无根藤生物碱对小鼠肝癌（H22）的作用

论文摘要

本文阐述了植物生物碱类抗肿瘤药物的研究进展及无根藤生物碱的研究概况；对无根藤生物碱进行了分离制备,并分析其主要化学成分；观察其在体内和体外对小鼠肝癌H22细胞的影响,并初步探讨其作用机制。本文以溶剂萃取法分离无根藤生物碱,通过高效液相色谱-质谱（HL-MS）初步分析其化学成份；采用台盼蓝染色排染法以及MTT法检测无根藤生物碱对小鼠肝癌细胞（H22）的体外抑制作用;通过建立小鼠肝癌H22腹水瘤模型和实体瘤模型观察无根藤生物碱对小鼠肝癌H22的体内抑制作用,通过检测胸腺、脾脏指数来探究无根藤生物碱的毒副作用；通过HE染色法观察细胞形态的变化,采用DNA琼脂糖凝胶电泳法分析无根藤生物碱对肿瘤细胞DNA裂解和DNA TOPO I的影响；采用免疫组织化学方法检测无根藤生物碱对Bax、Bcl-2基因表达的影响。结果表明无根藤生物碱的主要成分包括樟碱（Actinodaphnine）,新木姜子碱（Neolitsine）,荷包牡丹碱（Dicentrine）等；无根藤生物碱在体外对小鼠肝癌H22细胞的生长有显著的抑制作用,其抑制作用具有剂量和时间依赖效应；无根藤生物碱对小鼠肝癌H22腹水型小鼠具有一定的生命延长作用,且对小鼠肝癌H22实体瘤也有着明显的抑制作用,但大剂量给药具有一定的毒副作用；无根藤生物碱可以抑制DNA TOPO I的活性,上调Bax基因表达,下调Bcl-2基因表达,促进肿瘤细胞凋亡。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 中文文摘
• 目录
• 第一章 绪论
• 1.1 植物生物碱类药物抗肿瘤研究进展
• 1.1.1 喹啉类生物碱
• 1.1.2 异喹啉类生物碱
• 1.1.3 吲哚类生物碱
• 1.1.4 甾体类
• 1.1.5 萜类生物碱
• 1.1.6 吡啶类生物碱
• 1.1.7 糖苷类生物碱
• 1.2 无根藤生物碱概况
• 1.2.1 主要成分研究
• 1.2.2 药理活性研究
• 1.2.3 小结
• 1.3 本课题的研究背景、内容及意义
• 1.4 技术路线
• 第二章 无根藤生物碱的提取及成分分析
• 2.1 材料
• 2.1.1 药品与试剂
• 2.1.2 主要仪器
• 2.2 方法
• 2.2.1 无根藤生物碱的提取分离
• 2.2.2 无根藤生物碱显色和沉淀反应
• 2.2.3 无根藤生物碱成分分析
• 2.3 结果及分析
• 2.3.1 无根藤生物碱显色和沉淀反应
• 2.3.2 无根藤生物碱成分分析
• 第三章 无根藤生物碱对体外培养的H22细胞的影响
• 3.1 材料和试剂
• 3.2 方法
• 3.2.1 细胞培养传代
• 3.2.2 细胞排染实验
• 3.2.3 MTT实验
• 3.2.4 无根藤生物碱对H22细胞生长曲线的影响
• 3.2.5 数据处理
• 3.3 结果
• 3.3.1 细胞培养与药物作用
• 3.3.2 MTT实验
• 3.3.3 无根藤生物碱对H22细胞生长曲线的影响
• 3.4 讨论
• 第四章 无根藤生物碱对肝癌H22的体内抑制作用
• 4.1 材料与药品
• 4.2 方法
• 4.2.1 无根藤生物碱对腹水型小鼠生命延长率的影响
• 4.2.2 无根藤生物碱对小鼠肝癌H22实体瘤生长的影响
• 4.2.3 肿瘤组织细胞形态学观察
• 4.2.4 统计学处理
• 4.3 结果
• 4.3.1 无根藤生物碱对腹水型肝癌H22小鼠生命延长率的影响
• 4.3.2 无根藤生物碱对小鼠肝癌H22实体瘤生长的影响
• 4.3.3 无根藤生物碱对H22小鼠瘤组织细胞形态学的影响
• 4.4 讨论
• 第五章 无根藤生物碱抑制肝癌H22的机制初探
• 5.1 材料
• 5.1.1 实验材料
• 5.1.2 药品
• 5.1.3 主要仪器
• 5.2 方法
• 5.2.1 DNA梯度电泳
• 5.2.2 无根藤生物碱对DNA拓扑异构酶Ⅰ活性的影响
• 5.2.3 无根藤生物碱H22细胞Bax、Bcl-2表达的影响
• 5.2.4 统计分析
• 5.3 结果
• 5.3.1 DNA梯度电泳电泳
• 5.3.2 无根藤生物碱对DNA拓扑异构酶Ⅰ活性的影响
• 5.3.3 无根藤生物碱H22细胞Bax、Bcl-2表达的影响
• 5.4 讨论
• 第六章 小结与展望
• 参考文献
• 攻读学位期间承担的科研任务与主要成果
• 致谢
• 个人简历