论文摘要
目的:本研究根据全氟化合物中的全副辛烷磺酸基化合物（PFOS）、全氟辛酸（PFOA）与过氧化物酶增值激活受体（PPARα）特异性结合的特性和新型荧光标记物量子点（QDs）建立一种全新的针对环境水体中PFCs的快速、高通量的分子生物学荧光检测方法。方法:制备PFOS-BSA复合体并将其包被在酶标板上,加入各浓度组标准品PFOS与固定的PFOS竞争激活PPARα,之后将PPARα-PFOS复合体转移至包被PPARα特异性抗体的酶标板中进行固定。将Biotin标记的DNA探针加入到酶标板中,再用QDs作为荧光标记物,通过亲和素-生物素系统标记在PPRE的DNA双链上,构成特异性量子点荧光探针,最后通过检测结合在PFOS激活的PPARα受体上的荧光探针的信号强度来定量检测PFOS,之后根据荧光强度和对应实验组的PFOS浓度绘制标准曲线,利用该方法同样对PFOA进行检测。按照国家标准采集环境水样并进行预处理,分别用上述方法和高效液相色谱质谱联用（HPLC/MS）方法进行检测,根据检测结果和标准曲线计算得出环境水样中PFCs的浓度。结果:利用QDs荧光生物检测方法通过测量不同浓度的PFOS、PFOA标准品,检测QDs信号的变化并绘制出标准曲线（PFOS: y = 19.112x-23.995, R2 = 0.9642; PFOA: y = 17.601x-20.914, R2 = 0.973）,结果显示该方法在浓度为2.5 ng/L—75 ng/L范围内线性最优并具有良好的重复性,最低检测限为2.5 ng/L,加标回收率分别为107.8 %和110.3%根据不同浓度的标准品检测结果的峰面积绘制标准曲线（PFOS: y = 2E-05x-26.479, R2 = 0.996; PFOA: y = 2E-05x-25.023, R2 = 0.997）,结果显示该方法浓度2.5 ng/L—75 ng/L范围内具有良好的重复性,最低检测限为1 ng/L,加标回收率分别为104.3 %和105.9 %。分别用两种方法对长江（武汉段）、汉江（武汉段）、东湖、武汉市某水厂以及某品牌桶装饮用水水样中PFCs浓度进行检测,两种方法的检测结果一致性良好。结论:QDs荧光生物检测方法在实际环境水样PFCs检测中具有突出的优势,它既具备了免疫荧光方法的快速和简便的特点,并且通过应用新型荧光标记物QDs,相对于传统荧光技术提高了灵敏度和准确性,节约了时间和经济成本,在大样本量的筛选方面有广阔的应用前景。