论文摘要
目的:近年来大量研究表明,心肌纤维化（Myocardial Fibrosis,MF）属于心室重构的一部分,可发生于许多心血管疾病,并严重影响心脏形态改变和心血管疾病患者的预后。“心脉通颗粒”是防治缺血性心脏病的中药复方制剂,具有活血化瘀、通脉止痛功能。临床应用和实验研究显示其具有明显的抗心肌缺血损伤,改善心功能作用。DAng-Ⅰ是一种新型的生物制剂,前期研究证实其有与血管紧张素Ⅱ相反的生物学效应。本实验采用心脉通颗粒的含药血清和去天冬氨酸血管紧张素Ⅰ（des-aspartic acid-an-giotensinⅠ,DAng-Ⅰ）干预体外培养的心肌成纤维细胞（cardiac fibroblasts,CFb）,观察其对去甲肾上腺素（norepinephrine,NE）所诱导的心肌成纤维细胞过度增殖和胶原（collagen）mRNA的过度表达的影响;并观察其对细胞上清液中转化生长因子（transforming growth factor betal-1,TGF-β1）表达量的影响,在体外,从细胞学、分子生物学角度研究二者抗心肌纤维化作用及其可能机制。方法:1.NE促进CFb增殖实验胰酶消化法分离新生SD大鼠心肌成纤维细胞和心肌细胞,并用差速贴壁法进行纯化。所培养细胞进行免疫化学染色鉴定。实验采用第2到4代成纤维细胞。分别用不同浓度的NE（104,103,102,10,0 nM）作用于CFb,用MTT法测定细胞增殖。2.心脉通抑制NE诱导的CFb增殖和胶原mRNA表达的作用以及细胞上清液中TGF-β1表达量的测定取CFb,制成细胞悬液,接种于96孔板、24孔板和6孔板中,并随机分为:①正常组:细胞+含10%正常老鼠血清DMEM;②NE组:细胞+104nM NE+含10%正常老鼠血清DMEM;③心脉通组:细胞+104nM NE+含10%心脉通老鼠药物血清DMEM:④DAng-Ⅰ组:细胞+104nM NE+5×103 nM DAng-Ⅰ+含10%正常老鼠血清DMEM。在培养48h后的96孔板用MTT法检测细胞增殖情况。6孔板中的细胞进行一下实验:按照Trizol说明书提取细胞中的总RNA,取2μg总RNA进行反转录聚合酶链反应（reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR）（按照RT-PCR说明书进行）,测定胶原mRNA表达。另外吸取24孔板中细胞上清液按照TGF-β1ELISA试剂盒方法检测TGF-β1的含量。结果:1.NE促进CFb增殖本实验表明:NE有促进CFb增殖的作用,NE浓度为104,103,102,10和0nM的OD值分别为:0.33±0.02、0.30±0.01、0.28±0.03、0.27±0.02和0.27±0.01。结果示在104到10nM范围内呈剂量依赖性（rs=0.9,P＜0.05）,于104nM浓度时达到最大效应。2.心脉通对NE诱导CFb增殖及Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原mRNA表达的抑制作用噻唑蓝（3-{4,5-dimethylthiazol-2-y}-2-5 Diphenytetrazolium bromide,MTT）检测显示,与正常组相比较,NE促进CFb增殖;与NE组相比,心脉通、DAng-Ⅰ均能明显抑制NE诱导的CFb增殖差异显著（P＜0.05）,与正常组比较,差异不显著（p＞0.05）;心脉通组和DAng-Ⅰ组相比,差异不显著（P＞0.05）。分子生物学研究表明,与正常组相比较NE增加Ⅰ型胶原（collagen typeⅠ）和Ⅲ型胶原（collagen typeⅢ）mRNA表达（P＜0.05）;心脉通、DAng-Ⅰ均能明显抑制NE诱导的collagentypeⅠ和collagen type mRNAⅢ表达,与NE组相比,差异显著（P＜0.05）,与正常组比较,差异不显著（P＞0.05）;心脉通组和DAng-Ⅰ组相比,差异不显著（P＞0.05）。