聚羟基脂肪酸酯（PHA）作为组织工程血管材料的体外研究

论文摘要

一系列含有0-40%4HB （mol%）的弹性体聚合物——聚-3-羟基丁酸-4-羟基丁酸酯（poly（3-hydroxyoctanoate-co-4-hydroxybutyrate） ,P3HB4HB）被用于研究对兔血管平滑肌细胞（RaSMCs）弹性蛋白表达的作用,并以此来评估P3HB4HB的生物相容性及其对RaSMCs合成弹性蛋白的影响。在本实验中,除40%4HB外,其它三种P3HB4HB被制作成多孔三维支架以评估其应用于组织工程血管（TEBV）的潜能。静态接触角检测、示差量热扫描检测（DSC）、cell count kit-8 （CCK-8）分析和Fastin弹性蛋白分析等检测方法被用于分析膜的性质及生物相容性。同时,扫描电子显微镜（SEM）、H&E及DAPI染色被用于分析细胞在三维支架中的形态及分布。CCK-8的结果表明,在整个培养过程中,生长在7%4HB膜上的RaSMCs活性最好。支架冰冻切片的H&E和DAPI染色证实,在所有的P3HB4HB支架中,细胞生长良好并形成了汇合的细胞层。对膜上培养的细胞合成的弹性蛋白的定量分析说明,在同等培养条件下,含有4HB的聚合物有利于弹性蛋白的表达和积累,培养在20%4HB上的细胞,其弹性蛋白的表达量要比在聚-3-羟基丁酸-3-羟基己酸酯（poly（3-hydroxybutyrate-co-3 -hydroxyhexanoate）,PHBHHx）高160%。各项检测结果都表明了P3HB4HB应用于RaSMCs相关的组织工程的潜能。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第1章 前言
• 1.1 聚羟基脂肪酸酯（PHA）概述
• 1.2 PHA的生物学功能研究
• 1.3 PHA的应用
• 1.4 组织工程
• 1.4.1 组织工程概述
• 1.4.2 PHA在组织工程中的应用
• 1.5 PHA在人工血管中的应用
• 1.6 弹性蛋白简介
• 1.7 选题的目的及其意义
• 第2章 材料与方法
• 2.1 实验材料和常用设备
• 2.1.1 基本实验材料
• 2.1.2 常用溶液
• 2.1.3 常用仪器设备
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 材料成膜
• 2.2.2 三维多孔支架的制备
• 2.2.3 热学分析（DSC）
• 2.2.4 膜接触角检测
• 2.2.5 膜表面自由能
• 2.2.6 细胞培养
• 2.2.7 细胞接种
• 2.2.8 SEM检测
• 2.2.9 CCK-8 检测
• 2.2.10 冰冻切片
• 2.2.11 DAPI染色
• 2.2.12 HE染色步骤
• 2.2.13 间苯二酚-品红染色
• 2.2.14 弹性蛋白定量检测
• 第3章 结果与讨论
• 3.1 生物材料膜的热学分析及表面物理化学研究
• 3.1.1 热学分析
• 3.1.2 接触角
• 3.1.3 表面自由能
• 3.1.4 膜的极性
• 3.1.5 讨论
• 3.2 P3HB4HB的生物相容性研究
• 3.2.1 各种材料的表面相貌
• 3.2.2 RaSMCs在生物材料膜上的形貌和分布
• 3.2.3 RaSMCs活力检测
• 3.2.4 讨论
• 3.3 P3HB4HB对RaSMCs合成弹性蛋白的影响
• 3.3.1 间苯二酚-品红定性检测弹性蛋白
• 3.3.2 弹性蛋白定量检测
• 3.3.3 讨论
• 3.4 RaSMCs在三维P3HB4HB支架上的培养
• 3.4.1 支架的内部结构
• 3.4.2 细胞在支架内的形态
• 3.4.3 支架切片的组织学染色
• 3.4.4 讨论
• 第4章 结论
• 参考文献
• 致谢
• 发表论文情况
• 个人简历