论文摘要
目的 初步研究和建立微型寡核苷酸芯片快速检测脑脊液标本中常见病原菌的方法,为最终完善并建立脑脊液病原微生物感染寡核苷酸检测芯片的技术路线和实验方案进行初步探索。 方法① 通过对脑脊液标本中常见病原菌16S rRNA基因保守区的序列分析,设计通用引物（Universal primer, UP）,对不同细菌的DNA进行UP-PCR扩增,确定标本是否有细菌感染。②用Primer Premier软件分别设计所有细菌的通用探针、革兰阳性和阴性菌通用探针、肠杆菌科的属探针、嗜血杆菌属探针、脑膜炎奈瑟菌、金黄色葡萄球菌探针、凝固酶阴性葡萄球菌探针、肺炎链球菌探针,及产单核李斯特菌探针,将探针加尾后固定于尼龙膜上,制成简易寡核苷酸芯片。③提取各病原体DNA后UP-PCR扩增,扩增过程中用Bio-16-dUTP进行标记;将上述扩增产物变性后分别与点有各种探针的尼龙膜反向杂交,然后用碱磷酶标记链霉亲合素进行显色。④对检测体系的敏感性和特异性进行了测试;⑤利用该寡核苷酸芯片检测方法对32例经临床实验室常规培养鉴定方法确定为细菌感染的CSF标本进行鉴定。 结果 ①所有实验菌株经UP-PCR扩增均获得372bp左右的产物,与设计相符。②该方法最低可检测出10CFU/mL的大肠埃希菌;③每种探针只与通用探针及其相应的细菌DNA杂交,而不与其他细菌探针及阴性对照探针杂交,表明所有探针均具有较高的特异性;④该方法和常规培养鉴定方法对32例临床CSF标本的检测结果完全一致。 结论 本研究初步建立的CSF病原菌寡核苷酸芯片检测芯片能够准确、敏感、快速、高效地检测脑脊液标本中病原菌的感染;本研究结果为进一步完善和建立脑脊液病原微生物感染寡核苷酸检测芯片打下了基础,并值得临床推广应用。
论文目录
相关论文文献
- [1].不同病原菌所致新生儿化脓性脑膜炎的临床特点分析[J]. 山西卫生健康职业学院学报 2019(05)
- [2].贵州省余庆县茶褐枯病病原菌的鉴定[J]. 植物保护 2020(02)
- [3].金魔芋炭疽病病原菌生物学特性研究[J]. 云南农业 2020(02)
- [4].肺结核患者合并其他病原菌肺部感染的临床特点及危险因素分析[J]. 中国感染与化疗杂志 2020(03)
- [5].探究口腔颌面外科手术后感染的病原菌分布及感染因素[J]. 黑龙江中医药 2020(04)
- [6].临床常见病原菌的分布及其耐药性检测分析[J]. 中国现代药物应用 2015(08)
- [7].儿童反复呼吸道感染病原菌分布及影响因素探究[J]. 临床医药文献电子杂志 2019(90)
- [8].呼吸与危重症医学科治疗肺癌并感染病原菌分布及耐药性分析[J]. 临床医药文献电子杂志 2019(91)
- [9].糖尿病足部感染患者病原菌检验与耐药性分析[J]. 双足与保健 2019(24)
- [10].泌尿外科术后感染的病原菌分布和影响因素分析[J]. 中国现代医生 2019(35)
- [11].危重症心力衰竭患者肺部感染的病原菌分布及其影响因素研究[J]. 河北医科大学学报 2020(03)
- [12].320例肝癌介入化疗患者医院感染的病原菌分布及影响因素分析[J]. 现代消化及介入诊疗 2020(04)
- [13].老年患者下呼吸道感染病原菌检验的意义及结果研究[J]. 心理月刊 2020(12)
- [14].Ⅳ期压疮感染患者的临床特征、病原菌分布及耐药性分析[J]. 湖南师范大学学报(医学版) 2020(02)
- [15].贵阳花溪久安茶树炭疽病病原菌(Colletotrichungloeosporioides)的分离鉴定及生物学特性[J]. 江苏农业科学 2020(11)
- [16].青海某地区住院患者病原菌的分布与药敏分析[J]. 青海医药杂志 2017(11)
- [17].腹泻便病原菌检验结果的临床探讨[J]. 中国医药指南 2018(29)
- [18].对口腔颌面部间隙感染治疗方法及其感染病原菌类型的研究[J]. 当代医药论丛 2017(06)
- [19].老年下呼吸道感染患者主要病原菌分布及其耐药性分析[J]. 中国农村卫生 2017(11)
- [20].慢性化脓性中耳炎主要需氧病原菌及耐药性分析[J]. 临床医药文献电子杂志 2017(25)
- [21].泌尿外科患者临床感染病原菌分布与感染因素分析[J]. 中外医疗 2017(23)
- [22].胆道感染患者病原菌分布与临床特征分析[J]. 中华医院感染学杂志 2016(08)
- [23].血液内科与其他内科医院感染的病原菌学比较分析[J]. 中国农村卫生 2016(06)
- [24].农用链霉素对核桃黑斑病伴生病原菌成团泛菌的抑菌活性[J]. 绵阳师范学院学报 2016(05)
- [25].云南省河口县香蕉枯萎病病原菌的分子鉴定及耐热性研究[J]. 云南农业科技 2016(03)
- [26].病原菌新基因功能的研究策略[J]. 中国人兽共患病学报 2016(07)
- [27].中枢神经系统感染患者的病原菌分布特征及其外周血细胞因子对预后的影响[J]. 中华医院感染学杂志 2016(17)
- [28].杧果红点病病原菌的鉴定[J]. 中国南方果树 2015(06)
- [29].198例孕前体检和孕产妇分泌物真菌感染病原菌分布和耐药性分析的临床观察[J]. 中国卫生检验杂志 2020(02)
- [30].非标记表面增强拉曼光谱在病原菌检测中的应用[J]. 生物技术通讯 2020(02)