3.心脉通对TGF-β1含量的影响酶联免疫吸附实验（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）对细胞培养上清液中TGF-β1含量检测结果表明:与NE组相比较,心脉通、DAng-Ⅰ中的TGF-β1含量变化不显著,其差异无统计学意义（P＞0.05）。结论:本研究发现心脉通、DAng-Ⅰ有抑制NE所诱导的成纤维细胞增殖和胶原mRNA过度表达的作用。但本研究发现各个药物组与NE组比较TGF-β1变化不显著,其作用机制需要进一步实验探讨。
论文目录
相关论文文献
- [1].人脉通 还能“玩”多久[J]. 知识经济(中国直销) 2015(12)
- [2].泥土的梦(组诗)[J]. 岁月 2017(01)
- [3].脉通汤治疗中风后遗症效果观察[J]. 中外医学研究 2016(17)
- [4].骨脉通治疗1410例临床报告[J]. 临床医药文献电子杂志 2014(11)
- [5].人脉通 胜友如云[J]. 电脑爱好者 2014(20)
- [6].反相高效液相色谱法测定心脉通分散片中葛根素的含量[J]. 环球中医药 2010(01)
- [7].基于分子对接模拟预测复方脑脉通治疗缺血性脑卒中的物质基础[J]. 中药材 2017(03)
- [8].中药自拟脉通散外敷治疗血栓闭塞性脉管炎96例临床疗效观察[J]. 内蒙古中医药 2016(02)
- [9].脉通汤治疗下肢静脉炎50例疗效观察[J]. 中国社区医师(医学专业) 2013(06)
- [10].益脉通对周围动脉硬化闭塞症红细胞免疫状态影响的观察[J]. 中医药信息 2010(06)
- [11].脑脉通有效部位中川芎嗪的含量测定[J]. 河南中医学院学报 2008(01)
- [12].脑脉通有效部位中阿魏酸的含量测定[J]. 河南中医学院学报 2008(04)
- [13].目脉通丸质量标准的研究[J]. 中国药师 2012(11)
- [14].糖脉通片治疗糖尿病周围神经病的疗效观察[J]. 中国校医 2010(07)
- [15].自拟脑脉通治疗脑血管疾病114例[J]. 实用中医内科杂志 2008(10)
- [16].糖脉通治疗早期糖尿病下肢血管病变100例临床研究[J]. 中医药学报 2015(02)
- [17].济脉通片对长期饮酒大鼠血压及相关活性物质的影响[J]. 中草药 2014(09)
- [18].脑脉通治疗脑血管疾病临床效果分析[J]. 中国药物经济学 2013(01)
- [19].脑脉通有效部位中总蒽醌的含量测定[J]. 广东药学院学报 2008(02)
- [20].康脉通预防骨科大手术术后下肢深静脉血栓形成的临床研究[J]. 今日药学 2017(10)
- [21].复方脑脉通治疗缺血性脑中风多靶点作用的分子对接[J]. 中成药 2016(08)
- [22].醒脉通治疗癔症性精神病32例临床观察[J]. 中国医药指南 2012(34)
- [23].浅谈住院精神病患者醒脉通的安全管理[J]. 中国卫生产业 2016(20)
- [24].脑脉通对大鼠骨髓间充质干细胞移植保护脑缺血微血管完整性作用的影响[J]. 中国老年学杂志 2015(21)
- [25].医脉通:专注为医生服务[J]. 创业家 2015(08)
- [26].顶空进样气相色谱法测定脑脉通软胶囊中有机溶剂残留量[J]. 天津中医药 2011(06)
- [27].脑脉通有效部位中总生物碱的含量测定[J]. 广东药学院学报 2008(01)
- [28].脑脉通化学成分的研究(Ⅰ)[J]. 内蒙古大学学报(自然科学版) 2012(02)
- [29].心脉通软胶嚢制备工艺及芦丁含量测定方法的确立[J]. 基因组学与应用生物学 2017(12)
- [30].脑脉通有效部位中总皂苷的含量测定[J]. 中国药房 2010(19)