玉竹糖蛋白的分离纯化及抗氧化作用研究

论文摘要

玉竹[polygonatumodoratum（Mill.）Druee]是百合科黄精属植物玉竹类的干燥根茎,具有降血脂、降血压、缓解动脉粥样硬化斑形成的作用。为了玉竹资源的进一步开发,本课题选取玉竹为材料,对玉竹糖蛋白进行了分离、纯化及结构测定,并对玉竹糖蛋白的体外抗氧化活性进行了研究,试验主要结论如下：1.热水浸提玉竹糖蛋白最佳工艺,即料液比1：30、温度70℃,浸提时间4h、提取次数3次。在此最佳工艺条件下,试验验证玉竹糖蛋白得率为8.28%。2.微波辅助提取玉竹糖蛋白最佳工艺,即料液比1：40、提取次数2次,微波功率420W、提取时间3min,在此条件下,试验验证玉竹糖蛋白得率为8.85%。3.玉竹糖蛋白粗品PDGP经DEAE-52纤维素柱层析分离出PDGP-1和PDGP-2两种组分,经Sephadex G-100凝胶柱进一步分离纯化得到PDGP-1′、PDGP-2′,结果表明PDGP-1′、PDGP-2’均为均一玉竹糖蛋白组分,PDGP-1′、PDGP-2′分子量分别为92.45kD和60.28kD。4.经过分离纯化得到的两种玉竹糖蛋白,用苯酚-硫酸法和Folin-酚法对其进行测定。两种玉竹糖蛋白PDGP-1′、PDGP-2′的糖含量分别为：75.22%、75.13%；蛋白质含量分别为：16.35%,18.42%。糖蛋白中糖的含量含多于蛋白含量。5.玉竹糖蛋白的单糖组成分析和红外光谱分析表明：PDGP-1′中的糖链主要成分是葡萄糖、半乳糖,含少量的鼠李糖；PDGP-2′中的糖链主要成分是葡萄糖、半乳糖,含少量的果糖、甘露糖、木糖和阿拉伯糖。两种糖蛋白分子内都含有吡喃糖环。6.PDGP-1′和PDGP-2′经过氨基酸自动分析仪测定,结果显示两种玉竹糖蛋白均含有18种氨基酸,且具有相同的氨基酸种类,因此玉竹糖蛋白营养价值较高。7.体外抗氧化试验结果显示,玉竹糖蛋白具有显著的还原能力。玉竹糖蛋白对有机自由基（DPPH）和羟基自由基有明显的清除作用,并且随着PDGP质量浓度的增加,清除能力增强。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 文献综述
• 1 玉竹研究概况
• 1.1 玉竹的化学成分
• 1.2 玉竹的药理作用
• 1.3 玉竹的应用
• 2 关于糖蛋白的概念和研究进展
• 2.1 概念
• 2.2 研究进展
• 2.3 应用与展望
• 3. 糖蛋白的研究方法
• 3.1 糖蛋白的提取
• 3.2 糖蛋白的纯化
• 4 研究玉竹糖蛋白的意义
• 第二章 玉竹糖蛋白提取工艺研究
• 1 试验材料、试剂及仪器
• 1.1 试验材料
• 1.2 试验试剂
• 1.3 试验仪器
• 2 试验方法
• 2.1 玉竹糖蛋白含量测定方法
• 2.2 玉竹糖蛋白提取工艺流程
• 2.3 热水浸提玉竹糖蛋白的工艺研究
• 2.4 微波辅助提取玉竹糖蛋白的研究
• 3 结果与分析
• 3.1 玉竹糖蛋白得率的计算
• 3.2 热水浸提玉竹糖蛋白的工艺研究结果
• 3.3 微波辅助法提取玉竹糖蛋白工艺条件的研究结果
• 4. 脱游离蛋白研究结果
• 5 本章小结
• 第三章 玉竹糖蛋白的分离纯化及理化性质研究
• 1 试验材料、试剂及仪器
• 2 试验方法
• 2.1 玉竹糖蛋白粗品的分级纯化
• 2.2 玉竹糖蛋白纯度鉴定
• 2.3 玉竹糖蛋白均一组分的理化性质研究
• 2.4 玉竹糖蛋白均一组分的组成及结构分析
• 2.5 玉竹糖蛋白均一组分的分子量测定
• 3 结果与分析
• 3.1 玉竹糖蛋白粗提物（PDGP）的DEAE-纤维素柱层析
• 3.2 PDGP-1、PDGP-2两种级分的SephadexG-100凝胶柱层析
• 3.3 纯度鉴定
• 3.4 玉竹糖蛋白均一组分的分子量测定
• 3.5 玉竹糖蛋白均一组分PDGP-1′和PDGP-2′的理化性质测定
• 3.6 玉竹糖蛋白均一组分氨基酸组成分析
• 4 本章小结
• 第四章 玉竹糖蛋白体外抗氧化研究
• 1 试验材料、试剂及仪器
• 1.1 试验材料
• 1.2 试验试剂
• 1.3 试验仪器
• 2 试验方法
• 2.1 还原能力的测定
• 2.2 对有机自由基（DPPH）的清除作用
• 2.3 对羟基自由基（·OH）的清除作用
• 3 结果与分析
• 3.1 还原力测定结果
• 3.2 玉竹糖蛋白对有机自由基（DPPH）的清除作用
• 3.3 玉竹糖蛋白对羟基自由基的清除作用
• 4 本章小结
• 结论
• 参考文献
• 创新之处
• 致谢
• 攻读学位期间的研究成果