论文摘要
目的：观察负载抗原的DC细胞对CIK杀伤活性的作用及DC细胞诱导的CIK基因表达谱的变化。方法：以人PBMC制备DC细胞和CIK细胞。DC细胞的制备方法是将贴壁细胞混悬于10％FBS RPMI1640培养液（含IL-4和GM-CSF），于37℃5％CO2孵育箱中培养7天。CIK细胞是将非贴壁细胞混悬于10％FBS RPMI 1640（含INF-γ），培养24小时后，补加IL-2、IL-1a、鼠抗人CD3单抗，继续培养7或14天。用流式细胞术分析DC细胞和CIK细胞的表型。以混合淋巴细胞反应测定DC细胞活性，以体外细胞毒性实验测定DC激活的CIK细胞的杀伤活性。利用基因芯片技术检测它们在释放相关细胞因子水平及信号传导通路所发生的一系列变化。结果：表型分析显示本实验制备的CIK细胞中主要是CD3+CD56+NKT细胞，增殖能力较强：DC细胞表达高水平的CD40、CD80、CD86和HLA-DR，可诱导混合淋巴反应。未负载抗原的DC细胞和抗原负载的DC细胞均可刺激CIK细胞的增殖，二者之间无显著性差别。但未负载抗原的DC细胞不能显著地进一步增强CIK细胞的杀伤活性。抗原负载的DC细胞能显著增强CIK细胞特异性杀伤靶细胞的能力。芯片扫描发现：50种信号传导因子发生5倍以上的改变。结论：抗原负载的DC细胞可活化CIK细胞，并使其具有特异性杀伤肿瘤细胞的能力。DC激活的CIK细胞基因表达谱的变化主要见于Cys-Cys、MIP-2a、IFN调节因子-1、IFN拮抗性细胞因子、TGF-β、IL-5、FAST激酶和SARP3等基因。
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