文 Ezrin 及WT1 在原发性膜性肾病肾小球的表达及意义
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 附图
• 附表
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述 Ezrin与肾脏疾病
• 致谢
• 个人简历