运动对骨髓间充质干细胞增殖和中药对其增殖及诱导成骨的研究

论文摘要

研究目的:本研究旨在探索运动因素是否对骨髓间充质干细胞的增殖有影响,同时从干细胞生物学的角度研究郑氏伤科三号接骨药对骨髓间充质干细胞的增殖和成骨分化的影响。材料方法:1将8只新西兰大白兔分为安静组和运动组,每组四只,运动组以每天25米/分钟的速度运动60分钟,5天/周,运动4周的方案进行训练,安静组进行常规笼内自由活动。2分别取运动组和安静组兔胫骨骨髓,用密度梯度离心——贴壁筛选的方法,获取并培养骨髓间充质干细胞,镜下观察和MTT法检测P1代细胞2到8天的增殖活性。3制备郑氏伤科三号接骨药液,以P2代细胞为研究对象,分为五组(空白对照组、标准对照组、中药1组、中药2组、中药3组)分别进行培养,镜下观察和MTT法检测P2代细胞2到8天的增殖活性。4以P2代细胞为研究对象,分为五组(空白对照组、标准对照组、中药1组、中药2组、中药3组)分别进行诱导,通过碱性磷酸酶活性来考察郑氏伤科三号接骨药对骨髓问充质干细胞诱导成骨分化的影响。研究结果:1安静组和运动组获得的骨髓间充质干细胞经过MTT法检测其增殖活性,经过统计学分析(P＞0.05)未见显著性差异。2经过统计学分析MTT法检测不同组别的骨髓间充质干细胞的增殖活性显示:空白对照组与标准对照组未见显著性差异,而中药组与标准对照组有显著性差异。3碱性磷酸酶活力的测定值由高到低顺序为:中药3组＞标准对照组＞中药2组＞中药1组＞空白对照组。结论:1本实验设计的运动组以每天25米/分钟的速度运动60分钟,5天/周,运动4周的运动训练方案对骨髓间充质干细胞的增殖活性未见明显影响。2郑氏伤科三号接骨药对骨髓间充质干细胞的增殖活性具有双向调节作用,高浓度组对骨髓间充质干细胞的增殖有抑制作用,中、低浓度组对骨髓间充质干细胞的增殖有促进作用。3郑氏伤科三号接骨药能促进骨髓间充质干细胞的增殖和向成骨细胞分化。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 1 前言
• 2 文献综述
• 2.1 骨髓间充质干细胞的生物学特性
• 2.1.1 干细胞的概念和分类
• 2.1.2 骨髓间充质干细胞的基本概念
• 2.1.3 骨髓间充质干细胞的表面抗原表型
• 2.1.4 骨髓间充质干细胞的高分化能力
• 2.1.5 骨髓间充质干细胞的多分化潜能
• 2.1.6 骨髓间充质干细胞的迁徙能力
• 2.2 MSCs的体外分离培养
• 2.2.1 MSCs的体外分离
• 2.2.2 MSCs的培养
• 2.3 运动和干细胞的关系
• 2.4 中药对骨髓间充质干细胞增殖和诱导成骨分化的进展
• 2.4.1 骨髓间充质干细胞向成骨细胞的诱导分化
• 2.4.2 郑氏伤科三号接骨药的组成和疗效
• 2.4.3 中药对骨髓间充质干细胞增殖和诱导成骨分化的进展
• 2.5 骨髓间充质干细胞的应用前景
• 3 实验一:骨髓间充质干细胞的分离培养和运动因素对其增殖的影响
• 3.1 实验材料
• 3.1.1 实验动物及分组
• 3.1.2 实验仪器和试剂
• 3.2 实验方法
• 3.2.1 运动方案
• 3.2.2 取材
• 3.2.3 细胞的原代培养及传代
• 3.2.4 倒置相差显微镜观察
• 3.2.5 MTT法检测
• 3.2.6 统计学处理
• 3.3 实验结果
• 3.3.1 倒置相差显微镜观察结果
• 3.3.2 MTT法检测的结果
• 4 实验二:郑氏伤科三号接骨药对骨髓间充质干细胞增殖和向成骨细胞分化的影响
• 4.1 实验材料
• 4.1.1 实验动物
• 4.1.2 实验仪器和试剂
• 4.2 实验方法
• 4.2.1 实验分组
• 4.2.2 实验所需条件培养液的配制
• 4.2.2.1 郑氏伤科三号接骨药液的制备
• 4.2.2.2 各组条件培养液的配制
• 4.2.3 取材和细胞的原代、传代培养
• 4.2.4 倒置相差显微镜观察
• 4.2.5 MTT法检测
• 4.2.6 成骨诱导
• 4.2.7 ALP活性的测定
• 4.2.8 统计学处理
• 4.3 实验结果
• 4.3.1 倒置相差显微镜观察结果
• 4.3.2 MTT法检测结果
• 4.3.3 ALP活力测定
• 5 分析讨论
• 5.1 骨髓间充质干细胞的分离和培养
• 5.2 运动对骨髓间充质干细胞的影响
• 5.3 郑氏伤科三号接骨药对骨髓间充质干细胞增殖和分化的影响
• 6 结论
• 7 建议
• 致谢
• 参考文献
• 个人简历 在读期间发表的学术论文与研究成果