论文摘要
目的:通过建立糖尿病大鼠动物模型,采用酶联免疫的方法联合检测大鼠牙槽骨中Ⅰ型胶原交联羧基末端肽(ICTP)和Ⅰ型前胶原羧基末端前肽(PICP)的浓度水平,研究胰岛素控制下糖尿病大鼠正畸牙齿移动过程中骨代谢的变化,为临床上能否为糖尿病患者进行正畸治疗提供科学的实验依据与理论基础。目前通过对某些生化指标的测定可以从微观上反应骨代谢的变化水平,如骨钙素(BGP)、骨特异性碱性磷酸酶(BAP)以及尿吡啶交联物吡啶酚(Pyr)、脱氧吡啶酚(D2Pyr)、PICP和ICTP等都可以用来研究骨改变机制。其中PICP是成骨细胞活性的一个灵敏和特异性指标,而ICTP则是破骨细胞性胶原降解的灵敏指标,反映破骨细胞的功能。方法:1选用健康雄性6周龄SD大鼠105只,体重200-220克左右,随机分为三组,每组35只,即正常对照组(A组),糖尿病组(B组),胰岛素控制组(C组)分别进行正畸牙齿移动治疗;每组随机分为5小组,每小组7只,即治疗0天、7天、14天、21天、28天组。B、C组大鼠于适应性喂养1周后腹腔注射链脲佐菌素(STZ),注射剂量为50mg/kg,A组给予同等剂量的缓冲液腹腔注射。注射后72小时取大鼠尾静脉血测定血糖,留取尿液标本测定尿糖,以血糖>16.8mmol/L,尿糖+++~++++为标准,确定糖尿病大鼠模型。从造模成功后第四天开始,在C组大鼠颈背部皮下组织注射胰岛素以控制血糖,0~4U/天,根据血糖尿糖情况调整胰岛素用量,使随机血糖为8~10 mmol/L。为了去除因注射刺激对实验造成的影响,A组、B组给予同等剂量的生理盐水注射。造糖尿病模型三周后,全麻下(3%戊巴比妥钠腹腔注射)所有大鼠右侧上颌切牙与同侧上颌第一磨牙间置牙齿移动装置,牵第一磨牙近中移动,力值为30g。实验期间,所有大鼠自由进食、饮水。于牵磨牙近中移动后0天、7天、14天、21天、28天各小组7只大鼠全麻下心脏取血处死。2血糖测定:处死前取血测定血糖,筛选B组血糖>16.8mmol/L、C组血糖<10 mmol/L的大鼠作为实验结果测定对象。3标本采集:全麻下心脏取血处死动物后拔除右侧第一、二磨牙,于第二磨牙近中2/3处将牙槽骨断开,分别取第一磨牙近、远中牙槽骨,电子天平称重,-20℃冰箱保存待检。4检测:酶联免疫方法测定PICP和ICTP浓度。结果:1 PICP浓度变化A、C组在治疗前两周,PICP浓度有所下降,但无统计学意义(P>0.05),21天时浓度上升到最高值(P<0.01),28天时又回到原始水平(P>0.05)。B组7天时PICP浓度较0天时下降有意义(P<0.01),14天时浓度降至最低值(P<0.05),21天时升至最高值(P<0.01),28天时与0天无差异(P>0.05)。B组PICP水平只有在0天时比A组低无统计学意义(P>0.05)外,其余各个时间组均较A、C组低,又统计学意义(P<0.05)。C组除7天时比A组低(0.01<P<0.05),其它时间组均无差别(P>0.05)。2 ICTP浓度变化A、C组ICTP浓度水平在7天时均有所升高(P<0.05),然后在14天时降至原始水平,21天、28天组与0天组均无明显差别(P>0.05)。但B组在7天时ICTP浓度值升高,14天时下降但仍较0天组高(P<0.05),且均较A、C组同时期ICTP浓度水平高(P<0.05)。结论:1本实验显示,胰岛素控制下的糖尿病大鼠正畸牙齿移动可达到有效治疗效果。2糖尿病大鼠牙齿移动过程中发现有骨质疏松倾向,正畸治疗应慎重。
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