氯胺酮抑制内毒素小鼠肺泡巨噬细胞核因子-κB活化的实验研究

论文摘要

目的:观察不同浓度的氯胺酮对脂多糖（LPS）诱发的小鼠肺泡巨噬细胞NF-κB活化及TNF-α释放的影响,进一步探讨氯胺酮对ALI/ARDS的应用前景。 方法:在小鼠肺泡巨噬细胞（PAM）培养液中加入LPS10μg/ml而得到内毒素肺损伤细胞模型。实验分为LPS刺激组（加LPS10μg/ml）、氯胺酮干预组1（同时加入LPS10μg/ml和氯胺酮10μM）、氯胺酮干预组2（同时加入LPS10μg/ml和氯胺酮100μM）氯胺酮干预组3（同时加入LPS10μg/ml和氯胺酮1000μM）四组。分别于刺激后（0.5,1,4,6小时）留取细胞及细胞培养上清,用免疫组化染色图像分析法和ELISA法分别检测细胞核中NF-κB活性和细胞培养上清中TNF-α含量。 结果:1) LPS+不同浓度的氯胺酮（10μM,100μM,1000μM）后,NF-κBp50活性与LPS组相比在1h和4h处有明显的下降,（P<0.05）且有剂量依从性,氯胺酮浓度越大NF-κBp50活性下降越明显。各组之间有显著性差异（P<0.05）。2) NF-κBp65活性的检测与NF-κBp50的检测结果相似。3)LPS+不同浓度的氯胺酮（10 μM,100μM,1000μM）后,0.5h-6h处TNF-α的含量均明显低于LPS组（P<0.05）,LPS+氯胺酮1000μM组与LPS组比较0.5h和1h下降最明显（P<0.01）。随着氯胺酮浓度增大,各个时间点处TNF-α的含量下降明显,并呈剂量依赖性,各组之间比较差异显著（P<0.05）。 结论:1) PAM受到LPS刺激后,NF-κB活性的变化与TNF-α基本一致,说明NF-κB的活化可能是PAM大量释放TNF-α等一系列炎症介质引发ALI的关键环节。2) 氯胺酮通过对PAM内NF-κB活化的抑制,使TNF-α释放减少,可阻止和延缓LPS诱发的ALI的发生,可能有一定的肺保护作用。

论文目录

• 摘要
• 前言
• 第一章 资料与方法
• 第二章 结果
• 第三章 讨论
• 第四章 结论
• 参考文献
• 附图
• 综述
• 个人简介
• 致谢