论文摘要
甜菜夜蛾（Spodoptera exigua）属鳞翅目夜蛾科,是一种世界性分布的杂食性重要农业害虫,主要危害蔬菜、棉花和观赏性植物等。由于一直依靠化学防治,甜菜夜蛾已对多种类型农药尤其是菊酯类杀虫剂产生抗性。昆虫生长调节剂如虫酰肼和几丁质合成抑制剂类杀虫剂是近年来防治甜菜夜蛾的主要替代农药。这类杀虫剂对鳞翅目害虫都表现了高度的选择性,对哺乳动物、鸟、鱼类、其它脊椎动物和大多数天敌无毒害作用,是害虫综合防治的重要优选药剂。害虫对药剂都存在产生抗药性的风险,为了更有效地控制甜菜夜蛾的危害,掌握甜菜夜蛾对此类杀虫剂的敏感性变化十分重要。昆虫的生命活动是通过神经系统电位传导进行调控的,神经电位是由神经膜内外离子浓度不同形成的电位差,信号传导则是神经膜电位发生连续变化而向下传递的。神经膜内外不同离子浓度的调节主要靠神经膜上的ATPase进行调控。Na-K-ATPase催化ATP末端磷酸水解,并利用其高能磷酸键释放的自由能进行Na+、K+逆电化学梯度运输,维持细胞膜内外Na+、K+离子浓度的相对恒定及渗透压的平衡。Ca2+对轴突传导、突触神经递质释放及神经膜的稳定性等起重要作用,正常情况下神经膜外Ca2+离子的浓度高于膜内浓度,Ca2+在膜内外的调节主要靠Ca-ATPase和Ca-Mg-ATPase来进行。拟除虫菊酯类杀虫剂的作用靶标主要是神经膜上的钠离子通道和维持膜内外离子浓度稳定的Na-K-ATPase、Ca-ATPase和Ca-Mg-ATPase等。目前已报道许多害虫对拟除虫菊酯类杀虫剂产生了不同程度的抗性,有些害虫的抗性甚至达到了高水平或极高水平阶段。钠离子通道变异和神经ATPase活性下降是产生抗药性的重要原因。本文研究内容包括三部分:抗性甜菜夜蛾对昆虫生长调节剂的敏感性测定、抗性甜菜夜蛾神经ATPase活性变化和多功能氧化酶活性变化的研究。研究结果如下:1、在室内相同条件下,分别用点滴法和浸叶法测定甜菜夜蛾抗氯氟氰菊酯品系和敏感品系3龄幼虫LD50（ug/头）或LC50值（mg/L）。用点滴法测定结果表明,甜菜夜蛾3龄幼虫对氯氟氰菊酯的抗性倍数是5163.0倍;用浸叶法测定甜菜夜蛾3龄幼虫对氯氟氰菊酯的抗药性倍数是985.2倍。浸叶法测定甜菜夜蛾抗性品系3龄幼虫对昆虫生长调节剂的敏感性结果表明,甜菜夜蛾抗性品系和敏感品系对供试药剂的敏感性均存在明显差异。甜菜夜蛾敏感品系对供试药剂的敏感性由高到低顺序为甲氧酰肼（1.866 mg/L）﹥虫酰肼（5.574 mg/L）﹥氟铃脲（13.37 mg/L）﹥抑食肼（58.61 mg/L）﹥除虫脲（178.5 mg/L）;甜菜夜蛾抗性品系对供试药剂的敏感性由高到低顺序为甲氧酰肼（4.863 mg/L）﹥虫酰肼（21.45mg/L）﹥氟铃脲（64.36mg/L）﹥抑食肼（325.4mg/L）﹥除虫脲（567.3mg/L）。测定结果表明,与敏感品系相比,甜菜夜蛾抗性品系3龄幼虫对昆虫生长调节剂甲氧酰肼、虫酰肼、氟铃脲、抑食肼、除虫脲的敏感性分别下降:3.81、5.55、4.81、3.85和2.61倍,其中对部分药剂的敏感性下降倍数达到5倍以上,表现出低水平抗药性。2、分别测定了甜菜夜蛾敏感品系和抗氯氟氰菊酯品系神经Na-K-ATPase、Ca-ATPase和Ca-Mg-ATPase的活力,结果表明,甜菜夜蛾敏感品系和抗性品系Na-K-ATPase活力差异不显著,而抗性品系Ca-ATPase和Ca-Mg-ATPase活力明显低于敏感品系。分别测定氯氟氰菊酯对敏感和抗性品系Na-K-ATPase、Ca-ATPase和Ca-Mg-ATPase活力的抑制作用,结果表明,在浓度为10-8～10-3 mol/L时,氯氟氰菊酯对敏感和抗性品系Na-K-ATPase、Ca-ATPase和Ca-Mg-ATPase的活力均有抑制作用,并且对敏感品系的抑制作用要高于对抗性品系的抑制作用。如氯氟氰菊酯浓度为10-4 mol/L时,对敏感品系Na-K-ATPase活力抑制率为29.6%,抗性品系为21.8%;对敏感品系Ca-ATPase活力抑制率为34.3%,抗性品系为21.9%;对敏感品系Ca-Mg-ATPase活力抑制率为22.3%,抗性品系为16.9%。结果表明甜菜夜蛾抗性品系上述3种ATP酶对氯氟氰菊酯的敏感性已明显下降。3、测定了抗氯氟氰菊酯甜菜夜蛾种群在室内用人工饲料连续饲养和未用药剂筛选条件下多功能氧化酶系活性的变化规律。测定甜菜夜蛾田间种群室内F2、F20、F41代及敏感品系5龄幼虫中肠微粒体甲氧试卤灵-O-脱甲基酶、乙氧试卤灵-O-脱乙基酶、芳香基羟基化酶及艾氏剂环氧化酶活性结果表明,与敏感品系相比,田间种群甲氧试卤灵-O-脱甲基酶和艾氏剂环氧化酶的活性仅F2代差异显著,F20和F41代差异不显著;乙氧试卤灵-O-脱乙基酶和芳香基羟基化酶的活性F2、F20、F41代均差异显著。表明微粒体多功能氧化酶系不同酶在甜菜夜蛾不同抗性水平阶段的作用不同。