阴道超声照射对早孕胚胎绒毛细胞凋亡的研究

论文摘要

目的随着辅助生殖技术的开展,阴道超声广泛用于卵泡监测、取卵及多胎妊娠减胎术等过程中,且趋于早期化、多次化。因此,阴道超声照射对生殖细胞及胚胎潜在的生物效应及其安全性越来越受到重视。经阴道超声照射对胚胎及胎儿是否安全,近几年有关报道较多,但多为动物实验或离体组织细胞研究,而关于人早孕胚胎绒毛细胞凋亡方面研究较少。本研究的目的是探讨阴道超声照射宫腔孕囊一定时间后,人体早孕胚胎组织绒毛细胞凋亡的变化,以期为临床阴道超声照射时限提供新的佐证。方法选择拟行人工流产的60例健康早孕妇女,随机数字法分为四组:对照组（未照射）、照射3min、照射5min和照射10min组。应用探头频率5.0-MHz的阴道超声,对孕囊进行不同时间持续照射。照射后24小时行人工流产取绒毛。采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的原位末端标记法（TUNEL）行细胞凋亡的组织学检测,免疫组织化学方法（S-P法）检测促/抑凋亡基因Bax和Bcl-2蛋白在组织中的表达。结果原位末端标记法（TUNEL）检测绒毛细胞凋亡结果显示,对照组早孕绒毛中有少量凋亡细胞存在,照射组凋亡细胞数目增加,照射3min组出现凋亡细胞数目增多但与对照组之间差异无显著性（P＞0.05）。照射5min及照射10min组的凋亡细胞数目明显增加,与对照组及照射3min组比较差异有统计学意义（P＜0.01）。而照射10min组与照射5min组之间凋亡细胞数目差异亦有显著性（P＜0.01）。免疫组织化学法检测的Bax和Bcl-2蛋白在早孕绒毛细胞中的表达,结果显示,对照组中早孕绒毛中促凋亡的Bax蛋白少量分布于合体滋养细胞胞浆中,细胞滋养细胞及间质含量极少,而照射组中细胞滋养细胞及合体滋养细胞中Bax蛋白含量均增加,照射3min及照射5min组与对照组之间Bax蛋白表达差异无统计学意义（P＞0.05）,照射10min组Bax蛋白表达明显增强,与其他三组比较差异有显著性（P＜0.01）。而抑制凋亡的Bcl-2蛋白表达在照射3min组、照射5min组及照射10min组表达与对照组比较无显著性差异（P＞0.05）。结论1、早孕绒毛中有少量凋亡细胞存在,主要分布于合体滋养细胞,间质细胞分布很少,细胞滋养细胞没有见到凋亡细胞存在。2、阴道超声照射后增加早孕绒毛细胞的凋亡,而且随着照射时间的延长,绒毛细胞的凋亡指数逐渐升高,以照射10min组的绒毛细胞凋亡指数最高,照射3分钟组细胞凋亡指数与对照组无显著性差异。3、早孕绒毛细胞促凋亡的Bax蛋白少量分布于合体滋养细胞胞浆中,细胞滋养细胞及间质含量极少;早孕绒毛细胞抑制凋亡的Bcl-2蛋白表达主要分布于绒毛的细胞滋养细胞胞浆中,合体滋养细胞中未见表达。4、阴道超声照射后早孕胚胎绒毛细胞滋养细胞及合体滋养细胞Bax蛋白表达增加,随着照射时间的延长Bax蛋白表达逐渐增加:阴道超声照射后早孕胚胎绒毛细胞滋养细胞Bcl-2蛋白表达减弱,与阴道超声照射时间的长短无关。5、孕早期的阴道超声辐照3分钟内是安全的,辐照5分钟相对安全,阴道超声的直接辐照最好不要超过10分钟。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 引言
• 第一章 材料与方法
• 第二章 结果
• 第三章 讨论
• 第四章 结论
• 参考文献
• 综述一
• 综述二
• 攻读学位期间的研究成果
• 致谢