疣孢霉粗多糖诱导供试食药用菌多糖、蛋白质和酶的变化

论文摘要

真菌是生物活性物质开发的重要来源,其中大型真菌生物活性物质的开发是当前人们关注的热点,其中多糖、蛋白质和酶的经济价值显著,已被开发形成各类产品。随着市场需求日益增加,研究和寻找能提高酶活、增加生物量和促进产生新物质的微生物培养方法具有十分重要的意义。激发子在植物悬浮培养中应用广泛,但在微生物培养中应用不多,近年来有研究证实一些真菌多糖可作为激发子提高微生物培养过程中目标产物的含量。本项研究以疣孢霉发酵液粗多糖为激发子,并与灵芝、云芝、花脸香蘑和粗柄侧耳共同培养,分析了激发子对供试食药用菌菌丝体产量、纤维素酶活、蛋白质及多糖含量和酯酶同工酶酶谱的影响,结果显示,疣孢霉发酵液粗多糖可对供试大型真菌产生以下几种影响:一定浓度的疣孢霉粗多糖对供试四种大型真菌菌丝体产量具有较强的激发作用,随着激发子浓度的升高,菌丝体的生物量都较对照有显著增加,增加幅度为81.23～111.6%。疣孢霉激发子可诱导供试菌株菌丝体蛋白质含量增加,随着激发子浓度的增加,蛋白质含量呈现上升趋势。同时电泳结果显示,蛋白质种类和含量有显著的变化。当疣孢霉粗多糖浓度为600μg/ml时,对供试菌株蛋白质的诱导效果最为显著。在激发子诱导处理下,各供试菌株的发酵液纤维素酶活性较对照差异显著,其中随着激发子浓度升高,发酵液纤维素酶活性总体上呈现逐渐升高的趋势。随着激发子浓度的变化,导致供试菌丝体酯酶同工酶酶活性强度的变化,以及酶谱带的增加或缺失。当激发子浓度为600μg/ml时,各菌株的同工酶谱带表现出的差异最为显著。供试菌株发酵液多糖含量随着激发子浓度的增高而急剧上升。研究结果同时显示,在培养液中,疣孢霉粗粗多糖浓度为60μg/ml～80μg/ml时,激发效果最显著。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 文献综述
• 1.1 概述
• 1.2 研究现状综述
• 1.2.1 三类真菌生物活性物质的开发
• 1.2.2 高等真菌的蛋白质、多糖及酶等活性物质开发现状
• 1.2.3 真菌激发子研究和应用现状
• 1.3 本论文的研究意义
• 2 材料与方法
• 2.1 材料
• 2.1.1 供试菌株及来源
• 2.1.2 培养基
• 2.1.3 实验仪器
• 2.1.4 主要试剂及配制
• 2.2 方法
• 2.2.1 疣孢霉的培养及发酵液的获得
• 2.2.2 疣孢霉粗多糖的提取及定量
• 2.2.3 不同梯度的激发子培养液的配制
• 2.2.4 激发子对灵芝菌球生物量、大小的影响
• 2.2.5 激发子对粗柄侧耳,云芝,花脸香蘑的激发处理
• 2.2.6 菌丝体多糖的测定
• 2.2.7 发酵液多糖的测定
• 2.2.8 菌丝体蛋白质含量的测定
• 2.2.9 食用菌发酵液纤维素酶活性的测定
• 2.2.10 供试食用菌菌丝体酯酶同工酶电泳
• 2.2.11 供试食用菌胞内蛋白质的SDS-PAGE垂直电泳
• 3 结果与分析
• 3.1 诱导后灵芝菌丝体生物量、多糖及酶的变化
• 3.1.1 灵芝菌球大小和生物量变化情况
• 3.1.2 灵芝胞内多糖浓度变化情况
• 3.1.3 灵芝发酵液中多糖的浓度变化
• 3.1.4 灵芝菌丝蛋白质含量的变化情况
• 3.1.5 灵芝发酵液纤维素酶活性情况
• 3.1.6 灵芝菌丝体的酯酶同工酶电泳图谱
• 3.1.7 灵芝菌丝体蛋白质SDS—PAGE电泳结果
• 3.2 激发后粗柄侧耳菌丝体产量、多糖及酶的变化情况
• 3.2.1 粗柄侧耳生物量的变化情况
• 3.2.2 粗柄侧耳发酵液中多糖含量的变化
• 3.2.3 粗柄侧耳菌丝体蛋白质含量的变化情况
• 3.2.4 粗柄侧耳发酵液纤维素酶活性的情况分析
• 3.2.5 粗柄侧耳菌丝体酯酶同工酶电泳图谱
• 3.2.6 粗柄侧耳菌丝体蛋白质SDS—PAGE电泳图谱
• 3.3 云芝菌丝体产量、多糖及酶的变化情况
• 3.3.1 云芝生物量的变化情况
• 3.3.2 云芝发酵液中多糖浓度的变化
• 3.3.3 云芝菌丝体蛋白质含量的变化情况
• 3.3.4 云芝发酵液纤维素酶活性的变化情况
• 3.3.5 云芝菌丝体酯酶同工酶电泳图谱
• 3.3.6 云芝菌丝体蛋白质SDS-PAGE电泳图谱
• 3.4 诱导后花脸香蘑菌丝体产量、多糖及酶的变化情况
• 3.4.1 花脸香蘑生物量的变化情况
• 3.4.2 花脸香蘑发酵液中多糖浓度的变化情况
• 3.4.3 花脸香蘑菌丝体蛋白质含量的变化情况
• 3.4.4 花脸香蘑发酵液纤维素酶活性的变化情况
• 3.4.5 花脸香蘑菌丝体酯酶同工酶电泳图谱
• 3.4.6 花脸香蘑菌丝体蛋白质SDS-PAGE电泳图谱
• 4 讨论
• 4.1 食用菌对激发子应激反应
• 4.2 激发子对食用菌的激发作用
• 4.3 激发子对供试食用菌生物量的变化分析
• 4.4 供试食用菌菌丝体蛋白质和酶的变化分析
• 4.5 供试食用菌多糖浓度的变化分析
• 4.6 本项研究潜在的应用价值
• 5 结论
• 参考文献
• 致谢
• 读硕士学位期间发表的论文